- •Переливание крови и ее компонентов.
- •Содержание занятия Понятие о гемотрансфузии. Современная доктрина в трансфузиологии
- •Источники крови для переливания
- •Заготовка, консервация и хранение крови
- •Тестирование заготовленной крови
- •Фракционирование крови
- •Показания и противопоказания к переливанию компонентов крови
- •Показания к переливанию эритроцитсодержащих компонентов крови
- •Показания к переливанию плазмы
- •Показания к переливанию тромбоцитов (тромбоцитарного концентрата)
- •Показания к переливанию лейкоцитов (лейкоцитарного концентрата)
- •Аутогемотрансфузии и реинфузия крови. Аутодонорство.
- •Организационные принципы переливания компонентов и препаратов крови
- •Антигенные системы крови
- •Система аво
- •Резус-система
- •Определение группы крови по системе (аво)
- •Определение группы крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками (прямой способ).
- •Определение группы крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами (перекрестный способ).
- •Определение группы крови с помощью моноклональных антител (цоликлонов).
- •Определение резус-фактора
- •Определение резус - принадлежности при помощи стандартного универсального реагента (в пробирках без подогрева).
- •Пробы на совместимость при проведении гемотрансфузии
- •Проба на выявление полных антител
- •Проба на выявление неполных антител
- •Биологическая проба.
- •Реакции и осложнения при гемотрансфузиях
- •Классификация
- •Острый гемолиз
- •Анафилактический шок
- •Гипертермические реакции (фебрильные негемолитические реакции)
- •Отсроченный гемолиз
- •Тромбоэмболия легочной артерии (тэла)
- •Воздушная эмболия
- •Бактериальный шок
- •Синдром холодовых гемотрансфузий
- •Волемическая перегрузка
- •Двс-синдром
- •Цитратная интоксикация
- •Гиперкалиемия
- •Синдром массивных гемотрансфузий
- •Аутоиммунная тромбоцитопения (тромбоцитопеническая пурпура)
- •Гемосидероз
- •Заражение инфекционными заболеваниями
- •Литература
- •Контрольные вопросы Общие вопросы трансфузиологии
- •Заготовка, консервирование, фракционирование, хранение крови.
- •Показания к применению компонентов крови
- •Антигенные системы крови и их типирование
- •Пробы на совместимость при гемотрансфузии
- •Реакции и осложнения при гемотрансфузиях
Определение группы крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками (прямой способ).
Указанные сыворотки выпускаются станциями переливания крови во флаконах или ампулах по 5 мл, подкрашенные в соответствующий группе крови цвет.
На этикетке должны быть указаны:
название учреждения, где изготовлена сыворотка;
групповая принадлежность сыворотки с обязательным указанием агглютининов;
номер серии;
титр агглютининов в сыворотке;
срок годности;
Для проведения реакции пригодны сыворотки с титром агглютининов не ниже 1:32.
Хранятся сыворотки в холодильнике при температуре +2-4ºС. Допускается замораживание сыворотки — ее можно использовать после оттаивания. Перед применением необходимо убедиться, что в сыворотке нет хлопьев и осадка, она сохранила соответствующий группе цвет. Перед постановкой реакции сыворотка должна согреться до комнатной температуры (+15-25ºС) в течение 30-40 мин. Тарелка или пластинка, на которой ставится реакция, также должна иметь комнатную температуру.
Техника определения группы крови при помощи стандартных сывороток
Оснащение:
Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп Оαβ(I), Аβ(II), Вα(III) двух серий и сыворотка группы АВо(IV) одной серии.
Изотонический раствор хлорида натрия.
Белые фарфоровые или любые другие пластинки (тарелки) со смачиваемой поверхностью, разделенные на четыре сектора, обозначенные соответственно группам крови.
Маркированные для каждой группы крови и серии сывороток пипетки.
Стеклянные или пластмассовые палочки с округлыми концами для перемешивания крови.
Техника выполнения:
На краю пластинки (тарелки) пишут фамилию и инициалы пациента.
Под соответствующими обозначениями на пластинку (тарелку) наносят по капле (приблизительно 0,1 мл) сывороток групп Оαβ(I), Аβ (II), Вα (III) двух серий. Сыворотку берут из каждого флакона отдельной пипеткой, которая затем остается во флаконе.
Кровь для исследования берут из места укола мякоти концевой фаланги пальца. Можно также использовать цельную венозную кровь или взвесь эритроцитов после сворачивания или центрифугирования крови с Htне менее 30%. Капли крови величиной приблизительно 0,01 мл последовательно наносят стеклянной палочкой на пластинку (тарелку) рядом с каплей стандартной сыворотки. Таким образом, соотношение крови и сыворотки получается 1:10.
Стеклянной палочкой перемешивают капли крови и сыворотки до равномерного окрашивания смеси в розовый цвет. Необходимо или каждый раз использовать новую палочку, или после каждого перемешивания промывать палочку в стакане с физиологическим раствором и насухо вытирать чистой марлей или ватой.
После перемешивания пластинку осторожно покачивают в руках до истечения времени постановки реакции. Этим предотвращается неспецифическая агглютинация эритроцитов («ложная агглютинация»).
Результат реакции оценивают через 5 мин. В случае наступления агглютинации с сыворотками всех групп ставится аналогичная реакция с сывороткой четвертой группы, одной серии. Заключение о принадлежности крови к IVгруппе делается при отсутствии агглютинации с сывороткойIVгруппы. При сомнительных результатах реакции по истечении 5 минут в капли, где произошла агглютинация можно добавить по 1-2 капли изотонического раствора хлорида натрия и слегка покачать пластинку. «Ложная агглютинация» при этом исчезнет.
Трактовка результатов реакции
Реакция гемагглютинации может быть положительной и отрицательной. При положительной реакции образуются агглютинанты, имеющие вид крупинок или хлопьев, а капля изогемагглютинирующей сыворотки почти полностью обесцвечивается. При отрицательной реакции сыворотка продолжает оставаться окрашенной в розовый цвет и в ней не обнаруживается агглютинантов. Результаты реакций с сывороткой одной и той же группы разных серий должны совпадать.
Необходимо указать, что в соответствии с новой «Инструкцией по применению компонентов крови» (2002) в отличие от Инструкции 1998 г в технику прямого способа определения групп крови внесены следующие изменения:
Соотношение крови и сыворотки – 1:10. Ранее – 1:5 – 1:7.
Добавление физиологического раствора производится только по истечении 5 минут, то есть по истечении срока проведения реакции. Ранее изотонический раствор хлорида натрия добавлялся по мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин. от начала реакции.
Прямой способ определения группы крови даже при технически безупречном выполнении предполагает хотя и очень небольшую (доли процента), но достоверную вероятность ошибки. Основными причинами возможных ошибок являются наличие подгрупп и «кровяные химеры». Для ликвидации возможных ошибок результат прямой реакции перепроверяется перекрестным способом.