Билеты гистология одним файлом

нескольких часов. Подвергнутые воздействию антибиотиков (in vivo или in vitro) микроорганизмы сравнивают с контрольными образцами того же штамма для установления их жизнеспособности, а также изменений в нуклеиновых кислотах, белках, оболочке клеток и т. п., что позволяет оценить как степень эффекта антибиотика, так и точку приложения его действия.

Ещё одной областью применения проточной цитометрии является мониторирование состояния вирусного процесса у ВИЧ-инфицированных лиц путём определения абсолютного количества CD4+ клеток и их доли в популяции лимфоцитов (отношение CD4+/CD8+). Методика может также использоваться для контроля эффективности проводимой терапии

ДНК-цитометрия

- изучение количества ДНК в ядрах клеток

Задачи:

1.оценка уровня активности пролиферативных процессов в ткани

2.распределение ядер клеток по плоидности

3.определение временных параметров клеточного цикла

4.выявление состояний анэуплоидии – отличающегося от нормального содержание ДНК

Окраска:

Люминесцентный краситель в реакции по Фельгену

Результаты исследования:

Ввиде ДНК-гистограмм - распределение изучаемых клеток по содержанию в их ядрах ДНК.

Три группы клеток:

1.диплоидные - содержание ДНК - 2с (хромосом – 2n)

2.промежуточные - 2с-4с

3.тетраплоидные - 4с

Т.о., клетки с определенным содержанием ДНК распределяются по периодам клеточного цикла следующим образом:

2с - характеризуют количество клеток в Go и G1 периодах 2с-4с - количество клеток в синтетическом периоде

4с - количество клеток в G2 и М-периодах цикла

Расчет величины пролиферативного пула клеток:

Клетки:

1.синтетическом,

2.премитотическом

3.митотическом периодах цикла

-чем выше его величина – тем выше скорость обновления ткани наименьшая (стремиться к нулю) - в нейронах

наибольшая - гемопоэтическая и эпителий слизистой пищеварительной трубки (до 50%)

Временные параметры митотического цикла:

- время прохждения периодов цикла

А. всю клеточную жизнь - нейроны Б. несколько часов - стволовые клетки

Билет 19

То же самое что и 18 билет!!! Одно и тоже кроме 3 вопроса

Вопрос №3

Пр чная ц м р я — метод оптического измерения параметров клетки, ее органелл и происходящих в ней процессов.

Методика заключается в выявлении рассеяния света лазерного луча при прохождении через него клетки в струе жидкости, причём, степень световой дисперсии позволяет получить представление о размерах и структуре клетки. Кроме того, в ходе анализа учитывается уровень флуоресценции химических соединений, входящих в состав клетки (аутофлуоресценция) или внесённых в образец перед проведением проточной цитометрии.

[править]Образцы

кровь

костный мозг

ликвор

суставная жидкость

плевральная жидкость

асцитическая жидкость

суспензированные клетки тканей (например, опухолей) [править]Принцип

Клеточная суспензия, предварительно меченная флюоресцирующими моноклональными антителами или флуоресцентными красителями, попадает в поток жидкости, проходящий через проточную ячейку. Условия подобраны таким образом, что клетки выстраиваются друг за другом за счет т. н. гидродинамического фокусирования струи в струе. В момент пересечения клеткой лазерного луча детекторы фиксируют:

рассеяние света под малыми углами (от 1° до 10°) (данная характеристика используется для определения размеров клеток).

рассеяние света под углом 90° (позволяет судить о соотношении ядро/цитоплазма, а также о неоднородности и гранулярности клеток).

интенсивность флуоресценции по нескольким каналам флуоресцентности (от 2 до 18-20)- позволяет определить субпопуляционный состав клеточной суспензии и др.

[править]Флуорохромы

Флуоресцеина изотиоцианат (FITC)

Фикоэритрин (PE, RD1)

Перидинин-Хлорофилл Протеин (Per-CP)

Алофикоцианин (APC)

Тандемные красители:

Фикоэритрин — Техасский красный (ECD)

Фикоэритрин — Cy5 (PC5)

Фикоэритрин — Cy7 (PC7)

анализ субпопуляционного состава клеток периферической крови

подсчет ретикулоцитов, анализ тромбоцитов по специфическим маркерам

дифференциальная диагностика лимфопролиферативных заболеваний и реактивных лимфоцитозов

диагностика лимфопролиферативных заболеваний

диагностика острых лейкозов

оценка минимальной резидуальной болезни

измерение экспрессии маркеров

измерение активности внутриклеточных ферментов

определений стадий клеточного цикла в рамках изучения механизмов воздействия различных биологически активных веществ на клеточном уровне

В настоящее время проточная цитометрия применяется для выявления определённых клеток в исследуемых образцах (как бактериальных и грибковых, так и собственных клеток организма человека), определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам, а также мониторирования состояния вирусного процесса у ВИЧ-инфицированных пациентов.

Выявление бактериальных, грибковых, а также собственных клеток организма в биологических жидкостях крайне важно для диагностики многих заболеваний. В ходе одного из исследований было показано, что проточная цитометрия обладает в 100—1000 раз более высокой чувствительностью по сравнению с микроскопией и позволяет выявлять бактериальные клетки в количестве 10-100 в 1 мл крови. При более низкой концентрации бактерий в образце возможно проведение предварительной инкубации. Высокую чувствительность методу придает использование моноклональных антител, помеченных флуоресцирующим веществом.

Проточная цитометрия позволяет не только выявлять инфицирование микроорганизмами, но и определять спектр их чувствительности, причём, длительность исследования не превышает нескольких часов. Подвергнутые воздействию антибиотиков (in vivo или in vitro) микроорганизмы сравнивают с контрольными образцами того же штамма для установления их жизнеспособности, а также изменений в нуклеиновых кислотах, белках, оболочке клеток и т. п., что позволяет оценить как степень эффекта антибиотика, так и точку приложения его действия.

Ещё одной областью применения проточной цитометрии является мониторирование состояния вирусного процесса у ВИЧ-инфицированных лиц путём определения абсолютного количества CD4+ клеток и их доли в популяции лимфоцитов (отношение CD4+/CD8+). Методика может также использоваться для контроля эффективности проводимой терапии

Билет 20

Вопрос №1

СОСУДЫ МИКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА

-относят сосуды с диаметром меньше 100 мкм

-функция: 1. трофическая

1.дыхательная

2.экскреторная

3.регуляторная

Звенья:

1.артериолы

2.гемокапилляры

3.венулы

4.артерио-венозные анастомозы

Артериолы

-сосуды диаметром от 15 до 100 мкм

Строение стенки:

из трех оболочек по одному слою клеток

I. внутренняя оболочка 1. эндотелий 2. подэндотелиальный слой

II. средняя оболочка

-гладкомышечные клетки

-один циркулярный слой

-палочковидные ядра - «симптом березки» III. адвентициальная оболочка

-тонкая прослойка РСТ

Гемокапилляры

-диаметр сосуда 3-12 мкм

-общая протяженность 100 тыс. км.

Строение стенки:

-не оболочки, а слои:

1.внутренний слой – эндотелий

2.средний слой

а. базальная мембрана б. перициты

-отростчатые клетки в расщеплениях базальной мембраны

3. наружный слой а. адвентициальные клетки

б. сеть ретикулярных волокон Три типа гемокапилляров (по особенностям строения):

1.гемокапилляры с нефенестрированным эндотелием (соматического типа)

2.гемокапилляры с фенестрированным эндотелием (висцерального типа)

3.прерывистые или синусоидные гемокапилляры

Соматического типа:

-эндотелий непрерывный

-диаметр менее 10 мкм

-базальная мембрана непрерывная

-наиболее распространены в организме: в мышцах, коже, соединительной ткани, легких, ЦНС и

т.д.

Висцерального типа:

-тонкий (до 0,8 мкм) эндотелий

-в эндотелиальных клетках имеются поры диаметром до 80 нм

-базальная мембрана непрерывная

-встречаются: в почечном тельце, эндокринных органах, слизистой ЖКТ

Синусоидные гемокапилляры:

- диаметр большой – до 40 мкм - фенестры и межклеточные поры до 3 мкм

-базальная мембрана прерывистая

-встречаются: в печени, селезенке, костном мозге, коре

надпочечника

XXXVI.ВЕНУЛЫ

-сосуды диаметром от 15 до 100 мкм

Строение стенки:

-из трех оболочек по одному слою клеток I. внутренняя оболочка

1. эндотелий

II. средняя оболочка

-отдельные гладкомышечные клетки

-отсутствие строгой ориентации

III. адвентициальная оболочка - тонкая прослойка РСТ

Артерио-венозные анастомозы

- сосуды, несущие артериальную кровь в вены минуя капиллярное русло (шунты)

Классификация:

1.простые анастомозы

2.сложные анастомозы

Простые - регуляция кровотока осуществляется гладкомышечными клетками стенки самой артериолы

Сложные (клубочковые)

- приносящая артериола делится на 2-4 ветви - эти ветви объеденены общей соединительнотканной оболочкой

- под эндотелием имеется валик - подушка, в котором в подэндотелиальном слое находятся продольно расположенные гладкомышечные клетки. Сокращение этих клеток приводит к уменьшению просвета сосуда.

Вопрос №2

Кобобщенной системе крови относят:

собственно кровь и лимфу;

органы кроветворения — красный костный мозг, тимус, селезенку, лимфатические узлы;

лимфоидную ткань некроветворных органов.

Элементы системы крови имеют общие структурно-функциональные особенности, все происходят из мезенхимы, подчиняются общим законам нейрогуморальной регуляции, объединены тесным взаимодействием всех звеньев. Постоянный состав периферической крови поддерживается сбалансированными процессами новообразования и разрушения клеток крови. Поэтому понимание вопросов развития, строения и функции отдельных элементов системы возможно лишь с позиций изучения закономерностей, характеризующих всю систему в целом.

Кровь и лимфа вместе с соединительной тканью образуют т.н. внутреннюю среду организма. Они состоят из плазмы (жидкого межклеточного вещества) и взвешенных в ней форменных элементов. Эти ткани тесно взаимосвязаны, в них происходит постоянный обмен форменными элементами, а также веществами, находящимися в плазме. Лимфоциты рециркулируют из крови в лимфу и из лимфы в кровь. Все клетки крови развиваются из общей полипотентной стволовой клетки крови (СКК) в эмбриогенезе и после рождения.

Кровь

Кровь является циркулирующей по кровеносным сосудам жидкой тканью, состоящей из двух основных компонентов, — плазмы и форменных элементов. Кровь в организме человека составляет, в среднем, около 5 л. Различают кровь, циркулирующую в сосудах, и кровь, депонированную в печени, селезенке, коже.

Плазма составляет 55—60% объема крови, форменные элементы – 40—45%. Отношение объема форменных элементов ко всему объему крови называется гематокритным числом, или

гематокритным показателем, - и составляет в норме 0,40 – 0,45. Термингематокрит используют для названия прибора (капилляра) для измерения гематокритного показателя.

Основные функции крови

дыхательная функция (перенос кислорода из легких во все органы и углекислоты из органов в легкие);

трофическая функция (доставка органам питательных веществ);

защитная функция (обеспечение гуморального и клеточного иммунитета, свертывание крови при травмах);

выделительная функция (удаление и транспортировка в почки продуктов обмена веществ);

гомеостатическая функция (поддержание постоянства внутренней среды организма, в том числе иммунного гомеостаза).

Через кровь (и лимфу) транспортируются также гормоны и другие биологически активные вещества. Все это определяет важнейшую роль крови в организме. Анализ крови в клинической практике является одним из основных в постановке диагноза.

Плазма крови

Плазма крови представляет собой жидкое (точнее, коллоидное) межклеточное вещество. Она содержит 90% воды, около 6,6 — 8,5% белков и другие органические и минеральные соединения - промежуточные или конечные продукты обмена веществ, переносимые из одних органов в другие.

К основным белкам плазмы крови относятся альбумины, глобулины и фибриноген.

Альбумины составляют более половины всех белков плазмы, синтезируются в печени. Они обусловливают коллоидно-осмотическое давление крови, выполняют роль транспортных белков для многих веществ, включая гормоны, жирные кислоты, а также токсины и лекарства.

Глобулины – неоднородная группа белков, в которой выделяют альфабета- и гаммафракции. К последней относятся иммунноглобулины, или антитела, - важные элементы иммунной (т.е. защитной) системы организма.

Фибриноген – растворимая форма фибрина, - фибриллярного белка плазмы крови, образующего волокна при повышении свертываемости крови (например, при образовании тромба). Синтезируется фибриноген в печени. Плазма крови, из которой удален фибриноген, называется сывороткой.

Форменные элементы крови

К форменным элементам крови относятся: эритроциты (или красные кровяные тельца), лейкоциты (или белые кровяные тельца), и тромбоциты (или кровяные пластинки). Эритроцитов у человека около 5 x 1012 в 1 литре крови, лейкоцитов – около 6 x 109 (т.е. в 1000 раз меньше), а тромбоцитов – 2,5 x 1011 в 1 литре крови (т.е. в 20 раз меньше, чем эритроцитов).

Популяция клеток крови обновляющаяся, с коротким циклом развития, где большинство зрелых форм являются конечными (погибающими) клетками.

Лейкоциты

Лейкоциты, или белые кровяные клетки, в свежей крови бесцветны, что отличает их от окрашенных эритроцитов. Число их составляет в среднем 4 — 9 x 109 в 1 литре крови (т.е. в 1000 раз меньше, чем эритроцитов). Лейкоциты способны к активным движениям, могут переходить через стенку сосудов в соединительную ткань органов, где они выполняют основные защитные функции. По морфологическим признакам и биологической роли лейкоциты подразделяют на две группы: зернистые лейкоциты, илигранулоциты, и незернистые лейкоциты,

или агранулоциты.

По другой классификации, учитывающей форму ядра лейкоцита, различают лейкоциты с круглым или овальным несегментированным ядром – т.н. мононуклеарныелейкоциты, или мононуклеары, а также лейкоциты с сегментированным ядром, состоящим из нескольких частей – сегментов, - сегментоядерные лейкоциты.

В стандартной гематологической окраске по Романовскому — Гимзе используются два красителя: кислый эозин и основной азур-II. Структуры, окрашиваемые эозином (в розовый цвет) называют эозинофильными, или оксифильными, или же ацидофильными. Структуры, окрашиваемые красителем азур-II (в фиолетово-красный цвет) называют базофильными, или азурофильными.

У зернистых лейкоцитов при окраске азур-II – эозином, в цитоплазме выявляются специфическая зернистость (эозинофильная, базофильная или нейтрофильная) и сегментированные ядра (т.е. все гранулоциты относятся к сегментоядерным лейкоцитам). В

Периоды эмбрионального (пренатального) развития:

7.начальный - 1 неделя

8.зародышевый – со 2 по 8 неделю

9.плодный – с 9 недели до рождения

Общая продолжительность в среднем - 280 суток (40 недель, 10 лунных мес)

XXXVII. Зародышевый период

-со 2 по 8 неделю

-зародыш называется - эмбрион

2 неделя:

Содержание недели:

7.формируются провизорные (временные, внезародышевые) органы

-хорион

-амнион

-желточный мешок

8.устанавливается гематотрофный тип питания

9.формируется зародышевый щиток

4.проходит 2-я фаза гаструляции

Формирование хориона

-внезародышевая мезодерма заполняет полость гаструлы и

втом числе подрастает к трофобласту, который после этого называется хорион

-сначала образуются первичные ворсинки хориона

-подрастает внезародышевая мезодерма - вторичные ворсинки

-в более поздние сроки во вторичные ворсинки

врастают сосуды, прорастающие от зародыша - третичные ворсины

- устанавливается гематотрофный тип питания - разрушаются сосуды слизистой матки и ворсины плавают в лакуных с кровью

матери, из которой и осуществляется питание

XXXVIII. Образование желточного мешка

Идет в 2 стадии:

1.клетки гипобласта также делятся, листок подворачивается и формируется желточный пузырек

2.стенка пузырька обрастает внезародышевой мезодермой, после чего превращается в желточный мешок

Функции:

-желток к этому времени полностью утрачивается

1основная роль у человека – орган кроветворения до 7-8 недели, потом

редуцируется.

3образование первичных половых клеток –

гонобластов - зарастает к 3-му месяцу развития - а если

не зарастает – дивертикул Меккеля - слепой отросток подвздошной кишки (2%) детей

Образование амниона

Идет в 2 стадии:

3.клетки эпибласта делятся и листок подворачивается с образованием амниотического пузырька

4.к стенке амниотического пузырька подрастает

внезародышевая мезодерма, после чего пузырек превращается в амнион - в просвете его накапливается жидкость – это будущие околоплодные воды

Функция: 1. роль амортизатора,

2.среды обитания,

3.плод заглатывает амниотическую жидкость,

ивыделяет мочу

Зародышевый диск (щиток)

-располагается между амнионом и желточным мешком

-Строение: это клетки:

1.дна амниона - эпибласт

2. крыши желточного мешка - гипобласт

-в диске расположен материал зародыша

-за его пределами расположены внезародышевые провизорные органы

Вконце 2-й недели начинается вторая фаза гаструляции

-используется два способа:

1.иммиграция – перемещение клеток эпибласта с

образованием утолщения - первичной полоски

(- вследствие деления клеток они начинают смещаться

в каудальный конец зародыша

-происходит столкновение клеточных потоков у средней линии

-происходит слияние двух потоков и потоки направляются вперед, образуя утолщенный клеточный тяж -

первичная полоска)

2.инвагинация - погружение материала эпибласта через

первичную бороздку в пространство между эпибластом и гипобластом с закладкой 3 зародышевых листков – будущих:

1. эктодермы

2. мезодермы

3. энтодермы

(- в середине первичной полоски образуется погружение,

углубление - первичная бороздка, через которую клетки эпибласта начинают погружаться вглубь и в

обе стороны от нее, т.е.

клетки первичной полоски погружаются под наружный листок и располагаются между ним и энтодермой, и формируют мезодерму –

третий зародышевый листок)

Критические периоды эмбриогенеза:

- временные периоды наибольшей чувствительности зародыша к различным воздействиям

Выделяют следующие критические периоды:

32.оплодотворение

33.имплантация (7-8 сутки эмбриогенеза)

34.плацентация (3-8 неделя)

35.образования осевых зачатков органов

5.периоды развития органов и систем