6) Пренатальная диагностика (риск, связанный с возрастом родителей, наличие

транслокаций, мозаицизма у родителей, рождение предыдущего ребенка с хро-

мосомной болезнью).

7)Подозрение на синдромы, характеризующиеся хромосомной нестабильностью.

8)Лейкозы (их дифференциальная диагностика, оценка эффективности лечения и прогноза).

9) Оценка мутагенных воздействий (радиационных, химических).

10.5. Биохимические методы диагностики наследственных болезней

В структуре клинико-лабораторного исследования фенотипа давно прочно заняли свое место биохимические методы диагностики. Они являются ценным инструментом изучения свойств первичного продукта гена

иего метаболитов. Даже в эпоху молекулярной генетики биохимические методы не потеряли своей актуальности, особенно в условиях невозможности проведения ДНК-диагностики. Неоспорима значимость проведения биохимических тестов для выбора оптимального метода терапии

идля контроля эффективности лечения. Поскольку данный вид лабораторной диагностики направлен на описание биохимического фенотипа организма,

наибольшую актуальность он приобрел для выявления наследственных болезней обмена веществ.

Лабораторная диагностика наследственных болезней проводится по определенному плану и поэтапно, т.к. провести лабораторное обследование сразу на все заболевания невозможно. На каждом этапе исключаются определенные классы болезней. Выделяют 2 этапа биохимической диагностики:

I. Скрининг (от англ. «screening» - просеивание) – обследование популяции для формирования группы риска по определенной патологии.

Выделяют массовый и селективный скрининг.

Массовый скрининг – обследование больших контингентов на наследственные заболевания в досимптоматической стадии независимо от пола, возраста, указаний на заболеваемость и т.д. (неонатальный скрининг, пренатальный скрининг).

Селективный скрининг – обследование группы пациентов с определенным заболеванием (обследование детей с умственной отсталостью на болезни обмена веществ).

II.Подтверждающая биохимическая диагностика – проводится лицам,

требующим уточнения диагноза либо на основании проведенного скрининга,

либо по клиническим данным.

Неонатальный скрининг

Неонатальный скрининг – массовое обследование новорожденных детей,

для выявления наиболее распространенных врожденных заболеваний,

связанных с нарушением обмена веществ и изменением гормонального статуса.

Цель – диагностика заболевания в его доклинический период и организация как можно более раннего начала лечения. Количество определяемых заболеваний в различных странах мира колеблется от 2 до 25.

Первый скрининг был внедрен в начале 1960-х годов в США Робертом Маккриди совместно с Робертом Гатри, которые организовали сбор бланков из фильтровальной бумаги с сухими пятнами крови (dry spots) от каждого новорожденного с дальнейшим тестированием их на фенилкетонурию, с

использованием бактериального метода исследования фенилаланина. В 1990-

х годах, благодаря тандемной масс-спектрометрии перечень исследуемых заболеваний значительно расширился.

Международные критерии неонатального скрининга (ВОЗ, 1968г.)

Заболевание клинически и лабораторно должно быть хорошо изучено.

Частота заболевания в популяции должна быть достаточно высокой.

Заболевание должно быть тяжелым, или даже летальным.

Ложноотрицательные результаты лабораторных тестов должны быть исключены, ложноположительные - редки.

Лабораторные тесты должны быть простыми, безопасными и этически приемлемыми.

Должно быть разработано эффективное лечение скринируемого заболевания.

Должен быть точно установлен промежуток времени от рождения, когда лечение дает положительный результат.

Скрининг должен быть экономически эффективным.

Всоответствии с международными рекомендациями в РФ на протяжении 15 лет проводится неонатальный скрининг на фенилкетонурию и врожденный гипотиреоз. В рамках реализации приоритетного национального проекта «Здоровье» (приказ Минздравсоцразвития России от 22.03.2006 г. №185 «О массовом обследовании новорожденных детей на наследственные заболевания») с 2006 года в неонатальный скрининг внедрена диагностика таких заболеваний, как адреногенитальный синдром, галактоземия и муковисцидоз.

Можно выделить 5 этапов проведения программы скрининга

новорождённых на наследственные болезни.

•1-й этап — забор крови у новорождённых из пятки в родовспомогательных учреждениях на 4-5 день жизни. Для всех методов сбора образцов крови на фильтровальную бумагу должны быть разработаны и опубликованы стандарты. Кроме того, должна быть доступная и простая система транспортировки высушенных образцов крови, которая позволит провести анализ и начать лечение в короткие сроки, например, при галактоземии и АДГ в течение 10 дней с момента рождения, до появления кризов.

•2-й этап — быстрое проведение первичного скрининга по определению соответствующих лабораторных показателей. Такой анализ делается в

лабораториях медико-генетических консультаций, имеющих соответствующее оборудование.

• 3-й этап — подтверждающая диагностика при положительных результатах должна проводиться в тех же лабораториях МГК в максимально короткие сроки. ДНК-диагностика и контроль качества лабораторных анализов 2-го и

3-го этапов проводятся в федеральных центрах.

•4-й этап — лечение выявленных больных, которое должны осуществлять врачи-генетики, неонатологи, педиатры и эндокринологи. Лечение должно быть назначено в течение 1-го месяца жизни. Контроль эффективности лечения должен проводиться с использованием клинических и лабораторных данных.

•5-й этап — МГК и пренатальная ДНК-диагностика в семьях, где родился больной ребёнок. Это осуществляется в медико-генетических консультациях.

Методы подтверждающей биохимической диагностики

Стратегия достоверной диагностики НБО включает в себя несколько

направлений:

1.Выявление дефектного звена метаболического пути путем анализа соответствующих метаболитов

2.Выявление дисфункции белка посредством оценки его количества и/или активности.

Исследование метаболитов

Материалом для исследования метаболитов биохимических реакций служат сыворотка крови, моча, цереброспинальная жидкость.

Ключевым методом исследования является различные модификации

хроматографии, основанной на разделении многокомпонентных смесей,

коими являются биологические жидкости. Используют следующие виды хроматографии:

Газовая хроматография (ГХ) – разделение смесей между подвижной

(газ-носитель) и неподвижной фазами хроматографической колонки.