- •Избранные лекции по токсикологической химии Учебное пособие для студентов очного
- •Содержание
- •Введение в токсикологическую химию
- •Особенности химико-токсикологического анализа.
- •Организационная структура судебно-медицинской и судебно-химической экспертизы в рф
- •Правовые и методологические основы судебно-химической экспертизы
- •Правила производства судебно-химической экспертизы вещественных доказательств в схо смл Бюро смэ органов здравоохранения
- •Помещения лаборатории
- •Порядок проведения судебно-химической экспертизы Основные правила судебно-химического анализа (сха)
- •Документация при производстве судебно-химической экспертизы
- •Яд. Общая характеристика токсического действия. Формирование токсического эффекта как фактор взаимодействия яда, организма и окружающей среды. Понятие «яд», «отравление»
- •Классификация отравлений
- •Общая характеристика и классификация веществ, вызывающих отравление
- •2. Токсические вещества неорганической природы:
- •Токсикокинетика чужеродных соединений
- •Всасывание чужеродных соединений
- •Факторы, влияющие на абсорбцию чужеродных соединений
- •Распределение. Факторы, влияющие на распределение чужеродных веществ в организме.
- •Метаболизм чужеродных соединений
- •2. Восстановление:
- •Группа веществ, изолируемых дистилляцией («летучие яды»)
- •5.Сложные эфиры алифатического ряда
- •Объекты судебно-химического исследования. Пробоподготовка
- •Одноатомные спирты Этиловый спирт в химико-токсикологическом отношении
- •Токсикологическое значение спиртов
- •Токсикокинетика спиртов
- •Объекты исследования и пробоподготовка
- •Правила отбора проб для исследования
- •Экспертиза алкогольного опьянения. Клиническая диагностика
- •Химические свойства спиртов. Методы анализа в судебно-химической экспертизе отравлений и экспертизе алкогольного опьянения.
- •Количественное определение спиртов
- •Теоретические предпосылки метода
- •Основные газохроматографические параметры
- •Относительное время удерживания является величиной более постоянной, так как на него меньше влияют условия проведения хроматографического процесса.
- •Аппаратурное оформление метода гжх
- •Определение этанола методом гжх
- •Оценка результатов количественного определения этанола в крови человека
- •Группа веществ, изолируемых из биологического материала экстракцией и сорбцией. (подгруппа «Лекарственные средства») Номенклатура и классификация.
- •Теоретические основы метода изолирования
- •Факторы, влияющие на эффективность изолирования «нелетучих» ядов из биоматериала.
- •Общие и частные методы изолирования
- •Изолирование этанолом, подкисленным щавелевой кислотой (метод Стаса-Отто)
- •Выход 20-30%
- •3 Раза
- •(Основания алкалоидов)
- •Изолирование водой, подкисленной щавелевой кислотой (метод Васильевой)
- •3 Раза
- •(Молекулярные формы кислот,
- •Выход 30-40%
- •(Основания алкалоидов)
- •Частные методы изолирования :
- •(Кислотные формы барбитуратов)
- •2 Раза по 2 часа
- •(Основания алкалоидов)
- •Выход 50-70%
- •(Вещества кислого и нейтрального характера)
- •(Вещества основного характера)
- •Очистка изолируемых веществ от сопутствующих компонентов биоматериала.
- •Аналитический скрининг лекарственных веществ, имеющих токсикологическое значение.
- •Хроматографические скрининговые методы
- •Тонкослойная хроматография (тсх)
- •Газожидкостная хроматография (гжх)
- •Высокоэффективная жидкостная хроматография (вэжх)
- •Спектральные скрининговые методы
- •Абсорбционная спектроскопия
- •Иммунохимические методы в скрининге лекарственных веществ. Иммунохимический анализ (иха)
- •Производные барбитуровой кислоты в химико-токсикологическом отношении
- •Лактим-лактамная таутомерия барбитуратов.
- •Токсикокинетика барбитуратов (всасывание, распределение, метаболизм, выделение)
- •Токсикодинамика (развитие отравлений).
- •Алкалоиды в химико-токсикологическом отношении
- •Токсикологическое значение алкалоидов
- •3. Идентификация выделенных алкалоидов.
- •Экспресс - анализ интоксикаций
- •Экспресс-метод определения лекарственных веществ на основе хроматографического скрининга (хтс)
- •Группа веществ, изолируемых экстракцией неполярными растворителями. Пестициды
- •Пестициды как химические загрязнители
- •Питания
- •Токсикологическая характеристика и судебно-химическое значение пестицидов
- •3. Классификация пестицидов
- •II. Органические пестициды
- •Классификация по назначению (по объектам применения):
- •Классификация в зависимости от путей проникновения в организм насекомых: - Контактные – убивающие насекомых при соприкосновении с любой частью тела
- •Классификация гербицидов в зависимости от характера действия:
- •Контактного действия – действуют только на те участки растений, куда попали (органические соединения ртути, цианиды, кислота серная, медный купорос).
- •Классификация по формам применения пестицидов:
- •4. Изолирование и очистка
- •5.Анализ пестицидов
- •6.Основные группы пестицидов
- •Метод газожидкостной хроматографии (гжх) в анализе фоп
- •Группа веществ, изолируемых минерализацией («металлические яды») Общая характеристика группы
- •Металлические загрязнения
- •Марганец
- •Методы минерализации
- •Методика изолирования металлических ядов из биологического материала общим методом минерализации
- •Дробный метод анализа «металлических ядов»
- •Маскировка ионов в дробном анализе
- •Применение органических реагентов в дробном анализе
- •Применение диэтилдитиокарбаминовой кислоты и её солей
- •Свойства ддтк металлов
- •Применение дитизона
- •Свойства дитизонатов
- •Методы количественного определения
- •Группа токсикологически важных веществ, изолируемых экстракцией водой (минеральные кислоты, щёлочи и их соли)
- •Группа токсикологически важных веществ, требующих особых методов изолирования (соединения фтора)
- •Группа веществ, не требующих особых методов изолирования. Вредные пары и газы. Оксид углерода (II)
- •Литература
Экспресс-метод определения лекарственных веществ на основе хроматографического скрининга (хтс)
Точное установление природы яда невозможно без применения химических и физико-химических методов анализа. Особую актуальность среди них имеют методы скрининга.
Скрининг представляет собой систему поиска в биологических жидкостях неизвестного токсического вещества. Он является ведущим диагностическим тестом в затруднительных случаях клинической диагностики состояний интоксикации, таких, как коматозное состояние, комбинированное применение лекарств, подозрения на отравление.
Скрининг позволяет за минимальное время выявить из большого круга лекарственных средств одно или несколько веществ и в дальнейшем более целенаправленно вести анализ, либо исключить наличие яда.
Для скрининга лекарственных веществ в клинической практике наиболее приемлем метод хроматографии в тонком слое, который в сочетании с детектирующими реагентами и комплексом подтверждающих тестов является достаточно информативным и отличается экспрессностью. Простота выполнения делает метод доступным для большинства клинико-диагностических лабораторий.
Известно, что в живом организме любое лекарственное средство подвергается метаболизму, в результате чего могут появиться более активные в фармакологическом отношении соединения. Однако, большинство лекарственных средств, несмотря на метаболические превращения, обнаруживаются в биологических жидкостях (в основном в моче) в нативном состоянии. Метаболиты, сопутствующие неизмененным ядам, в большинстве случаев не мешают их обнаружению ввиду достаточно четкого разделения при хроматографировании.
В ХТС-скрининг, применительно к анализу мочи. входит:
Извлечение ядов.
Хроматографическое разделение веществ.
Обнаружение и количественное определение ядов.
Извлечение ядов из объекта проводят прямой экстракцией органическим растворителем, не смешивающимся с водой. Учитывая, что круг анализируемых веществ представлен соединениями кислотно-основного характера, экстракцию ведут сначала из кислой среды (рН 1) - для веществ кислого, нейтрального и слабоосновного характера, а затем из щелочной среды (рН 11) - для веществ основного характера. Среди экстрагентов отдается предпочтение наиболее универсальным - хлороформу и эфиру. В качестве экстрагента на первой стадии применяется эфир, так как хлороформ способен извлекать некоторые соединения основного характера (например, производные фенотиазина) из кислого раствора. На второй стадии используется хлороформ (или смесь хлороформ- н-бутанол 9:1). Соотношение водной и органической фаз обычно составляет 1:2 (50 мл мочи и 100 мл экстрагента), время экстракции не менее 5 минут.
ХТС-разделение ЛВ. В качестве хроматографических систем используют универсальные, такие, как:
- для веществ кислого, нейтрального и слабоосновного характера - CHCl3 - ацетон (9:1).
- для веществ основного характера - толуол - ацетон - этанол - 25% раствор NH4OH (47,5:45:7,5:2,5), которая может быть использована и для веществ первой подгруппы. Возможно использование и других универсальных систем.
Для обнаружения на хроматограмме веществ кислотного характера (барбитуратов, салицилатов), а также веществ слабоосновного характера (фенотиазинов, производных пиразолона) проводят последовательное опрыскивание хроматограмм растворами ДФК, HgSO4 и FeCl3.
Для обнаружения веществ основного характера хроматограмму обрабатывают реактивом Драгендорфа. Для усиления окраски и проявления некоторых веществ слабоосновного характера (кофеин) пластинку обрабатывают 20% раствором H2SO4. Идентификацию веществ проводят по величинам Rf относительно метчиков ( используя таблицы с величинами Rf).
Заключение о присутствии тех или иных веществ делают на основании результатов ХТС-исследования и подтверждающих химических реакций, из которых наиболее чувствительны реакции хромогенные и микрокристаллические.
При обнаружении лекарственных средств проводят их количественное определение, в основном спектрофотометрическим и фотоэлектроколориметрическим методами. Количественное определение токсических веществ в биологических жидкостях, в частности в крови, дает возможность установить тяжесть отравления и контролировать эффективность лечения в условиях клиники.
Токсические и смертельные концентрации различных лекарственных веществ в плазме крови человека приведены в справочных таблицах.