Вопрос 60 Методы обнаружения «лекарственных ядов». Химические методы исследования. Хромогенные и осадочные реакции. Микрокристаллоскопия. Чувствительность и специфичность реакций.
Хромогенные реакции (реакции окрашивания): широко используются в химико-токсикологическом анализе на наркотические и психотропные вещества: такие реактивы как: H2SO4(конц), Марки, Эрдмана, 5% раствор FeCl3, HNO3(конц), Фреде, Бушарда (Вагнера), Майера, гексацианоферрат (II) калия.
Примеры:
А) Морфин
Часть хлороформных экстрактов, полученных из объектов исследования, распределяют на фарфоровых чашках, испаряют до получения сухих остатков и наносят по 2-3 капли реактивов, образующих характерное окрашивание.
Морфин + реактив Марки = красно-фиолетовая;
Морфин + реактив Фреде = фиолетовая.
Морфин + реактив Эрдмана = красная окраска, переходящая в желтую.
Б) Героин (субстанция)
При добавлении к наркотическому средству конц. H2SO4 наблюдают образование синего окрашивания. и т.д.
Осадочные реакции – это реакции, приводящие к образованию осадка при взаимодействии компонентов. Все общеалкалоидные осадительные реактивы не являются специфичными для алкалоидов.
Примеры:
Реакция с солью Рейнеке на атропин. К сухому остатку извлечения из объекта добавляют каплю 0,1 М раствора хлороводородной кислоты и рядом каплю 1% свежеприготовленного раствора соли Рейнеке. При соединении этих растворов образуется осадок сиреневого цвета.
Микрокристаллические реакции – реакции с образованием осадка вещества с определенной формой кристаллов
Примеры:
А) Реакция с перманганатом калия на кокаин. К сухому остатку добавляют каплю 10% HCl и выпаривают досуха, а затем наносят на остаток каплю 1% раствора KMnO4. Через 10-20 мин наблюдают появление красно-фиолетовых кристаллов в форме прямоугольных пластинок и сростков из них.
Большое количество микрокристаллических реакций наблюдается у барбитуратов.
Б) Реакция обнаружения кислотной формы барбитуратов
Полученный сухой остаток экстракта на предмет. стекле растворяют в капле конц. H2SO4. Рядом наносят 1 каплю воды, после чего обе капли осторожно соединяют с помощью тонкой стеклянной палочки. Через 10-20 мин при хранении стекла во влажной камере наблюдают образование кристаллического осадка (под микроскопом) с характерной для каждого барбитурата формой (более специфичная реакция)
Представлены примеры, механизмы реакций более подробно см. в соотв. темах
Вопрос 61
Физико-химические методы анализа. Хроматография в тонком слое сорбента,
Тсх как метод разделения и предварительной идентификации.
Перспективы использования вэжх
Составляющие ТСХ:
1. Неподвижная фаза – тонкий слой сорбента (меньше мм), содержащий небольшое количество воды и нанесенный на пластинку (из стекла, фольги или полимера)). Сорбентом чаще всего является силикагель или оксид алюминия, которые закрепляются на пластинке добавлением связующего компонента – гипса, крахмала и др.
2. Подвижная фаза (индивидуальные р-ли или их смеси в определенных соотношениях)
При движении элюента за счет капиллярных сил вверх по пластинке происходит разделение смеси веществ. Эффективность разделения зависит от сродства вещества к сорбенту и определяется коэффициентом распределения его между обеими фазами – подвижной и неподвижной
Способы детектирования:
Визуальный, если само вещество окрашено;
Облучение пластинки УФ-лучами, при этом вещество может флуоресцировать или давать темные пятна;
Обработка пластинки соотв. реагентами-проявителями, которые способны образовать с веществом окрашенные соединения.
После хроматографирования измеряют расстояние от центра пятна до стартовой линии отрезок АБ) и от линии фронта жидкости до стартовой точки (отрезок АВ). Отношение отрезков АБ к АВ обозначают величиной Rf:
Rf = АБ / АВ
Схема разделения смеси веществ с помощью ТСХ:
А – линия старта, Б – центр пятна; В – линия фронта растворителя;
1,2- места – нанесения стандартных растворов; 3 – место нанесения извлечения из биологического объекта,
С – места расположения примеси эндогенных соединений
Более надежной оценкой хроматографической подвижности вещества является величина Rs:
Rs = Rf вещества / Rf стандарта
ТСХ-СКРИНИНГ ВЕЩЕСТВ КИСЛОТНОГО,