Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Биотехнологический потенциал почвенных микроорганизмов. Учебно-методическое пособие

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
06.09.2026
Размер:
2 Мб
Скачать
употребляется в смысле относительной всеядности всего почвенного микробоценоза.
Кривая роста бактериальной культуры – зависимость количе­ства клеток в популяции от времени культивирования. На кривой роста выделяют четыре основные фазы: 1) лагфаза (фаза задержки роста), длительность которой зависит от начального количества (посевной дозы) и возраста посевного материала, а также от различий в составе старой и новой сред; если же в качестве посевного материала использу­ется культура, находящаяся в экспоненциальной фазе, то при одинако­вом составе сред выраженная лагфаза может отсутствовать; 2) логариф- мическая фаза, характеризующаяся экспоненциальным увеличением количества клеток; время удвоения числа клеток остается постоянным; происходит синтез первичных метаболитов; 3) стационарная фаза, наступление которой наблюдается в результате истощения лимитирую­щего субстрата или накопления продуктов метаболизма, замедляющих рост (увеличения количества клеток не происходит, поскольку скорость деления клеток равна скорости их отмирания, характеризуется синте­зом вторичных метаболитов); 4) фаза отмирания (автолиза), часто ха­рактеризующаяся экспоненциальным уменьшением количества жизне­способных клеток.
Криосохранение – многоэтапный процесс, обеспечивающий длительное хранение живых клеток, тканей и органов в состоянии ана­биоза при температуре жидкого азота (−140 °С и ниже). Основным условием является обратимое ингибирование процессов жизнедеятель­ности. Для сбора, учета, хранения и последующего распространения биологических образцов создаются специализированные криобанки. Метод используется и для создания коллекций культур клеток и тканей животных, растений.
Ксерофилы (греч. xeros – сухой, phileo – люблю) – организмы, обитающие в условиях очень низкой влажности.
Культивирование глубинное – выращивание микроорганизмов или культур клеток в толще питательной среды.
Культивирование поверхностное – выращивание микроорга­низмов или культур клеток на поверхности питательной среды (плот­ной или жидкой).
Культура микроорганизмов – развившиеся в процессе культи­вирования микроорганизмы, которые при выращивании на плотной среде образуют колонии, в жидкой – суспензию, осадок или пленку. Различают следующие культуры микроорганизмов: накопительная
91
культура, в которой преобладают представители одной физиологиче­ской группы и даже одного вида микроорганизмов; синхронная – куль­тура, в которой все клетки находятся на одинаковой стадии клеточного цикла и делятся одновременно; чистая – культура, полученная из одной клетки или одной колонии и содержащая микроорганизмы одного вида.
Культуральная жидкость – жидкость, полученная после отделе­ния биомассы от культуральной среды и содержащая питательные ве­щества и продукты жизнедеятельности клеток.
Культуральная среда – плотная или жидкая питательная среда, использующаяся для выращивания биологических объектов in vitro.
Культуральные признаки – морфологические признаки опреде­ленного микроорганизма, по которым его можно идентифицировать до рода, а иногда и до вида. Это внешний вид колоний, их размер и цвет, характер края, консистенция микробной массы и т.д. При выращивании методом укола с посевом на пробирку к таковым относятся цвет и ха­рактер роста микробной массы в толще столбика среды, а также степень ее разложения, при выращивании на жидких средах – цвет и внешний вид образующихся пленок, характер выделений (запах, пузырьки газа и т.д.).
Культуральные свойства микроорганизмов – характерные особенности роста микроорганизмов на жидких, полужидких и плот­ных питательных средах.
Ламинар-бокс – лабораторный прибор для работы с биологиче­скими объектами в стерильных условиях. Представляет собой шкаф, оборудованный осветителями, ультрафиолетовыми лампами и систе­мой подачи стерильного воздуха. Используется при микробиологиче­ских, молекулярно-биологических работах, работах с культурой клеток, тканей и органов. Стерильный воздух подается в бокс ламинарным по­током (равномерное движение воздуха без завихрений). Перемещение культур микроорганизмов осуществляется в специальных кюветах, бюксах, штативах или корзинах.
Лиофилизация, лиофильная сушка (греч. lyo – растворяю, phileo – люблю) – процесс высушивания клеток или тканей в заморо­женном состоянии в вакууме. При этом вода удаляется из заморожен­ных объектов путем сублимации льда, т. е. превращения его в пар, ми­нуя жидкую фазу. Метод лиофилизации позволяет в течение 10–20 лет и более сохранять без заметных изменений жизнеспособность клеток, а также их биологическую активность.
92
Литосфера (греч. lithos – камень, sfaira – шар) – твердая оболочка Земли, которая состоит из земной коры и верхней части мантии, до асте­носферы, где скорости сейсмических волн понижаются, свидетельствуя об изменении пластичности пород.
Литотрофы – автотрофная часть микробного пула почвы, у ко­торой синтез органического вещества из СО2 воздуха обеспечивается энергией окисления или восстановления неорганических веществ (ам­миака, нитрита, элементной серы, сероводорода, молекулярного водо­рода, минералов почвы).
Мезофилы – организмы, для которых температурный оптимум составляет 20–37 °С.
Метаболизм – обмен веществ в организме или отдельной клетке. Является совокупностью процессов анаболизма и катаболизма.
Микроаэрофилы – организмы, приспособленные к росту при очень низком содержании кислорода в среде. Им присуще аэробное ды­хание, когда в качестве конечного акцептора электронов используется кислород.
Микробиологический отклик – определенное изменение ка­кого-либо параметра питательной среды или субстрата, которое свиде­тельствует о явном присутствии искомого микроорганизма на (или в) среде и о выполнении им своей биохимической функции.
Микробиологический пересев, пассирование – перенесение in vitro уже выращенной культуры микроорганизмов из одной среды на
новую стерильную среду с целью продолжения роста и развития данной культуры микроорганизма.
Микробиологический посев – внесение клеток микроорганиз­мов или какого-либо исследуемого материала (образец почвы, проба воды, мяса и т.п.) на (или в) стерильную питательную среду с целью получения чистой или накопительной культуры.
Микробный пул – наиболее полное количество микроорганиз­мов определенной почвы. Под микробным пулом понимают все коли­чество микроорганизмов почвы, но всегда имеют в виду, что данное определение несколько условно, поскольку определение численности всех микроорганизмов почвы на настоящий момент невозможно.
Микробиология – наука о микроорганизмах (бактерии, вирусы, грибы, микроскопические водоросли и др.), т. е. об организмах, которые настолько малы, что увидеть их можно только с помощью микроскопа.
Микробы, микроорганизмы (греч. micros – малый) – микроско- пически малые организмы (до 500 мкм), преимущественно
93
одноклеточные (бактерии, одноклеточные грибы, водоросли, простей­шие), клетки которых нельзя увидеть невооруженным глазом.
Микробный ценоз почвы, микробоценоз – совокупность мик­роорганизмов, населяющих определенный участок почвы с более или менее однородными условиями и функционирующих как единое целое в трансформации органических и минеральных веществ данного био­геоценоза. Представляет собой саморегулирующуюся систему, но в то же время является подсистемой биогеоценоза или экосистемы. Микро­боценоз – совокупность микроорганизмов в составе определенного био- ценоза.
Миксотрофы – микроорганизмы, способные питаться как гото­вым органическим веществом, так и синтезировать его в собственных клетках за счет поглощения веществ только неорганического проис­хождения.
Мониторинг – система постоянного наблюдения за явлениями и процессами, происходящими в окружающей среде и обществе, резуль­таты которого служат для обоснования управленческих решений по обеспечению безопасности людей и объектов экономики. В рамках си­стемы наблюдения происходит оценка, контроль объекта, управление состоянием объекта в зависимости от воздействия определенных фак­торов.
Мясопептонный агар (МПА) – богатая питательными веще­ствами среда, на которой развиваются многие гетеротрофные микроор­ганизмы. Основой среды является агар-агар – растительный коллоид, получаемый из некоторых морских водорослей, в состав которого вхо­дят в основном полисахариды, а также ничтожно малое количество азо­тистых веществ. Большинство микроорганизмов не используют агар в качестве субстрата питания, он удобен как инертный уплотнитель среды, температура его плавления 100 °С, затвердевания – 40 °С.
Нанотехнология – междисциплинарная научная область, осно­вополагающим принципом которой является возможность целенаправ­ленного изменения свойств объектов на молекулярном и надмолекуляр­ном уровнях за счет регулирования размеров и формы их структурных элементов. Это междисциплинарная область фундаментальной и при­кладной науки и техники, направленная на регулируемую сборку или синтез из отдельных атомов и молекул веществ и материалов с линей­ным размером структурных элементов до нескольких нм (10–9 м).
94
Нейтрофилы: 1) организмы, развивающиеся в средах со значе­нием рН, близким к 7,0 (н-р, Escherichia coli, Pseudomonas); 2) одна из форм лейкоцитов крови.
Окрашивание по Граму – практически при каждом бактериоло­гическом исследовании микробиолог проводит проверку культуры по Граму. Грамотрицательные бактерии имеют особым образом устроен­ную клеточную стенку, которая состоит из нескольких белковых слоев (белок муреин). Вследствие такого устройства клеточной стенки в гра­мотрицательных бактериальных клетках транспорт веществ внутрь клетки и за ее пределы имеет свои специфические черты. Это обстоя­тельство является важным при изучении биохимической активности грамотрицательных микроорганизмов. Без изначального определения особенностей строения клеточной стенки невозможно правильно подо­брать питательную среду для дальнейшего культивирования и изучения грамотрицательных бактерий.
Олиготрофы (греч. oligos – малый, незначительный, trophe – пи- тание) – организмы, обитающие в условиях низкого содержания пита­тельных веществ. Составляет бóльшую часть почвенного микронаселе­ния, представители которого усваивают питательные вещества из рас­творов с низкой концентрацией как азотсодержащих (олигонитро-
филы), так и безазотистых углеродсодержащих органических (оли­гокарбофилы) соединений. Эта группа называется «микрофлорой рас-
сеяния» и является преемницей минерализационного процесса, активи­руемого зимогенной микрофлорой, и завершает разложение остатков свежего органического вещества. Могут служить в качестве базовых объектов биотехнологии.
Органотрофы – гетеротрофная часть микробного пула почвы, у которой синтез собственного органического вещества обеспечивается энергией окисления органических веществ других организмов.
Осмофилы – организмы, растущие в средах с высоким содержа­нием сахара.
Паразиты – гетеротрофная часть микробного пула почвы, анта­гонистически употребляющая в своем питании живое органическое ве­щество. Они используют живой организм хозяина как среду обитания. Среди почвенных микроорганизмов паразиты встречаются в симбиоти­ческих организмах лишайников (гриб паразитирует на микроскопиче­ской водоросли), а также во многих бактериях, грибах и актинобакте­риях под паразитарным действием вирусов и фагов.
95
Пастеризация – процесс однократного нагревания чаще всего жидких продуктов или веществ. Технология предложена в середине XIX в. французским микробиологом Луи Пастером. Применяется для обеззараживания пищевых продуктов, а также для продления срока их хранения. В зависимости от вида и свойств пищевого сырья используют разные режимы пастеризации. Различают длительную (при темпера­туре 63–65 °C в течение 30–40 мин), короткую (при температуре 85– 90 °C в течение 0,5–1,0 мин) и мгновенную (при температуре 98 °C в течение нескольких секунд) пастеризацию. При нагревании продукта на несколько секунд до температуры выше 100 °C принято говорить об ультрапастеризации. В процессе пастеризации в продукте погибают вегетативные формы микроорганизмов, однако споры остаются в жиз­неспособном состоянии и при возникновении благоприятных условий начинают интенсивно развиваться. Поэтому пастеризованные про­дукты хранят при пониженных температурах в течение ограниченного периода времени.
Патент (лат. patens – открытый, ясный, очевидный) – охранный документ, удостоверяющий исключительное право, авторство и прио­ритет изобретения, полезной модели, промышленного образца либо се­лекционного достижения. Срок действия патента зависит от страны па­тентования, объекта патентования и составляет от 5 до 35 лет. Автору или соавторам за использование патента выплачивается авторское воз­награждение (по договору с патентовладельцем). За предоставление ли­цензии на право производства продукта или использования способа па­тентовладелец (лицензиар) получает одноразовый платеж или ежегод­ные отчисления от лицензиата. Патент выдается государственным ор­ганом исполнительной власти по интеллектуальной собственности. В Российской Федерации таким органом является Роспатент, в США – Бюро по регистрации патентов и торговых марок США. Международ­ное регулирование осуществляют Всемирная организация интеллекту­альной собственности (выполняющая, в том числе, соответствующие функции при ООН), объединенные международные бюро по охране ин­теллектуальной собственности и др. Во Всемирной торговой организа­ции эти отношения регулируются, в том числе, «Соглашением по тор­говым аспектам прав интеллектуальной собственности».
Под изобретением понимается техническое решение в любой об­ласти, относящееся к продукту (в частности, устройству, веществу), способу (процессу осуществления действий над материальным объек­том с помощью материальных средств) или применению (в частности,
96
применение уже известного продукта или процесса по новому назначе­нию). Правовая охрана, которую предоставляет патент, защищает ре­шение, а не задачу.
Пептон (греч. peptos – сваренный) – продукт первичного (непол- ного) расщепления белков, образующийся под действием протеаз (пеп­сина, трипсина и др.). Его получают из рубца крупного и мелкого рога­того скота. Препарат легко растворяется в воде, при нагревании не свер­тывается, не выпадает в осадок при добавлении в раствор солей. Ис­пользуется в качестве компонента питательной среды для культивиро­вания микроорганизмов.
Персистентность – способность сохраняться какое-то время в окружающей среде, не теряя своей биологической активности.
Петля бактериологическая – инструмент микробиологических лабораторий. Используют для забора материала, взятия, переноса, по­сева, смешивания и других процедур с небольшой дозой культур бакте­рий и грибов. Состоит из пластмассового держателя и петли. Петлю из­готовляют из куска платиновой или никелево-стальной проволоки 7– 10 см в длину и диаметром 0,4–0,5 мм. Один конец проволоки закреп­лен в держателе, другой загнут в виде продолговатой петли размером 2×3 мм, причем ушко петли должно быть полностью замкнутым, без видимого зазора. Петлю стерилизуют до начала и после окончания ра­боты прокаливанием на пламени горелки в течение 10–15 с (никелево­стальную – 20 с). После прокаливания ее охлаждают на воздухе или о стерильную стенку пробирок (чашек). Такой же инструмент, но с пря­мым свободным концом называется бактериологической иглой. Ее при­меняют для посева культуры или материала в столбик плотных пита­тельных сред.
Пастеровская пипетка, или пипетка Пастера, – устройство, применяемое в микробиологии, а также в биотехнологии для производ­ства посева или пересева культур микроорганизмов. На сегодняшний день используются разовые полимерные пипетки Пастера, удобные и безопасные в обращении, однако это не всегда было так. Пастеровские пипетки могут быть использованы для решения задач из области химии. Предпочтение отдается стеклянным – они более прозрачны, химически и термически устойчивы, позволяют благодаря своей конструкции за­бирать раствор маленькими порциями. Ими даже можно произвести фильтрование в малых масштабах, прижимая пипетку ко дну посуды с раствором, содержащим осадок (раствор проникает в пипетку через микрощели).
97
Популяция микробного пула – совокупность особей микроор­ганизмов одного вида. В почвенной микробиологии термины микроб­ной ассоциации и микробной популяции почвы нередко приравнивают и употребляют как синонимы.
Пробоподготовка, подготовка пробы – совокупность действий над объектом анализа (измельчение, гомогенизация, экстракция, гидро­лиз, осаждение и пр.) с целью превращения пробы в подходящую форму (сухой остаток, раствор и пр.) и состояние вещества (основание, солевая форма, гидролиз конъюгатов и пр.), а также для концентрирования/раз­бавления аналита и избавления от мешающих анализу компонентов. Система пробоподготовки – совокупность технических устройств (ме­шалки, дробилки, смесители, центрифуги, регуляторы давления и рас­хода, дозаторы и т.д.), последовательно или параллельно производящих необходимые превращения, а также контрольно-измерительные при­боры, измеряющие и контролирующие параметры технологических операций (уровнемеры, манометры, термометры и т.д.). Основная за­дача пробоподготовки – подготовка вещества, материалов, компонен­тов для определенного вида анализа. Пробоподготовка помогает повы­сить точность получаемых результатов, расширить исследуемый диапа­зон значений, повысить безопасность исследования, ускорить тест, улучшить воспроизводимость и погрешность результатов. Пробоподго­товка используется в таких областях, как микроскопия, материалогра­фия, хроматография, спектроскопия, масс-спектрометрия, рентгено­структурный и рентгенофлуоресцентный анализы, инструментальный и мокрый химический анализы, минералогические исследования и др.
Продуценты (лат. producens – производящий, создающий) –ав- тотрофные организмы, создающие с помощью фото- или хемосинтеза органические вещества из неорганических. Являются первым звеном в пищевой цепи.
Прокариоты (греч. pro – предшествующий, karyon – ядро) – ор- ганизмы, не имеющие ограниченного мембраной ядра и органелл (не содержат митохондрий, пластид, аппарата Гольджи, центриолей); им не свойствен мейоз.
Прототрофы – микроорганизмы, синтезирующие все соедине­ния, необходимые для их роста, вследствие чего способны расти на ми­нимальных питательных средах без добавления в них факторов роста.
Психрофилы (греч. psychros – холодный) – микроорганизмы, хо- рошо развивающиеся в интервале температур 0–10 °С. Оптимальная
98
температура их роста составляет 15 °С и ниже, а максимальная не пре­вышает 20 °С.
Редуцент (деструктор) – организм (преимущественно это бакте­рии и микромицеты), в ходе своей жизнедеятельности превращающий органические остатки в неорганические вещества, пригодные для ис­пользования продуцентами.
Ризоплана – зона расположения микроорганизмов, развиваю­щихся непосредственно на корнях растений за счет корневых выделе­ний.
Ризосфера – корни растений с прилегающим не более 2,0 мм слоем почвы.
Ризосферный эффект – количественное отношение R/S (rhizosphera/soil), показывающее, во сколько раз количество микроорга­низмов определенной таксономической группы в ризосфере данного растения превышает количество этих микроорганизмов в почве. Для большинства бактерий величина R/S колеблется от 2,0 до 25,0.
Ротаметр – прибор для определения объемного расхода газа или жидкости в единицу времени.
Санитарное состояние почвы – совокупность физико-химиче­ских и биологических свойств почвы, определяющих качество и сте­пень ее безопасности в эпидемическом и гигиеническом отношении.
Сапротрофы – гетеротрофная часть микробного пула почвы, ис­пользующая в своем питании мертвое органическое вещество посред­ством постепенного выедания. Многие из почвенных микроорганизмов ведут сапротрофный образ жизни и в зависимости от степени разложен­ности привнесенных растительных и животных остатков в почву де­лятся на группы зимогенных и олиготрофных микроорганизмов.
Селективные (лат. selectiо – выбор, отбор) питательные среды – среды, стимулирующие рост одних микробов и угнетающие рост дру­гих. Селективные условия получают добавлением в среду химических веществ или созданием условий культивирования, избирательно угне­тающих рост нежелательных микробов. При выделении чистой куль­туры из селективной среды следует иметь в виду, что на ее поверхности могут присутствовать живые, не образующие колоний бактерии, кото­рые при переносе на неселективную среду дают рост, что является од­ним из источников диагностических ошибок.
Силикагель, кремнекислый гель – гель, который делают из си­ликатов калия или натрия и соляной кислоты, затем готовые гелевые пластинки в чашках Петри пропитывают стерильной жидкой
99
питательной средой. Применяют для уплотнения сред в целях получе­ния культур автотрофных бактерий, поскольку при этом в среде отсут­ствуют органические вещества. С помощью силикагелевых сред можно определять потребность микроорганизмов в витаминах, исследовать способность гетеротрофных бактерий использовать в качестве един­ственных источников углерода различные органические соединения.
Сукцессия микробных сообществ – закономерная смена сооб­ществ микроорганизмов в микробоценозе почвы при его продвижении в развитии к устойчивому (стационарному) состоянию.
Супрессивность – свойство здоровой почвы подавлять фитопа­тогены и другие вредные организмы, обусловленное совокупным дей­ствием ее биологических, физико-химических и агрохимических харак­теристик.
Стерилизация (лат. sterilis – бесплодный) – система мероприя- тий, направленных на полное уничтожение как вегетативных клеток, так и спор микроорганизмов на поверхности и внутри стерилизуемого объекта. Выделяют термическую и холодную стерилизацию.
Стерильность – отсутствие микроорганизмов или других конта­минирующих объектов в среде либо биологическом объекте.
Термофилы (греч. thermos – теплый, phileo – люблю) – орга- низмы, преимущественно микроскопические, оптимальная темпера­тура роста которых составляет 45–80 °С. Отдельные представители мо­гут существовать при температуре 110 °С.
Тиндализация – способ стерилизации, который заключается в дробном нагревании жидкостей (как правило, в течение 1 ч) от трех до пяти раз с промежутками в 24 ч. За это время споры бактерий, выжив­шие при 100 °С, прорастают, и вышедшие из них вегетативные клетки бактерий погибают при последующем нагревании. Этот способ стери­лизации методом дробной пастеризации предложил Джон Тиндаль.
Тинкториальные свойства – свойства бактерий, грибов и про­стейших, характеризующие их способность вступать в реакцию с кра­сителями и окрашиваться определенным образом.
Титр – количество клеток или вирусных частиц в единице объема исследуемого материала (н-р, почвы, жидкости).
Титрование – определение содержания какого-либо вещества путем постепенного смешения анализируемого раствора (н-р, кислоты) с контролируемым количеством реагента (н-р, щелочи). Конечная точка титрования (завершение химической реакции) устанавливается по из­менению окраски химического индикатора.
100
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]