- •1. Общая микробиология
- •1.1 Микроскопический (бактериоскопический) метод исследования
- •1.2. Противомикробные мероприятия
- •1.3.Классификация питательных сред
- •1.4.Культуральный метод исследования
- •1.5. Методы выделения чистых культур микроорганизмов
- •1. Метод механического разобщения микроорганизмов:
- •2. Метод заражения чувствительных лабораторных животных (биологический):
- •3. Методы, основанные на избирательной чувствительности микроорганизмов к воздействию внешних факторов:
- •1.6. Определение биохимических свойств микробов
- •1.11. Биологический (экспериментальный) метод исследования
- •1.12. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
- •1.13. Методы генетического анализа микроорганизмов
- •1.14. Методы изучения нормальной микрофлоры
- •2. Частная микробиология
- •2.1. Микробиологическая диагностика пневмококковых инфекций
- •II. Культуральный (бактериологический) метод:
- •2.2. Общие принципы диагностики острых кишечных
- •2.3 Диагностика кишечных эшерихиозов (колиэнтеритов)
- •2.4. Диагностика брюшного тифа, паратифов а и в, сальмонеллезов
- •2.5. Лабораторная диагностика кишечного иерсиниоза
- •2.6. Клебсиеллы. Лабораторная диагоностика склеромы и озены
- •2.7. Лабораторная диагностика холеры
- •2.8. Кампилобактерии. Методы диагностики кампилобактериоза
- •2.9. Диагностика пищевых отравлений бактериальной природы
- •2.10. Лабораторная диагностика газовой гангрены
- •2.11. Лабораторная диагностика столбняка
- •2.12. Лабораторная диагностика ботулизма
- •2.13. Серологическая диагностика сифилиса
- •2.14. Лабораторная диагностика хламидиозов
- •2.15. Микоплазмы, микоплазмозы
- •3. Общая и частная вирусология
- •3.1. Методы культивирования вирусов
- •I. Культуры клеток
- •3.2. Принципы диагностики вирусных инфекций
- •3.3. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов
- •3.4. Лабораторная диагностика спиДа
- •4. Другие инфекции
- •4.1. Классификация грибов. Методы диагностики микозов
- •Методы диагностики микозов
- •Лабораторная диагностика кандидомикоза
- •Лабораторная диагностика глубоких микозов,
- •4.2. Возбудители мадуромикоза
- •4.3. Возбудитель пневмоцистоза
- •4.4. Возбудитель донованоза
- •4.5. Возбудитель язвы Бурули
- •4.6. Возбудитель мелиоидоза
- •Лабораторная диагностика
2.8. Кампилобактерии. Методы диагностики кампилобактериоза
Кампилобактерии - род Campylobacter семейства Spirillaceae - это тонкие изогнутые грам- палочки, образующие один или несколько завитков, могут быть S-образными или похожими на "крылья чайки". Толщина клеток - 0,2-0,5 мкм, длина - 0,5-8 мкм. Спор и капсул не образуют, подвижны, имеют полярно расположенный жгутик на одном конце или по жгутику на обоих концах клетки. Для них характерны быстрые винтообразные движения. Хемоорганотрофы, микроаэрофилы (растут при пониженном парциальномдавлении кислорода).
Род включает более 10 видов. Некоторые виды патогенны для человека и
вызывают кишечный кампилобактериоз. Патогенные виды отличаются от
непатогенных продукцией каталазы. Каталаза-отрицательные
кампилобактерии входят в состав нормальной микрофлоры полости рта и
кишечника человека и различных животных.
Наибольшее значение в развитии заболеваний у людей имеет C.jejuni (95%),
реже - C.coli, еще реже - С.fetus и C.laridis. Заболеваемость
кампилобактериозом носит спорадический характер, возникает при
употреблении в пищу инфицированного мяса птицы, телят, свиней, могут
быть вспышки молочного или водного характера. Болеют дети и взрослые,
в наибольшей степени заболеванию подвержены дети в возрасте до 4 лет (
в 90% случаев).
Кампилобактерии поражают тонкий кишечник. Они прикрепляются к
поверхности энтероцитов, оказывают цитотоксическое действие (выделяют
энтеротоксин), обладают высокой инвазивностью, что приводит к
бактериемии (у ослабленных лиц может быть сепсис). Клинически
заболевание проявляется острым гастроэнтеритом, который по тяжести
варьирует от кратковременной диареи до тяжелого кровавого поноса с
высокой температурой и явлениями интоксикации. Летальность невелика.
Иммунитет изучен плохо.
Диагностика кампилобактериоза: может проводиться по короткой или
полной схеме.
Материал: испражнения, рвотные массы, ПВЖ (промывные воды желудка).
Короткая схема: включает широкое бактериоскопическое исследование:
а) фазовоконтрастную микроскопию для выявления подвижности (клетка сжимается в кольцо и разжимается как пружина);
б) простую окраску препаратов (окрашиваются анилиновыми красителями за 20 секунд, энтеробактерии - за 2-3 мин);
в) окраску по Граму (выявление характерной морфологии).
На практике при наличии характерной клиники (диареи) достаточно короткой
схемы исследования.
Полная схема (бактериологический метод): проводится только с
материалами, в которых при микроскопии обнаружены кампилобактерии.
При этом, во многих случаях достаточно идентификации до группы С.jejuni-coli. При проведении исследования необходимы условия:
1. Наличие высококачественных питательных сред, содержащих редуцирующие вещества (активированный уголь), витамины, 5% лизированной крови (источник гемина), 5% свежей крови (эритроциты -дополнительный сорбент метаболитов), антибиотики (амфотерицин и др.) для подавления сопутствующей микрофлоры.
2. Культивирование в присутствии СО2 или специальных газовых смесей
(5% кислорода, 10% СО2, любой инертный газ). Можно использовать
эксикаторы со свечей или надувать двойные полиэтиленовые пакеты
выдыхаемым воздухом. 3. Культивирование при различных температурах (25°, 30°, 37°, 42°С) и дифференциация по чувствительности к налидиксовой кислоте и цефалотину.
При наличии роста нежных полупрозрачных колоний грам- подвижных палочек при 42°С, чувствительных к налидиксовой кислоте и устойчивых к цефалотину, выдается ответ: C.jejuni-coli.
В начале 80-х годов были выделены так называемые "желудочные" кампилобактерии, обозначенные как C.pyloridis. В дальнейшем они были исключены из рода Campylobacter и получили название Helicobacter pylori. Отличаются от кампилобактерии внутриклеточным паразитизмом и продукцией уреазы (кампилобактерии уреазу не продуцируют). Обладают цитотропизмом к клеткам эпителия желудка и кишечника, являются возбудителями язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. По современным представлениям, язвенная болезнь в 99% случаев - это хеликобактериоз.
Диагностика хеликобактериоза: несколько отличается от кампилобактериоза:
Материал: биоптаты. Гомогенизация материала.
Почти не применяется бактериологический метод.
Для диагностики используется комплексная микроскопия и определение уреазы в исследуемом материале. Хеликобактеры плохо красятся по Граму и не красятся простыми методами, поэтому используют специальные методы окраски. Исследования проводят также в фазово-контрастном и люминесцентном микроскопе.