Гідроліз крохмалю в присутності ферментів слини при різному її розведенні

Забарвле-ння розчину з йодом

Розведення слини

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

1:1280

1:2560

1:5120

1:10240

Пробірки

1-а

2-а

3-я

4-а

5-а

6-а

7-а

8-а

9-а

10-а

Розрахунок. Відмітивши пробірку, де гідроліз крохмалю пройшов повністю при найменшій кількості фермента, по кількості нерозведеної слини в даній пробірці розраховують амілазну активність слини по наступній пропорції: А мл слини розщепило 2 мл 0,1% р-ну крохмалю; 1 мл слини розщепив х мл 0,1% р-ну крохмалю,

де А - кількість нерозведеної слини.

Наприклад, жовтувате забарвлення з’являється в 4-й пробірці, де слина була розведена в 160 разів; 1/160 мл слини розщепила 2 мл 0,1% р-ну крохмалю;

1 мл нерозведеної слини розщепив х мл 0,1% р-ну крохмалю:

2 х 1 х 160

х = -------------- = 320 мл 0,1% р-ну крохмалю.

1

Отже, амілазна активність слини А 38/30 дорівнює 320.

Література

1. Гонський Я.І., Максимчук Т.П. Біохімія людини. Тернопіль: Укрмедкнига, 2001. – 736с.

2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – 508с.

3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини. Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – 744с.

Обговорено і затверджено на засіданні кафедри, протокол №1 від 28.08.2008р.

Зав. кафедрою проф. Ерстенюк А.М.

ЗАНЯТТЯ № 13

ТЕМА: Анаеробний розпад вуглеводів.

Актуальність теми: Вуглеводам належить важлива роль в енергетичному забезпеченні організму людини. В умовах відсутності кисню анаеробний гліколіз служить єдиним джерелом утворення АТФ.

Навчальні цілі:

Знати: послідовність реакцій анаеробного гліколізу, енергетичний баланс та фізіологічне значення.

Вміти: визначати молочну кислоту і трактувати одержані дані.

Самостійна позааудиторна робота

В зошитах для протоколів:

1. записати в формулах послідовність реакцій анаеробного гліколізу, вказати ферменти і коферменти.

2. підготуйте вихідні дані для проведення лабораторної роботи „Відкриття молочної кислоти в м'язовій тканині”.

Контрольні питання

1. Анаеробний гліколіз: послідовність реакцій, ферменти і коферменти.

2. Сумарне рівняння анаеробного гліколізу, енергетичний баланс, фізіологічне значення.

3. Спиртове бродіння: послідовність реакцій, сумарне рівняння, енергетичний баланс та фізіологічне значення.

4. Інші види бродіння вуглеводів у бактерій.

Самостійна аудиторна робота

І. Анаеробне окислення глюкози:

1. Які макроергічні метаболіти утворюються в процесі гліколізу? Напишіть рівняння відповідних реакцій.

2. Який механізм утворення АТФ в гліколізі?

3. В яких реакціях має місце синтез АТФ? Відповідь підтвердіть рівняннями реакцій.

4. Яка кількість НАДН₂ утворюється і в яких реакціях використовується (гліколітична оксидо-редукція).

5. Порахуйте енергетичний баланс анаеробного гліколізу.

6. В яких органах і тканинах має місце анаеробний гліколіз?

7. Які клітини і чому одержують енергію виключно за рахунок анаеробного окислення глюкози?

ІІ. Спиртове бродіння.

1. Вказати відмінності молочнокислого, спиртового та інших видів бродінь;

2. Назвати ферменти і коферменти заключних реакцій спиртового бродіння;

3. Написати сумарне рівняння спиртового бродіння глюкози.

ІІІ. Виконати лабораторну роботу „Відкриття молочної кислоти в м'язовій тканині (реакція Уффельмана)” і захистити протокол.

Принцип методу.Молочна кислота в присутності феноляту заліза (реактива Уффельмана), забарвленого у фіолетовий колір, утворює лактат заліза жовто-зеленого кольору.

Хід роботи.М'язи подрібнюють ножицями і розтирають 1г їх в ступі з невеликою кількістю кварцового піску протягом 3 хв., добавивши 5 крапель води до утворення гомогенної маси. Потім доливають 3 мл води, перемішують і зразу ж фільтрують через змочену водою вату. 15 крапель фільтрату добавляють по краплях до реактиву Уффельмана (20 крапель 1% р-ну фенолу + 2 краплі 1% р-ну хлорного заліза) до появи фіолетового кольору. В присутності молочної кислоти фіолетове забарвлення рідини переходить в жовто-зелене, так як утворюється лактат заліза. Для порівняння проводять реакцію Уффельмана з розчином молочної кислоти і спостерігають появу жовто-зеленого забарвлення.