Ограничением применения этого метода является термонеустойчивость соединений. С помощью этого метода выявляют органические ацидурии, пероксисомные болезни, митохондриальные болезни,

болезни холестеринового обмена.

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ).

Подвижной фазой здесь является жидкость. Метод не имеет ограничений в применении, т.к. осуществляет анализ в мягких условиях. ВЭЖХ – классический метод диагностики аминоацидопатий.

Кроме того, метод эффективен для выявления нарушения обмена углеводов, эндокринопатий, нарушений цикла мочевины и пр.

Более полную информацию о содержащихся метаболитах в биологических жидкостях (сколько компонентов составляет биологическую жидкость, качественные характеристики этих компонентов и каково содержание каждого компонента смеси) дает прибор, основанный на комбинации ГХ или ВЭЖХ с масс-спектрометрическим детектором

(хромато-масс-спектрометрия).

Если масс-спектрометр имеет в своем составе несколько расположенных друг за другом масс-анализаторов, которые поэтапно анализируют органические вещества, чувствительность и селективность детекции повышается в несколько раз. Этот метод биохимической диагностики называется тандемная масс-спектрометрия (ТМС). С помощью ТМС можно определить качественные и количественные характеристики одновременно

3000 соединений в биологических жидкостях в кратчайшие сроки.

Измерение активности ферментов

Измерение активности продуктов дефектного гена проводится в клеточных культурах, поэтому материалом для исследования являются лимфоциты периферической крови, эритроциты, культура кожных фибробластов, мышечные биоптаты и т.д. Наиболее часто определяют активность ферментов с использованием естественных или искусственных субстратов, которые эти ферменты в норме метаболизируют. Как правило,

субстрат имеет хромогенную, флюорогенную или радиоактивную метку и в случае, если фермент с нормальной активностью расщепляет его, исход реакции регистрируется специальными методами. Спектрофотометрические и флуорометрические методы используют в диагностике лизосомных болезней накопления, дефектов дыхательной цепи митохондрий.

Радиоактивно-меченые субстраты применяются в диагностике органических ацидурий, нарушения обмена углеводов, гликопротеидов.

10.6.Пренатальная диагностика

Вусловиях невозможности применения эффективных терапевтических мероприятий для тяжелых полисистемных наследственных и врожденных заболеваний вопрос об их профилактике становится особенно актуальным.

Решающая роль в этом комплексе мероприятий принадлежит пренатальной диагностике (ПД), позволяющей предотвратить рождение детей с тяжелыми,

некорригируемыми пороками развития, с социально значимыми смертельными генными и хромосомными болезнями и тем самым уменьшить генетический груз популяции.

Пренатальная диагностика (ПД) - совокупность всех методов диагностики состояния плода, которые выявляют врожденные дефекты и любые аномалии, диагностируемые при рождении.

Для выявления состояния здоровья плода применяют различные методы, имеющие разные возможности и ограничения. Для того чтобы максимально сузить круг пациенток, нуждающихся в инвазивных методах ПД, используется выделение групп риска по развитию тех или иных проблем.

Выделяют 2 уровня обследования:

1 уровень. Скрининговые методики, в результате проведения которых формируются «группы риска» по развитию хромосомных болезней и ВПР

(динамическая эхография плода и биохимический скрининг)

2 уровень. Индивидуальные методы исследования плода в «группах риска» с

использованием современных методов диагностики (биохимическое,

цитогенетическое, молекулярно-генетическое исследование плодного

материала)

Среди методов пренатальной диагностики выделяют непрямые, при которых исследуется беременная женщина. К ним относят следующие мероприятия:

клинический осмотр,

МГК,

биохимический скрининг.

Прямые методы оценивают непосредственно состояние плода, они включают:

динамическую эхографию

лабораторное исследование плодного материала.

Основные этапы пренатальной диагностики

1.Медико-генетическое консультирование

2.УЗИ плода

3.Биохимическая диагностика

4.Получение плодного материала

5.Лабораторное исследование – цитогенетическое, молекулярно-

генетическое, биохимическое

6.Рекомендации по результатам пренатальной диагностики

Динамическая эхография

Ультразвуковое исследование плода проводится всем беременным не менее 3

раз в декретированные сроки (10-14 недель, 20-24 недели, 32-34 недели), а по показаниям – чаще. Точность диагностики ВПР при эхографии составляет до

87%, а в группах риска - до 90%. Частота ложноотрицательных результатов оставляет 8,5%, которые могут быть обусловлены проведением исследования до формирования порока, небольшими пороками (сердце, лицо, конечности),

зависят от квалификации врача, качества аппаратуры, положения плода,

затрудняющего осмотр. Ложноположительные результаты выявляются примерно в 5% случаев.

Оптимальным подходом, обеспечивающим максимальную степень выявляемости патологии плода, является организация двухэтапного УЗ-

скрининга.

1.Этап - «акушерский», выявление грубых пороков и аномалий развития провизорных органов и плода в родовспомогательных учреждениях.

2.Этап - «генетический», прицельная диагностика ВПР в рамках специализированного медико-генетического центра.

В первом триместре диагностически значимыми параметрами на предмет косвенных признаков хромосомной патологии считаются:

Толщина воротникового пространства (NT) от 3 мм и более.

Размер носовых костей менее 1 см.

Уменьшение копчиково-теменного и бипариетального размеров.

Эхография во втором и третьем триместре, кроме физиологических параметров развития, установления срока беременности, максимально выявляет ВПР разной этиологии, в т.ч. ВПР с поздним появлением. Со стороны плода косвенно о хромосомной патологии или ВПР свидетельствуют:

Гиперэхогенный кишечник.

Удлинение длинных трубчатых костей.

Симптом «гольфного мяча» - кальцинаты в проекции сердца.

Кистозные гигромы шеи.

Измененные ЭХО-контуры частей тела и внутренних органов.

Опережение или отставание плода в росте.

Нарушения положения, предлежания и подвижности плода.

Диспропорция частей тела плода.

Со стороны провизорных органов:

Поли-, олигогидроамнион.

Гипоплазия плаценты.

Гипоили гиперплазия пуповины.