Лабораторная Диагностика / учебное пособие по лаб д / Руководство по лаб. методам диагностики A.A.Кишкун

502 ■ Глава 8

вкрови больного указывает на острую и/или манифестную хроническую инфекцию. АТ класса IgA служат маркёрами реинфицирования, так как присутствуют в крови на протяжении короткого периода времени. АТ класса IgG имеют диагностическую ценность только при исследовании парных сывороток. Нарастание титра АТ даёт возможность предполагать наличие острой или манифестной инфекции. Диагностическая чувствительность обнаружения АТ IgG для установления этиологии заболевания составляет 99%, специфичность — 95%, для АТ IgA — 95% и 93% соответственно.

Для выявления Аг Chlamydia pneumoniae в смывах из ротоглотки или бронхиальном смыве используют метод ИФА, непрямой иммунофлюоресценции и ПЦР. Оптимальный культуральный метод выделения Chlamydia pneumoniae ещё не разработан.

Любое серологическое исследование, проводимое без одновременного использования ПЦР, а также при отсутствии парных сывороток, носит ретроспективный, а не диагностический характер.

Заболевания, вызываемые Chlamydia trachomatis

Трахома. Хронический кератоконъюнктивит, начинается с острых воспалительных изменений конъюнктивы и роговицы и приводит к образованию рубцов и слепоте.

В соскобах с конъюнктивы методом флюоресценции определяют хламидийные Аг в эпителиальных клетках. Чаще их обнаруживают на ранних стадиях заболевания в верхней части конъюнктивы.

Урогенитальный хламидиоз и конъюнктивит. Частота обнаружения хламидий у мужчин с негонококковым уретритом составляет 30−50%. Инфицированность женщин, имеющих первую беременность, достигает 5−20%, делающих аборт — 3−18%. Среди больных, имеющих признаки цервицита, хламидийную инфекцию выявляют в 20−40% случаев; сальпингит —

в20−70% случаев; инфекцию мочевых путей — в 5−10% случаев.

Синдром Фитц-Хью−Куртиса также относят к ранним осложнениям хла-

мидийной инфекции, он представляет собой острый перитонит и перигепатит, сопровождающийся асцитом.

Поражения дыхательных путей, вызываемые Chlamydia. У взрослых, больных хламидийным конъюнктивитом, нередко появляются симптомы поражения верхних дыхательных путей (фарингит, ринит, отит и др.), развивающиеся, по-видимому, в результате распространения хламидийной инфекции через носослёзный канал. Пневмония у взрослых обычно не развивается. У новорождённых, заразившихся от матерей, через 2−12 нед после родов возможны поражения респираторной системы вплоть до пневмонии.

Синдром (болезнь) Райтера Для синдрома Райтера. характерна классическая триада: уретрит, конъюнктивит и артрит. При этом синдроме хламидии можно обнаружить в синовиальной жидкости. Отмечают возрастание титра АТ классов IgA, IgM и IgG в ходе развития активной инфекции суставов.

Эндокардиты. Клинически протекают молниеносно, со значительным поражением клапанов аорты.

Латентная инфекция может проявиться спонтанно в форме малосимптомного осложнения. Более чем у половины пациентов отмечают признаки хронического простатита и/или сакроилеита.

Серологические исследования ■ 503

В настоящее время для диагностики хламидийной инфекции используют методы, позволяющие обнаружить Аг Chlamydia trachomatis в исследуемом материале (ИФА, метод флюоресцирующих АТ, ПЦР). Определение титра АТ в сыворотке крови к Chlamydia trachomatis — вспомогательный метод диагностики хламидиоза.

АНТИТЕЛА IgA, IgM, IgG К CHLAMYDIA TRACHOMATIS

ВСЫВОРОТКЕ КРОВИ

Диагностический АТ титр к Chlamydia trachomatis в крови: для IgM — 1:200

ивыше, для IgG — 1:10 и выше.

Во время острой хламидийной инфекции и вскоре после неё происхо-

дит повышение титра АТ IgA, IgM и IgG к Chlamydia trachomatis в крови. Инфицированный Chlamydia trachomatis организм синтезирует АТ, однако эти АТ имеют слабое защитное действие: обычно возбудители персистируют даже при наличии высоких титров АТ. Раннее интенсивное лечение может угнетать синтез АТ. Вследствие относительно большой «антигенной массы» хламидий при генитальных инфекциях сывороточные АТ IgG обнаруживают довольно часто и в высоких тирах. Так, у детей с хламидийной пневмонией они могут быть очень высокими: 1:1600−1:3200.

АТ IgM выявляют в острый период инфекции (уже через 5 дней после её начала). Пик АТ IgM приходится на 1−2-ю неделю, затем происходит постепенное снижение их титра (как правило, они исчезают через 2−3 мес даже без лечения). АТ класса IgM направлены против липополисахарида

иосновного белка наружной мембраны хламидий. Наличие АТ IgM свидетельствует об активности хламидиоза. АТ IgM не проникают через плаценту, синтезируются ещё у плода и относятся к собственным АТ новорождённых. Их наличие указывает на заражение (в том числе и внутриутробное)

исвидетельствует об активном процессе. Титр IgM-АТ может повышаться при реактивации, реинфицировании или суперинфицировании. Период их полураспада — 5 дней.

АТ класса IgA синтезируются к основному белку наружной мембраны и белку с молекулярной массой 60 000−62 000 хламидий. Их выявляют

всыворотке крови через 10−14 дней после начала заболевания, их титр обычно снижается к 2−4-му месяцу в результате успешного лечения. При реинфекции титр АТ IgA вновь возрастает. Если после курса лечения титр АТ IgA не снижается, это указывает на хроническую или персистирующую формы инфекции. Выявление высокого титра АТ класса IgA нередко свидетельствует о выраженном аутоиммунном процессе у больного, наиболее часто встречают у больных с синдромом Райтера. У таких больных наличие

АТ класса IgA говорит о тяжёлом течении заболевания.

АТ класса IgG появляются через 15−20 дней после начала заболевания и могут сохраняться многие годы. Реинфекция сопровождается увеличением имеющегося титра АТ класса IgG. Определение титра АТ к хламидиям

вкрови необходимо проводить в динамике, оценка результатов исследований, основанная на однократном исследовании, ненадёжна. АТ класса IgG проникают через плаценту и формируют антиинфекционный иммунитет у новорождённых. Высокие титры IgG-АТ защищают плод от инфекции, а также женщин от возникновения сальпингита после искусственного прерывания беременности; кроме того, обеспечивают кратковременную защи-

504 ■ Глава 8

ту (до 6 мес) от повторного заражения хламидиями. Период полураспада IgG-АТ составляет 23 дня.

Для установления диагноза необходимо одновременно определять АТ классов IgA и IgG, при неясном результате IgA — дополнительно исследовать АТ IgM.

Новорождённых и их матерей обследуют в 1−3-и сутки после родов, в случае отрицательного результата при наличии клинической картины заболевания — повторно на 5−7-е и 10−14-е сутки. Наличие АТ класса IgM при повторном исследовании, свидетельствует о врождённой инфекции (материнские АТ класса IgM через плаценту не проникают). Отсутствие

уноворождённых антихламидийных АТ не означает отсутствия хламидийной инфекции.

Определение титра АТ к Chlamydia trachomatis в крови — вспомогательный тест диагностики хламидиоза, так как из-за низкой иммуногенности

у50% больных хламидиозом АТ не обнаруживают.

Определение АТ классов IgA, IgM и IgG к Chlamydia trachomatis в крови используют для диагностики хламидиозной инфекции при следующих заболеваниях:

■уретриты, простатиты, цервициты, аднекситы;

■пневмония, воспалительные заболевания лёгких;

■болезнь Райтера, синдром Бехчета, инфекционные артропатии. Экспресс-диагностика урогенитального хламидиоза

Chlamydia trachomatis в материале из мочеполовых органов в норме отсут-

ствуют.

Метод основан на выявлении Аг Chlamydia trachomatis в соскобах из уретры, цервикального канала и конъюнктивы методом ИФА с визуальной оценкой результата (чувствительность — более 79%, специфичность — более 95%). Этот метод основан на наличии у хламидий родоспецифического липополисахаридного Аг. Он позволяет проводить быстрый скрининг возбудителя, однако окончательный диагноз устанавливают при помощи метода флюоресцирующих АТ или ПЦР. Результаты исследования выражают в виде положительного или отрицательного ответа. Чтобы получить удовлетворительные результаты исследования, необходимо соблюдать определённые правила: материал (соскоб) должен быть правильно взят

исвоевременно доставлен в лабораторию (в течение 2 ч). Экспресс-диагностику урогенитального хламидиоза применяют при урет-

ритах, простатитах, цервицитах, аднекситах.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ CHLAMYDIA TRACHOMATIS

В МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ФЛЮОРЕСЦИРУЮЩИХ АНТИТЕЛ

Chlamydia trachomatis в материале из мочеполовых органов в норме отсутствуют.

Принцип метода заключается в использовании моноклональных АТ, меченых флюоресцирующим изотиоцианатом против главного белка внешней мембраны хламидий, присутствующего во всех сероварах Chlamydia trachomatis, а также у элементарных и ретикулярных телец. Чувствительность метода достигает 90−95%, а применение моноклональных АТ обусловливает высокую специфичность — более 95% при наличии клинических проявлений урогенитального хламидиоза.

Серологические исследования ■ 505

При исследовании соскобов с конъюнктивы чувствительность метода флюоресцирующих АТ составляет 70−95%, специфичность — 98%.

Микоплазменная инфекция

В настоящее время описано несколько штаммов микоплазм. Микоплазмы — группа весьма разнообразных и характерных по морфологии бактерий размером 150−200 нм. Они не имеют плотной клеточной стенки и покрыты трёхслойной цитоплазматической мембраной. Микоплазмы грамотрицательны и обладают крайне низкой чувствительностью к большинству красителей. В зависимости от вызываемых ими патологических процессов у человека микоплазмы разделяют на шесть групп.

■Микоплазмы — возбудители респираторных заболеваний, основной возбудитель Mycoplasma pneumoniaе.

■Микоплазмы, связанные с заболеваниями мочеполового тракта, основные возбудители Mycoplasma hominis типа I, реже Mycoplasma hominis типа II и Ureaplasma urealyticum.

■Микоплазмы — возбудители ревматоидных процессов.

■Микоплазмы — возбудители сложных воспалительных синдромов.

■Микоплазмы, связанные с разнообразными по их локализации воспалительными процессами.

■Микоплазмы — условные сапрофиты, выявляемые в выделениях практически здоровых людей.

Наибольший интерес в клинической практике представляют возбудители первых двух групп заболеваний.

Респираторный микоплазмоз

Mycoplasma pneumoniae — возбудитель заболеваний респираторного тракта человека, паразитирующий на клеточных мембранах. Удельный вес респираторных микоплазмозов в общей группе респираторных заболеваний колеблется для разных групп населения от 35% до 40%. Микоплазменные пневмонии составляют 10−17% случаев общего количества пневмоний. С интервалами в несколько лет могут развиваться эпидемии пневмонии, вызываемой M. pneumonia, и при этом частота заболевания может вдвое превышать её обычный уровень. Лабораторную диагностику заболевания осуществляют в основном серологическими методами.

Правила забора материала для исследования. Клинический материал (лаважную жидкость, мазки из носоглотки) получают с помощью ватных тампонов, собранный материал наносят тонким слоем на поверхность чистого обезжиренного предметного стекла, подсушивают на воздухе и фиксируют.

ВЫЯВЛЕНИЕ АНТИГЕНА MYCOPLASMA PNEUMONIAE

В МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ПРЯМОЙ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ

Полученный мазок с материалом больного обрабатывают поликлональными АТ к цитоплазматической мембране Mycoplasma pneumoniae, мечеными ФИТЦ. При просмотре препарата в люминесцентном микроскопе в результате произошедшей реакции Аг−АТ определяют зелёную флюоресценцию микоплазм. Положительная оценка результатов исследования предполагает выявление в препарате не менее 10 ярко-зелёных гранул, чёт-

Серологические исследования ■ 507

На 7−8-й день АТ IgM выявляют у 88% больных в возрасте до 20 лет и у 40% пациентов более старшего возраста. У больных с микоплазменной инфекцией старше 60 лет повышения титра АТ IgM может не быть.

Одновременное определение АТ IgM и IgG позволяет выявить до 99% всех микоплазменных инфекций (первичных и реинфекций), а исследование только АТ IgM — 78% первичных заболеваний.

Определение АТ к Mycoplasma pneumoniae используют для диагностики микоплазменной инфекции при хронических воспалительных заболеваниях лёгких, вторичных иммунодефицитных состояниях.

Микоплазменная инфекция органов мочеполовой системы

Микоплазменные инфекции органов мочеполовой системы в настоящее время занимают ведущее место среди инфекций, передающихся половым путём. Они часто сочетаются с поражением гонококками, трихомонадами

иусловно патогенными микроорганизмами.

Диагноз урогенитального микоплазмоза основан на данных анамнеза,

клинического обследования и результатах лабораторных исследований.

ВЫЯВЛЕНИЕ АНТИГЕНА MYCOPLASMA HOMINIS

В МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ПРЯМОЙ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ

Mycoplasma hominis вызывает острые и хронические воспалительные заболевания урогенитального тракта, послеродовую лихорадку и сепсис, септические и спонтанные аборты. Mycoplasma hominis обнаруживают методом прямой иммунофлюоресценции при воспалительных заболеваниях органов урогенитальной сферы, по данным разных авторов, в 15−90% случаев.

Полученный мазок с материалом больного обрабатывают поликлональными АТ к цитоплазматической мембране Mycoplasma hominis, мечеными ФИТЦ. При просмотре препарата в люминесцентном микроскопе в результате произошедшей реакции Аг−АТ определяют зелёную флюоресценцию микоплазм. Положительная оценка результатов исследования предполагает выявление в препарате не менее 10 ярко-зелёных гранул, чётко выявляющихся на красноватом фоне препарата. При получении меньшего количества светящихся гранул в препарате и отсутствии в препарате эпителиальных клеток исследование рекомендуют повторить. Если количество эпителиальных клеток в препарате достаточно, а количество светящихся гранул менее 10, результат считают отрицательным.

У мужчин микоплазмы (Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum) чаще всего вызывают уретрит, у женщин — эндометрит и сальпингит, у новорождённых могут вызывать менингит, респираторные инфекции, септицемию. Однако микоплазмы — условно-патогенные микроорганизмы, входящие

всостав нормальной микрофлоры слизистых оболочек урогенитального тракта, поэтому простое их обнаружение, особенно при отсутствии выраженных клинических проявлений, очень трудно оценивать. В настоящее время считают, что микоплазмы ответственны за инфекцию только

втом случае, если присутствуют в большом количестве. Следовательно, диагностически значимы методы лабораторной диагностики, позволяющие не только идентифицировать микоплазмы, но и определить их концентра-

508 ■ Глава 8

цию в исследуемом материале. Для этих целей разработаны диагностические наборы «Mycoplasma DUO», позволяющие не только провести идентификацию микоплазм (Mycoplasma hominis и/или Ureaplasma urealyticum), но и установить их титр. Урогенитальные микоплазмозы этой тест-систе- мой идентифицируют и дифференцируют по их способности метаболизировать аргинин — для Mycoplasma hominis, мочевину — для Ureaplasma urealyticum. Титр микоплазм определяют согласно классическому методу разведений, патогенными их считают в том случае, если микоплазмы (Mycoplasma hominis или Ureaplasma urealyticum) выявлены в титре более чем 104 CCU/мл (цветоменяющие единицы в мл). Результаты исследования можно получить в течение 24−48 ч.

Другая проблема клинициста при обнаружении микоплазм в исследуемом материале в повышенном титре — правильный выбор антибактериального препарата для проведения эффективного лечения. Среди микоплазм часто встречают штаммы, резистентные к различным антибиотикам, поэтому необходимо одновременно с определением титра микоплазм, устанавливать их чувствительность к антибактериальным препаратам. Для этих целей разработаны диагностические наборы «SIR Mycoplasma», позволяющие определять чувствительность микоплазм к доксициклину, тетрациклину, джозамицину, эритромицину, клиндамицину и офлоксацину. Результаты исследования можно получить в течение 48 ч.

ВЫЯВЛЕНИЕ АНТИГЕНА UREAPLASMA UREALYTICUM

В МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ПРЯМОЙ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ

Ureaplasma urealiticum относят к виду микоплазм. Название «уреаплазмы» происходит от способности этого вида микоплазм синтезировать фермент уреазу, расщепляющий мочевину с образованием углекислого газа и аммиака. Ureaplasma urealyticum вызывает воспалительные заболевания урогенитального тракта и может стать причиной развития бесплодия как у мужчин, так и женщин. У мужчин Ureaplasma urealyticum способствует развитию простатита, уретрита и оказывает влияние на сперматогенез, что приводит к снижению фертильности. Бесплодие женщин обусловлено воспалительными процессами половых органов. Следует подчеркнуть, что Ureaplasma urealyticum принадлежит существенная роль в развитии бактериального вагиноза. По некоторым данным, частота выделения Ureaplasma urealyticum при бактериальном вагинозе составляет 46%. Забор материала на исследование, его проведение и оценка результатов аналогична диагностике Mycoplasma hominis.

АНТИТЕЛА К MYCOPLASMA HOMINIS В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

При использовании ИФА можно определить АТ классов IgM и IgG к Mycoplasma hominis. Этот метод более чувствителен и специфичен (92% и 95% соответственно), чем другие. Титры АТ IgM и IgG необходимо определять в острый период заболевания и через 2−4 нед. АТ IgM появляются в течение первой недели заболевания и исчезают после выздоровления, однако в отдельных случаях могут сохраняться в крови до 1 года. Содержание АТ IgG начинает повышаться несколько позже, чем IgM, но остаётся повышенным дольше. Титр IgG выше 1:10 и/или 4-кратное увеличение титра IgG-АТ в парных сыворотках указывают на текущую инфекцию.

Серологические исследования ■ 509

Инфекции, вызываемые простейшими

Амебиаз

Возбудитель амебиаза — Entamoeba hystolitica, существует в трёх формах: тканевой (forma magna), просветной (forma minuta) и цистной (forma cystica). Заболевание встречают повсеместно. Во многих районах здоровые носители составляют 14−20% всего населения. Диагноз кишечного амебиаза устанавливают на основании обнаружения возбудителя в фекалиях или тканях (исследуют биоптат) с использованием специальных красителей. В кале Аг Entamoeba hystolitica (адгезин) можно обнаружить методом ИФА. Диагностическая чувствительность ИФА для обнаружения адгезина Entamoeba hystolitica в кале составляет 96,9−100%, специфичность — 94,7−100%. В части случаев диагностика внекишечного амебиаза затруднена, так как тест-системы для обнаружения Аг Entamoeba hystolitica могут давать ложноположительные результаты. Нередко они обусловлены наличием других кишечных патогенов (Ascaris lumbricoides, Blastocystis hominis, Clostridium difficile, Cryptosporidium, Еntamoeba coli, Salmonella typhimurium, Shigella zonnei

и др.) Для разрешения таких случаев исследуют уровень специфических АТ в сыворотке крови.

АНТИТЕЛА К ENTAMOEBA HYSTOLITICA В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

АТ к Entamoeba hystolitica в сыворотке крови в норме отсутствуют.

Самые чувствительные из серологических методов — РПГА (чувствительность и специфичность при титре более 1:128 — около 95%), РИФ и ИФА (выявляет АТ IgM и IgG, более чувствителен и специфичен). АТ к Entamoeba hystolitica в сыворотке при использовании РПГА выявляют почти у всех больных с амёбным абсцессом печени (АСТ и АЛТ повышены в 2−6 раз, щелочная фосфатаза — в 2−3 раза) и у большинства лиц с острой амёбной дизентерией. Диагностическим считают нарастание титра АТ при исследовании парных сывороток через 10−14 сут не менее чем в 4 раза или при однократном исследовании титр выше 1:128. АТ обычно не выявляют у бессимптомных цистовыделителей (только в 9% случаев), что свидетельствует о том, что для синтеза АТ необходимо внедрение возбудителя в ткани, и у пациентов с иммуносупрессией. Повышенный титр АТ может сохраняться в течение нескольких месяцев или лет после полного выздоровления.

Специфические АТ в РИФ с амёбным Аг выявляют в 98−100% случаев клинически выраженного амёбного абсцесса печени, РИФ даёт положительный результат у 75−80% больных инвазивным амебиазом кишечника, особенно при молниеносном колите, амебоме и перитоните. При интерпретации результатов РИФ следует учитывать, что титр АТ 1:320 и выше свидетельствует, как правило, о клинически выраженной, чаще внекишечной форме амебиаза. В титре 1:80−1:160 АТ обнаруживают у больных амебиазом в момент обследования или переболевших в недавнем прошлом, а также в случае вялотекущих, стёртых форм кишечного амебиаза. Титр АТ 1:40 может быть выявлен у лиц с симптомами кишечного амебиаза при соответствующем эпидемическом анамнезе и неотягощённом статусе больного. В этом случае эффективно исследование парных сывороток. Подъ-

510 ■ Глава 8

ём титра АТ после лечения свидетельствует в пользу амёбной этиологии процесса. Ложноположительный результат в титре 1:40 может быть зарегистрирован у больных с системными и онкологическими заболеваниями. Низкий титр АТ (1:20−1:40) нередко обнаруживают среди бессимптомных носителей возбудителя амебиаза. Последовательное неуклонное снижение

упереболевших титра АТ ниже 1:20 — показатель эффективности лечения, подъём титров и появление клинических симптомов следует расценивать как рецидив болезни.

АТ IgM к Entamoeba hystolitica в сыворотке при использовании ИФА выявляют почти у всех больных с амёбным абсцессом печени (более чем

у90%) и у большинства лиц с острой амёбной дизентерией (в 84% случаев). Они исчезают в течение 6 нед после эффективного лечения. АТ IgG выявляют примерно с такой же частотой, что и IgM, они указывают на текущую (при нарастании титра АТ) или ранее перенесённую (если содержание АТ не изменяется) инфекцию. При наличии симптомов диареи серологические тесты обычно положительны более чем у 90% больных, при их отсутствии — менее чем у 50%.

Определение АТ к Entamoeba hystolitica применяют для диагностики амебиазной инфекции (амёбной дизентерии), наблюдения за динамикой заболевания и последствий инфекции.

Токсоплазмоз

Токсоплазмоз — заболевание, вызываемое облигатным внутриклеточным простейшим Toxoplasma gondii, имеющим сложный цикл развития. Окончательным хозяином токсоплазмы может быть домашняя кошка, а также дикие представители семейства кошачьих. При заражении кошки алиментарным путём паразиты проникают в эпителиальные клетки кишечника, где после нескольких бесполых генераций формируются макро- и микрогаметы. Половой процесс завершается образованием ооцист, которые выводятся во внешнюю среду. Человек — промежуточный хозяин паразита, но не выделяет возбудитель во внешнюю среду и не представляет эпидемической опасности для окружающих. В организме человека токсоплазмы размножаются только бесполым путём и проходят две стадии развития:

■эндозоит — бурно размножающаяся внутриклеточная форма, вызывающая разрушение клеток и воспалительную реакцию; наличие эндозоитов характерно для острой стадии токсоплазмоза;

■цисты — шарообразная форма паразита, окружённая плотной оболочкой и приспособленная к длительному существованию в организме человека; они локализуются в головном мозге, сетчатке глаза, мышцах и не вызывают воспалительной реакции; наличие цист характерно для хронической стадии токсоплазмоза; цисты продолжают медленно расти, их разрыв и разрушение приводит к рецидиву органных пора-

жений.

Основной путь заражения токсоплазмозом — пероральный (употребление сырого мяса, овощей и ягод, загрязнённых почвой, через грязные руки при контакте с кошками). Однако для клинической практики не меньшее значение имеет конгенитальный путь заражения — внутриутробное заражение плода от беременной через плаценту. Доказано заражение плода только от женщин с первичной инфекцией, приобретённой во время данной бере-

Серологические исследования ■ 511

менности. При заражении женщины в I триместре беременности врождённый токсоплазмоз у ребёнка регистрируют в 15−20% случаев, он протекает тяжело. При инфицировании в III триместре беременности инфицированными оказываются 65% новорождённых. У женщин с хроническим или латентным токсоплазмозом передача возбудителя плоду не доказана.

Следует различать инфицированность токсоплазмой (носительство) от собственно токсоплазмоза (заболевания), поэтому основным в лабораторной диагностике считают не сам факт обнаружения положительного иммунного ответа (АТ), а уточнение характера течения процесса — носительство или болезнь. Комплексное определение АТ классов IgM и IgG даёт возможность быстро подтвердить или опровергнуть диагноз. Основной метод в настоящее время — ИФА, позволяющий выявлять АТ классов IgM и IgG.

ВЫЯВЛЕНИЕ АНТИТЕЛ IgM И IgG К ТОКСОПЛАЗМЕ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

АТ класса IgM к токсоплазме в сыворотке крови в норме отсутствуют.

АТ IgM появляются в острый период инфекции (на первой неделе в титре 1:10), достигают пика в пределах месяца (на 2−3-й неделе после заражения) и исчезают через 2−3 мес (самое раннее — через 1 мес). Их выявляют у 75% врождённо инфицированных новорождённых и у 97% инфицированных взрослых. Отрицательные результаты определения АТ IgM позволяют исключить острую инфекцию длительностью менее 3 нед, но не исключают инфекцию более продолжительного срока. При реинфекции титр АТ IgM вновь повышается (при наличии иммунодефицита не повышается, в таких случаях для диагностики показана компьютерная или магнитно-резо- нансная томография головного мозга, выявляющая множественные плотные округлые очаги). Наличие в крови пациентов ревматоидного фактора и/или антинуклеарных АТ может привести к ложноположительным результатам исследования. У лиц с иммунодефицитом АТ IgM в острый период инфекции обычно отсутствуют.

Ранняя диагностика токсоплазмоза особенно важна для беременных вследствие риска внутриутробного заражения плода, способного привести к гибели плода (самопроизвольному аборту) или рождению ребёнка с серьёзными поражениями. Специфическое лечение женщин на ранних стадиях инфекционного процесса снижает риск поражения плода на 60%. Поскольку АТ класса IgM не проникают через плаценту, обнаружение их в крови новорождённого свидетельствует о врождённой инфекции.

АТ класса IgG появляются в период реконвалесценции и у переболевших сохраняются до 10 лет. Определение АТ класса IgG применяют для диагностики периода реконвалесценции токсоплазмоза и оценки напряжённости поствакцинального иммунитета. Ложноположительные результаты исследования можно получить у больных СКВ и ревматоидным артритом. Алгоритм обследования пациентов с подозрением на токсоплазмоз представлен на рис. 8-18.

Лицам с положительными титрами АТ на токсоплазмоз рекомендуют повторное проведение серологических исследований через 10−14 сут для установления динамики развития болезни. Отсутствие увеличения титров АТ свидетельствует о хроническом токсоплазмозе. Увеличение титров на 3−4 разведения сыворотки свидетельствует об активном течении инвазии.