Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Принципы надлежащей лабораторной практики (Principles of Good Laboratory Practice, GLP). Учебное пособие
.pdf
31
путем разделения организации деятельности, например, выполнения
различного вида деятельности в одном и том же помещении, но в разное
время; предоставления возможности уборки и предварительной обработки
в промежутке между проведением исследований;
или разделения персонала путем создания рабочих зон в лаборатории.
Пример: Зоны для фармацевтических препаратов
Зона для проведения операций с лекарственными средствами представляет собой лабораторию, характеризующуюся следующим рабочим
потоком (процессом): получение, хранение, дозирование, взвешивание испытуемого объекта, смешивание с растворителем/разбавителем, передача
приготовленного объекта для испытания в отдел с животными (виварий) и
удаление отходов.
2.4.1. Размер
Размер производственных площадей лаборатории должен быть достаточным для того, чтобы вместить необходимое число сотрудников и позволить им выполнять свою работу, не опасаясь столкновения с коллегой
или смешивания различных материалов. Площадь рабочего места каждого
оператора должен позволять ему эффективно выполнять свою работу.
Кроме того, уровень физического разделения между рабочими местами должен снижать опасность перекрестного загрязнения или смешивания
испытуемых объектов. Хранилища для испытуемых объектов должны
быть изолированы от помещений или зон, содержащих тест-системы, с целью обеспечить им адекватную защиту от инвазии, загрязнения и/или заражения (ГОСТ Р 53434, п.4.3.2.3), т.е. должны соответствовать требованиям по обеспечению идентичности, концентрации, чистоты и стабильности, а также безопасному хранению опасных веществ.
Зона для фармацевтических препаратов является весьма уязвимой, и
доступ в эти помещения должен быть ограничен.
Обработка и удаление отходов должны быть выполнены таким образом, чтобы не подвергнуть опасности проведение исследований и не исказить их результаты (ГОСТ Р 53434, п. 4.3.5). С этой целью необходимо
обеспечить соответствующие условия для сбора, хранения и вывоза отходов, а также процедур их дезактивации и транспортировки.
2.4.2. Конструкция
Лаборатория должна быть построена из материалов, которые можно
легко очистить и которые не аккумулируют испытуемые материалы/объекты и препятствуют перекрестному загрязнению. В лаборатории
должна быть вентиляционная система, которая обеспечивает направление
потока воздуха от оператора через фильтры, которые предохраняют персонал и препятствуют перекрестному загрязнению. Большинство современных зон, предназначенных для работы с фармацевтическими препаратами,
проектируется в стиле «бокс», причем каждый бокс имеет независимую
систему воздухоотведения.
32
2.4.3. Распределение зон в лаборатории
Душевая, туалет
В лаборатории должны существовать отдельные зоны:
для хранения испытуемых объектов в различных условиях;
для хранения стандартных объектов/образцов;
для обработки летучих материалов;
для взвешивания;
для смешивания;
для хранения приготовленных объектов испытания;
для уборки помещения;
для офисов (кабинетов) и буфетов/столовых;
для раздевалок.
Пример плана помещения приведен на рис. 3.
Рис. 3. Пример плана помещений ИЦ
Пример: Помещения для животных
Для сведения к минимуму влияния среды на животных, помещение
должно проектироваться и функционировать таким образом, чтобы предотвращать контакт животных с заболевшими особями или испытуемыми
объектами, которые подлежат исследованию в другом эксперименте. Требования должны различаться в зависимости от природы и продолжительности исследования, выполняемого в этих помещениях.
33
Риск загрязнения должен быть уменьшен за счет системы «барьеров»,
когда все поставщики, штат сотрудников и обслуживающий персонал
должны пересекать барьер контролируемым образом (рис. 4).
Рис. 4. Вход и выход в помещения ИЦ с учетом принципа барьерной системы
(разделения «чистых» и «грязных» зон)
Типичное помещение для животных должно быть разделено на определенные зоны:
для видов животных;
для типов исследований;
для карантина;
34
для раздевалки;
для санпропускника;
для получения материалов для проведения исследований;
для хранения подстилок и специальных кормов;
для хранения испытуемых объектов;
для хранения чистых клеток;
для хранения принадлежностей для уборки;
для вскрытия животных;
для лабораторных процедур;
для инженерных сетей;
для удаления отходов.
Здание и помещения в нем должны обеспечить достаточное простран-
ство для размещения животных и эффективного проведения исследований.
В среде должна поддерживаться надлежащая температура, влажность и
воздухоотведение. Покрытие стен, дверей, потолков и полов должно быть
таким, чтобы уборка могла проводиться легко. При этом не должно быть
щелей и выступов, где может накапливаться грязь, пыль, или неровных
полов, где накапливается вода.
Чтобы возможности или потребности лаборатории, а также уязвимые
рабочие процедуры не подвергались потенциальной опасности внешнего
воздействия, следует поддерживать определенный уровень разделения.
Этого можно достичь следующим путем:
следует минимизировать число сотрудников, имеющих доступ в зда-
ние;
необходимо ограничить доступ в помещения с животными;
рабочий поток/процесс должен быть организован таким образом, чтобы
чистые и грязные материалы перемещались вокруг помещений в разное время
суток, а коридоры убирались в промежутках между этими перемещениями;
нужно предъявлять требования к персоналу в отношении одежды, ко-
торую носят сотрудники в различных зонах в пределах помещения для животных;
следует обеспечить, чтобы уборка помещений осуществлялась в про-
межутке между проведением исследований.
2.5. ОБОРУДОВАНИЕ
Для надлежащего проведения исследования должно быть доступно
соответствующее оборудование. Оборудование, включая валидированные
компьютеризированные системы, используемые для получения, хранения
и поиска данных, а также для контроля параметров окружающей среды, по
характеру и расположению должно соответствовать целям и задачам исследования (ГОСТ Р 53434, п. 4.4.1).
Все оборудование должно быть пригодно для выполнения запланиро-
ванных исследований и надлежащим образом откалибровано. Регулярное
техническое обслуживание должно обеспечивать эксплуатационные харак-
35
теристики, обеспечивающие высокую точность измерения. Документация
и записи о ремонтных работах, плановом или внеплановом обслуживании
должны быть сохранены. Целью этих требований Принципов GLP является обеспечение достоверности произведенных данных и предотвращение
потери данных в результате использования неточного, неподходящего или
неисправного оборудования.
2.5.1. Пригодность
Пригодность оборудования может оцениваться при рассмотрении того
вида работы, которая должна осуществляться с применением конкретного
прибора. Например, нет необходимости использовать весы для взвешивания крысы с точностью до десятых долей миллиграмма, но они требуются
для проведения исследований в аналитической лаборатории.
2.5.2. Калибровка
Характеристики оборудования вне зависимости от того, предназначено оно для получения данных, как, например, аналитическое оборудование
либо весы, или для поддержания стандартных условий, как, например, холодильник или кондиционер, должны удовлетворять требованиям выполнения конкретного технического задания. Для подобной процедуры подтверждения необходимо проведение периодической поверки приборов.
Для измерительного оборудования поверка, как правило, подразумевает
использование стандартных материалов. Например, весы поверяют с использованием гирь с известными стандартными массами. Для конкретного
аналитического прибора при поверке используются образцы с известной
концентрацией, чтобы убедиться в том, что прибор работает должным образом, а также гарантирует получение данных, пригодных для заключительных расчетов. Калибровку следует проводить в соответствии с национальными или международными стандартами обеспечения единства измерения и СОП. Другое вспомогательное оборудование, такое, как кондиционеры или приборы, для поддержания постоянной температуры (термостаты) должно поверяться периодически, с частотой, которая позволяет
предпринимать меры в целях предупреждения и предотвращения вредного
воздействия на исследование и прописана в техническом задании.
Оборудование, используемое в исследовании, не должно влиять на состояние тест-систем (ГОСТ Р 53434, п.4.4.3.).
2.5.3. Техническое обслуживание
Требования Принципов GLP гласят, что должно быть предусмотрено
техническое обслуживание оборудования, используемого в исследовании,
включая регулярный профилактический осмотр, уход, калибровку в соответствии с СОП (ГОСТ Р 53434, п. 4.4.2). Это основано на том, что регулярное техническое обслуживание, безусловно, уменьшает вероятность
неожиданной поломки и последующей потери данных. Техническое обслуживание может выполняться двумя различными путями:
36
в плановом порядке, когда очередная проверка проводится независи-
мо от показателей оборудования, а ремонтные работы проводятся тогда,
когда при калибровке или плановой проверке обнаруживается, что работа
прибора не соответствует прописанным техническим характеристикам.
Плановое техническое обслуживание может быть полезно при наличии
большого числа приборов или приборов, не обладающих резервными или
альтернативными устройствами. Таким образом, плановое техническое обслуживание снижает риск поломки оборудования;
с другой стороны, некоторые типы оборудования, к которым относят-
ся современные компьютеризированные анализаторы или весы, предпочтительно регулярно проверять и поверять, чтобы вовремя обнаружить возникновение непредвиденных ситуаций. К мерам по устранению подобных
ситуаций можно отнести приобретение дублирующего оборудования или
возможность немедленного доступа инженера к конкретному прибору.
Для жизненно необходимого оборудования должны существовать, по
мере возможности, резервные устройства, используемые в случаях возникновения таких неполадок, как перебои в электроснабжении. Лаборатория
должна иметь возможность продолжать предоставлять необходимые услуги, чтобы избежать безвозвратной потери животных или данных в процессе исследования.
Например, для лаборатории, в которой проводятся исследования на
животных, может потребоваться, как минимум, резервный генератор, способный поддерживать необходимую среду в помещении для животных,
даже если в связи с возникшей непредвиденной ситуацией лаборатория не
может функционировать в нормальном режиме. В данном случае потеря
животных могла бы непоправимо повлиять на исследование, но резервные
устройства позволяют сохранить образцы до тех пор, пока электроснабжение не возобновится.
Чрезвычайно важно получение предупреждения о неисправности обо-
рудования как можно раньше. Частота проведения проверок должна быть
установлена таким образом, чтобы обеспечить выявление такого предупреждения, чему способствует использование сигнала тревоги, в том числе
когда непредвиденная ситуация возникает в период отсутствия сотрудников в лаборатории.
2.5.4. Документация
График планового обслуживания должен быть задокументирован,
чтобы пользователь оборудования мог убедиться в том, что оно обслуживалось соответствующим образом и в указанные сервисные интервалы.
Этому может способствовать «наклейка» на приборе или предоставление
четкого сервисного плана.
Записи о калибровке, поверках и обслуживании оборудования должны
показывать, что сотрудники и сервисная служба следовали лабораторным
СОП и что использование приборов в конкретном исследовании соответствует задачам исследования и проводилось согласно техническому заданию.
37
Из записей также должно быть видно, что по результатам проверок
были предприняты необходимые корректирующие меры, а также что все
сотрудники были в курсе возникновения непредвиденных ситуаций, когда
параметры выходили за допустимые пределы, и участвовали в принятии
необходимых мер по устранению неполадок.
Глава 3. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. СПОНСОР
Согласно Принципам GLP, спонсор представляет собой «физическое
или юридическое лицо, которое инициирует исследования, оформляет
заказ, поддерживает и/или утверждает проведение неклинических исследований и несет ответственность за его организацию и финансирование»
(ГОСТ 31888, п. 3.1). При этом спонсор должен гарантировать, что ИЦ
способен проводить исследования в соответствии с Принципами GLP
(ГОСТ 31888, п.4.1.2).
Роль и обязанности спонсора указываются в требованиях Принципов
GLP, касающихся характеристики испытуемого объекта, плана исследования, заключительного отчета, архивирования и представления данных регулирующему органу.
3.2. ПЛАН ИССЛЕДОВАНИЯ
В лаборатории должны быть документы, предписывающие порядок
проведения научного исследования. Они необходимы для того, чтобы:
утвердить основную программу, определения и принципы;
информировать персонал, выполняющий исследования и другие виды
деятельности;
предоставить ретроспективную документацию о том, что было запланировано ранее.
К числу этих документов относятся: утверждение программы, в рамках стандартных операционных процедур описывающей плановую деятельность; план исследования (или протокол), в котором подробно описывается, как должно быть организовано проведение каждого исследования,
и др. Все эти документы поддерживаются рекомендациями и другими
нормативными документами в рамках Принципов GLP.
План исследования (протокол) является центральным документом, с
помощью которого руководитель исследования руководит персоналом,
участвующим в исследовании, и третьими сторонами, к которым относятся
служба качества или спонсор в случае заключения договора с контрактной
(подрядной) научно-исследовательской организацией (contract research organization, CRO). В данной ситуации план исследования выполняет функции основы для заключения контракта. План исследования должен быть
разработан до начала исследования. План исследования должен быть ут-
38
вержден датированной подписью руководителя исследования и верифицирован в соответствии с Принципами GLP персоналом по обеспечению качества. План исследования должен быть утвержден также руководством
ИЦ и спонсором (ГОСТ Р 53434, п. 4.8.1.1).
План исследования содержит общий план исследования и описывает
методы и материалы, которые должны быть использованы в процессе исследования, и включает информацию о предварительном планировании.
Поскольку план исследования является основным средством для проведения инструктажа персонала в ходе исследования, содержание, стиль
и оформление этого документа должны соответствовать этой цели.
3.2.1. Содержание плана исследования
План исследования разрабатывается в соответствии с научными тре-
бованиями, предъявляемыми к исследованию; кроме того, содержание
плана исследования должно соответствовать требованиям Принципов GLP
(ГОСТ Р 53434, п. 4.8.2).
3.2.1.1. Принцип идентификации
В качестве средства уникальной идентификации всех элементов, ис-
пользуемых в ходе исследования, и для подтверждения идентичности всех
произведенных данных должна применяться система нумерации. Правил
для системы нумерации не существует.
3.2.1.2. Титульный лист и указание целей
Титульный лист должен быть информативным и кратким. Как мини-
мум, должны быть указаны полное наименование исследования, наименование испытуемого объекта, тип и цель исследования и тест-система. Особенно важно указать, зачем следует проводить исследования. Проект исследования должен быть разработан заранее, тогда, когда у разработчика
появится четкое понимание целей работы. Указание этих целей в плане исследования означает, что результаты исследования не могут быть по незнанию использоваться для каких-либо других целей. Цель исследования
может включать как научные, так и нормативные основания.
3.2.1.3. Идентификация испытуемых и стандартных/контрольных
объектов
Этот пункт включает не только наименование химического вещества
и/или номер кода испытуемого объекта по номенклатуре IUPAC, CAS и т.п.
(ГОСТ Р 53434, п.4.8.2.1), но и его описание и характеристики, а также сведения о методах его определения. План исследования должен также описывать используемые стандартные/контрольные материалы и растворители.
3.2.1.4. Информация о спонсоре и испытательном центре
(ГОСТ Р 53434,п. 4.8.2.2)
Спонсор и ИЦ могут входить в одну и ту же организацию или отно-
ситься к разным организациям. В плане исследования должно быть указано местоположение организации, где проводятся испытания, а также адре-
39
са всех консультантов, привлекаемых к работе. Имя (наименование) спонсора также должно быть указано.
Кроме того, должна быть приведена информация о спонсоре (имя и
адрес) и ИЦ с указанием адресов ИЦ и испытательных площадок, а также о
руководителе исследования и ответственном исследователе.
3.2.1.5. Информация о руководителе исследования и другом персонале
В плане исследования должны быть указаны имя и адрес руководителя исследования. В этот пункт также вносят информацию, необходимую
для идентификации обязанностей других научных сотрудников, которые
принимают участие в проведении исследования. Информация об ответственном исследователе (исследователях) должна также содержать сведения
об этапах исследования, переданных ему руководителем исследования для
ответственного выполнения. Как правило, большинство лабораторий
включают в план исследования имена научных сотрудников, которые несут ответственность за интерпретацию данных, полученных в рамках выполнения ими своих обязанностей (например, патологоанатомов, клинических патологов, химиков-аналитиков и др.). В случае контрактных (субподрядных) исследований в план исследования включают имя контролирующего или контактирующего со спонсором лица.
3.2.1.6. Даты (ГОСТ Р 53434, п. 4.8.2.3)
В плане исследования указывается дата утверждения плана исследования за подписью руководителя исследования, администрации ИЦ и, при
необходимости, спонсора. К планируемым датам исследования относятся
предполагаемые даты начала и завершения исследования, когда руководителем исследования подписываются план исследования и отчет об исследовании, и даты проведения экспериментальных исследований. Последние
соответствуют датам, когда получают первые и последние экспериментальные данные. План исследования может включать подробный планграфик или он может быть разработан отдельно.
Как известно из практики, планируемые даты могут сдвигаться вследствие различных причин. Правила изменения дат путем внесения изменений в план исследования или обновления независимой системы планирования проектов должны быть определены в стандартных операционных
процедурах, предназначенных для управления планом исследования.
3.2.1.7. Методы испытаний
В плане исследования должны быть указаны методы проведения испытаний со ссылками на соответствующие нормативные документы, в том
числе на методические рекомендации ОЭСР GLP, другие руководства и
методики (ГОСТ Р 53434, п. 4.8.2.4).
3.2.1.8. Обоснование выбора тест-системы (ГОСТ Р 53434,
п. 4.8.2.5)
При проведении экспериментов с использованием животных соответствующие виды и штаммы могут быть определены в руководящих (норма-
40
тивных) документах по проведению подобных испытаний. Однако все же
важно, чтобы в плане исследования указывались причины выбора конкретных тест-систем. К ним может относиться, в том числе, опыт работы
ИЦ с конкретными тест-системами, что может быть обусловлено особыми
научными или нормативными причинами.
3.2.1.9. Описание тест-системы (ГОСТ Р 53434, п. 4.8.2.5)
При проведении экспериментов на животных в этом пункте должны
указываться: вид, род, порода, линия, возраст, диапазоны массы тела, источник приобретения, а также способы их идентификации. Этот пункт
также должен содержать подробные сведения о содержании животных,
включая окружающие условия, специальный корм и источник его получения.
3.2.1.10.Проект эксперимента
В плане исследования должна быть приведена подробная информация
о проекте эксперимента, включающая описание процедур исследования в
хронологическом порядке, всех используемых методов, веществ и условий
проведения исследования, видов и частоты анализов, измерений, наблюдений и проверок, статистических методов обработки данных.
Дозирование:
уровень дозы;
частота введения;
использующийся растворитель/разбавитель;
метод подготовки;
условия хранения препаратов;
контроль качества.
Оценка групп или рандомизация животных.
Параметры, подлежащие измерению и исследованию:
идентификация проведения и частоты измерений;
дополнительные сведения или планируемые отклонения от СОП, ко-
торые дают полное представление о нестандартизированных процедурах,
или ссылки на них.
Примечание: В большинство планов исследования не включают ана-
литические методы, но они обычно описываются в документах «СОП»
или «Методы», которые поддерживаются в аналитических лабораториях
вместе с данными исследования.
Статистические методы.
3.2.1.11. Данные, сохраняемые после исследования, и период их хранения
Это список всех записей и документов, подлежащих хранению (ГОСТ
Р 53434, п. 4.8.2.6).
3.2.1.12. Обеспечение качества
Достаточно часто в плане исследования описывается программа по
обеспечению качества (Quality Assurance, QA), но это не является обязательным.
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]