- •Глава 1 Дыхание бактерий
- •Глава 2 Принципы и методы выделения чистых культур бактерий
- •2.1 Бактериологическое исследование
- •Посев петлей
- •Посев шпателем
- •Метод разведений Метод поверхностных штрихов. Методы выделения чистых культур, основанные на механическом принципе
- •Колонии по методу Дригальского
- •Метод штрихов
- •Методы выделения чистых культур, основанные на биологическом принципе
- •Этапы выделения чистых культур микроорганизмов
- •Выделение чистой культуры анаэробных бактерий
- •Выделение и идентификация анаэробных микроорганизмов
- •Среды для культивирования анаэробных микроорганизмов
- •Идентификация микроорганизмов с помощью бактериофагов
- •Литическое действие бактериофагов (справа – позитивный результат)
- •Фаготипирование бактерий
- •Определение бактериоциногенности микроорганизмов
- •Бактериоцинотипирование (зоны задержки роста)
- •Молекулярно генетические методы
- •Реакция гибридизации
- •Итог: Основные виды идентификации чистых культур
- •Характеристика колоній
- •Ориентировочная реакция агглютинации на стекле. В центре позитивный результат.
- •Важнейшие группы химиотерапевтических средств и механизмы их антимикробного действия
- •Колонии Streptomycetes, которые продуцируют стрептомицин
- •Механизм действия антибиотиков
- •Важнейшие группы антибиотиков и механизмы их противомикробного действия Антибиотики, подавляющие синтез бактериальной клеточной стенки
- •Полусинтетические пенициллины
- •Варианты цефалоспоринов
- •Антибиотики, нарушающие функции цитоплазматической мембраны (цпм) микроорганизмов
- •Антибиотики, ингибирующие синтез белка на рибосомах бактериальных клеток
- •Аминогликозидные антибиотики
- •Группа тетрациклинов
- •Левомицетин
- •Линкомицин
- •Макролиды
- •Антибиотики, ингибирующие рнк-полимеразу
- •К препаратам, которые используются во врачебной практике, ставятся определенные требования:
- •Резистентность микрорганизмов к антибиотикам
- •Плазмиды резистентности
- •Комбинированное действие антибиотиков
- •Определение чувствительности бактерий к антибиотикам
- •Основные наборы дисков, которые рекомендуются для определения чувствительности в зависимости от вида выделенной культуры и патологического материала
- •Предельные значения диаметров зон задержки роста и значения мпк антибиотиков для интерпретации результатов
- •Основные принципы рациональной антибиотикотерапии
- •V. Установление длительности курау антибиотикотерапии.
Плазмиды резистентности
Рис. (а) -резистенции плазмид. (в)-это найменшая часть ДНК бактериальной хромосомы. (с)- типический резистентный плазмид может нести гены для резистенции разных антибиотиков.
У некоторых микроорганизмов описан еще один класс мигрирующих генетических элементов - транспозоны. Часто такие элементы бывают у стафилококков, энтеробактерий (транспозон Tn551 несет маркеры резистентности к эритромицину, Tn552 - к пенициллину, Tn554 - к эритромицину и спектиномицину). Опасность их заключается в том, что они могут интегрироваться как с конъюгативними R-плазмидами, так и с трансдуцирующими r-факторами.
Рис. Структура гена
Плазмиды кодируют синтез ферментов, которые разрушают антибиотики. Например, стафилококки, резистентные к пенициллину, цефалоспоринам, продуцируют -лактамазу.
Грамотрицательные бактерии (штаммы Proteus, Klebsiella, Escherichia) также способны синтезировать этот фермент, который расщепляет ампициллин, некоторые цефалоспорины (цефалотин, цефалоридин, цефазолин и др.).
Резистентные к левомицетину бактерии синтезируют хлорамфеникол-ацетилтрансферазу, штаммы, устойчивые к аминогликозидам, - ферментыаденилирования, фосфорилирования, ацетилирования, которые направлены против соответствующих антибиотиков.
Рис. Возникновение резистентных форм
а)культура микробиологических клеток; б) ликвидация чувствительных клеток; с) клетки которые имеют резистентность
Борьба с лекарственно-устойчивыми бактериями проводится разными путями. К. ним относятся систематическое получение новых химиотерапевтических препаратов, которые отличаются от существующих механизмом антибактериального действия. Перспективным направлением является химическая модификация известных антибиотиков с защищенными активными группами, устойчивыми к бактериальным ферментам. Кроме того, проводятся исследования по изысканию ингибиторов, подавляющих активность бактериальных ферментов, а также препаратов, препятствующих адгезии бактерий на клетках макроорганизма.
Особое значение приобретают мероприятия, рекомендованные ВОЗ для ограничения распространения лекарственно-устойчивых форм бактерий. Это прежде всего систематическое изучение типов лекарственной устойчивости патогенных и условно-патогенных бактерий, циркулирующих в пределах отдельных регионов.
Своевременная информация лечащих врачей о циркулирующих в данном регионе лекарственно-устойчивых бактериях помогает в выборе наиболее подходящего по спектру действия препарата без предварительного определения чувствительности выделенных бактерий. Это позволяет избежать слепого использования большого числа антибиотических средств.
Рекомендуется также по мере возможности определять чувствительность выделенных бактерий к антибиотикам, а также ограничивать их применение без достаточных показаний. Запрещается использовать применяемые в медицине антибиотики в качестве консервантов пищевых продуктов и кормовых добавок, для ускорения роста, профилактики и лечения различных заболеваний животных (сальмонеллезов и др.)- В животноводстве рекомендуется применять такие антибиотики, которые не используются в медицинской практике. Большое значение имеет проведение эпидемиологического надзора за заражением окружающей среды лекарственно-устойчивыми бактериями, которые передаются с пищевыми продуктами, сточными водами, больничными отходами. С этой целью необходимо систематически выявлять носительство антибиотикоустойчивых бактерий и проведение других мероприятий.
Предупредить формирование антибиотикоустойчивых популяций можно за счет использования комбинаций двух антимикробных соединений или антибиотиков с препаратами, которые повышают адсорбцию и проникновение их в микробную клетку, способных интенсифицировать их деление, улучшать доступ препарата к бактериям.
При наличии устойчивых форм бактерий в организме можно применить препараты с другим механизмом действия; элиминацию плазмид соединениями, которые действуют на ДНК микробов и их мембраны, использованием антибиотиков с соединениями, которые блокируют ферменты, которые разрушают препараты (пенициллини, цефалоспорины, аминогликозиды, хлорамфеникол), повышают адсорбцию и проникновение антимикробных препаратов в клетку и повышают естественную чувствительность последних.