2.11. Лабораторная диагностика столбняка

Возбудитель: Cl.tetani - крупная тонкая палочка с круглой спорой на конце (барабанная палочка), грам+, подвижная, без капсулы. Обладает слабыми протеолитическими свойствами.

Диагностика проводится по той же схеме, что и газовой гангрены. Наибольшее значение имеет биопроба на мышах и опыт нейтрализации. Картина экспериментального столбняка: хвост мыши становится ригидным, задняя конечность вытягивается, туловище искривляется (восходящий столбняк), животное погибает.

Для ускоренного выделения палочек столбняка используют засев материала (или смешанной культуры со среды Китт-Тароцци) в конденсационную воду скошенной свернутой сыворотки (метод Филдса). Благодаря активной подвижности клостридий столбняка за 24 часа вырастают на верхней части косяка. Культура исследуется микроскопически и ею заражают белых мышей.

2.12. Лабораторная диагностика ботулизма

Возбудитель: Cl.botulinum - крупная палочка с субтерминальной овальной спорой ("теннисная ракетка"), грам+, подвижная, без капсулы, обладает выраженными протеолитическими свойствами. Основную роль играют серовары А, В, Е.

Материал для исследования: кровь, рвотные массы, промывные воды желудка, моча, испражнения, подозрительные на заражение пищевые продукты. Микробиологическая диагностика проводится аналогично для других клостридиозов. Наиболее информативный метод диагностики - реакция нейтрализации на белых мышах с использованием противоботулинических сывороток. Ставят ее непосредственно с исследуемым материалом, либо с выделенной культурой. Животные, не защищенные сыворотками, погибают при явлениях общей слабости, одышки, порезов и параличей конечностей, западения мышц живота ("осиная талия").

2.13. Серологическая диагностика сифилиса

Для серо- и ликвородиагностики сифилиса, а также для отборочных исследований на сифилис применяется следующий комплекс серологических ^реакций (КСР):

1. Микрореакция преципитации типа VDRL с кардиолипиновым АГ (КЛАГ) с плазмой крови или инактивированной сывороткой крови (экспресс-метод).

2. РСК с трепонемным и кардиолипиновым АГ (реакция Вассермана).

3. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ).

4. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

5. Иммуноферментный анализ.

Профилактическое обследование населения на сифилис должно проводиться экспресс-методом или КСР. С помощью микрореакции преципитации обследуются лица, подлежащие периодическим медицинским осмотрам на венболезни, а также лица, помещенные в медицинские вытрезвители, спецприемники, изоляторы для временного содержания под стражей и др. Эта реакция является не диагностическим, а отборочным тестом, в связи с чем на основании ее позитивности диагноз сифилиса не устанавливается, а обследуемые направляются к дерматовенерологу, который должен подвергнуть их клиническому обследованию и организовать исследование их крови в КСР, РИТ, РИФ.

Одной из основных серологических реакций при сифилисе является реакция Вассермана (РВ). Реакция Вассермана ставится в трех рядах пробирок с использованием двух антигенов: КЛАГ - неспецифического и трепонемного антигена - специфического.

Принцип реакции: реагины, находящиеся в сыворотке крови больных сифилисом, обладают свойством вступать в соединение с КЛАГ. Специфические антитрепонемные AT вступают в соединение со специфическим АГ (ультраозвученный трепонемный АГ). Образовавшиеся комплексы АГ+АТ сорбируют комплемент. Индикация достигается введением гемсистемы. Испытуемую сыворотку крови, разведенную 1:5, разливают в три пробирки: в первую добавляют специфический трепонемный АГ; во вторую - неспецифический кардиолипиновый АГ; в третью - физиологический раствор. В качестве контроля используют заведомо положительную (++++), слабо положительную (++) и отрицательную (+) сыворотки.

Оценка результатов. Используют систему четырех плюсов: полная задержка гемолиза - ++++ (резко положительная реакция); значительная задержка гемолиза - +++ (положительная реакция); частичная задержка гемолиза - ++ (слабо положительная реакция); незначительная задержка гемолиза - +; сомнительная - +.