Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Билеты гистология одним файлом

.pdf
Скачиваний:
43
Добавлен:
09.03.2021
Размер:
4.62 Mб
Скачать

-всегда многослойные или многорядные -покровная функция преобладает

14.энтодермального типа -из энтодермы -всегда однослойные

-кроме покровной функции участвуют в процессах всасывания, секреции

15.мезодермального типа

-из мезодермы -всегда однослойные

16. нейроэктодермального типа -развивается эпендимная нейроглия, выстилающая полости мозга -из нейроэктодермы -однослойный

Морфологическая классификация:

I. Однослойные

А. Однорядные

1.плоские

2.кубические

3.призматические Б. Многорядные

7.призматические

V.Многослойные

1.плоский

а. ороговевающий б. неороговевающий

2. переходный Рассмотрим построение классификации: Что значит термин:

Однослойный эпителий

- это такой эпителий, все клетки которого расположены на базальной мембране

Однослойный однорядный эпителий:

-все клетки лежат на базальной мембране и

-апикальные полюса этих клеток достигают поверхности

эпителиального пласта и граничат с внешней средой виды эпителия - по форме клеток

а/ плоский б/ кубический

в/ призматический

но часто мы не видим форму клеток, т.к. нечеткие клеточные границы, п.т. можно определить по форме клеточных ядер:

плоский – вытянутые ядра, длинник которых расположен параллельно базальной мембране

кубический – круглые ядра призматический – вытянутые ядра, длинник перпендикулярно

базальной мембране

Что значит:

Однослойный многорядный эпителий

-все клетки лежат на базальной мембране, но

-не все клетки достигают поверхности эпителиального пласта, т.к. имеются так называемые вставочные клетки

следствия этого:

1. клетки в эпителии разной высоты, формы, размеров

8.ядра клеток разной формы и лежат на разных уровнях от базальной мембраны

Что значит:

Многослойный эпителий

-это эпителий, в котором только нижний слой клеток - базальные клетки расположены на базальной мембране,

- все остальные клетки располагаются на ниже расположенных клетках и не имеют связи с базальной мембраной

Термин:

Плоский - - по форме клеток верхних слоев эпителиального пласта

Термин:

Неороговевающий -

-клетки всех слоев сохраняют жизнеспособность

-в гистологических препаратах ядра прослеживаются в клетках всех слоев эпителиального пласта

Ороговевающий -

-в таком эпителии клетки верхних слоев отмирают, образуя роговые чешуйки,

-п.т. в гистологических препаратах в верхних слоях не видим

ядер клеток Переходный - название отражает основную особенность этого эпителия - этот эпителий при

функционировании органа, который выстилает, может изменять свое строение, т.е. переходит из одного функционального состояния – в другое - переходный.

Однослойный многорядный призматический эпителий - «реснитчатый»

9.выстилает воздухоносные пути - «респираторный эпителий»

10.источник развития - эктодерма – прехордальная пластинка

11.клетки - призматические

2.реснитчатые эпителиоциты

3.вставочные эпителиоциты:

а. высокие б. низкие

4.бокаловидные

5.эндокринные

вопрос №3

Иммуногистохимия

- метод качественного определения антигенов в клетках и тканях на гистологических срезах

Задачи метода:

1.определение гистогенетического типа исследуемой ткани

2.определение иммунофенотипа клеток

3.оценка процессов пролиферации (Ki-67, PCNA) и апоптоза (СD 95) в ткани

4.определение наличия рецепторов к гормонам

5.определение ростовых факторов (IL 1-16)

6.выявление онкопротеинов (р21, р53, N-MYC и т.д.)

7.определение типов коллагена (I, II, IY типа)

8.микробиология/вирусология (гепатиты В и С, цитомегаловирус, герпес и т.д.)

Окраска:

Моноклональные антитела

Определение гистогенетического типа клеток тканей:

-основано на выявлении белков промежуточных филаментов, специфичных для клеток определенных тканей

1.эпителиальные ткани - выявляется кератин (Кeratin)

2.соединительные ткани - виментин (Vimentin)

3.нервная ткань - S100 protein

4.мышечные ткани - десмин (Desmin)

5.лимфоидная и миелоидная ткани - общий лейкоцитарный антиген (LCA)

Билет 18

Вопрос №1

Кровеносные сосуды

- замкнутая система разветвленных трубок разного диаметра

Различают:

1.артерии

2.вены

3.сосуды микроциркуляторного русла

Артерии

-кровь течет от сердца к органам

Общий план строения стенки:

3оболочки:

1.внутренняя – интима (t. Intima)

2.средняя – медиа (t. Media)

3.наружная – адвентиция (t. Adventitia)

Интима:

1.эндотелий

2.подэндотелиальный слой

3.внутренняя эластическая мембрана

Эндотелий - однослойный плоский эпителий

- источник развития – мезенхима - клетки полигональной формы

- между клетками плотные и щелевидные соединения - масса в организма – около 1 кг, площадь – 1000 м.кв.

- цитоплазма истончена до 0,5 мкм, много транспортных пузырьков Подэндотелиальный слой:

- рыхлая соединительная ткань - источник развития – мезенхима - много эластических волокон

Внутренняя эластическая мембрана: - из эластических волокон

Средняя оболочка:

- слои гладкомышечных клеток - эластические волокна

- относительно наиболее выраженная оболочка

Адвентициальная:

- рыхлая соединительная ткань

Источник развития всех тканей стенки:

-мезенхима

-сосудисто-кровяной островок

Классификация артерий:

1.эластические

2.мышечные

3.мышечно-эластические

Артерии эластического типа:

- крупные артерии - резко выражены упругие свойства

- прочность стенки при растяжении Пример:

1.аорта

2.легочная артерия

Строение стенки:

I.интима а. эндотелий

б. подэндотелиальный слой

-много эластических волокон

в. внутренняя эластическая мембрана - не выражена

II. средняя оболочка:

-основная часть стенки

-эластические волокна, объедененные в 40-70 эластических мембран, в виде цилиндров, вставленных друг в друга

-гладкомышечные клетки

III. адвентициальная оболочка:

-тонкая прослойка РСТ

Артерии мышечного типа:

-большинство артерий организма

-хорошо различимы элементы всех трех оболочек

Строение:

I.интима

1.эндотелий

2.подэндотелиальный слой

-РСТ

3.внутренняя эластическая мембрана

-хорошо выражена

-Фенестрированная

-На препаратах в виде блечтящей, окрашенной эозином в светло-розовый цвет

волнистой полоски II. средняя оболочка - мышечная

-циркулярные слои гладкомышечных клеток, по спирали

-3-4 слоя в мелких

-до 60 слоев – в крупных

-единичные коллагеновые и эластические волокна

Ш. адвентициальная оболочка

1.наружная эластическая мембрана

2.рыхлая соединительная ткань

XXXV. ВЕНЫ

Особенности:

1.кровеносные сосуды, кровь по которым течет из органов и тканей к сердцу, в правое предсердие. Исключение – легочные вены.

2.Вены одинакового диаметра с артериями имеют более тонкую стенку и больший просвет

3.Менее выражена мышечная оболочка и слабо развиты эластические элементы

4.Имеют клапаны

Строение cтенки:

I. интима

а. эндотелий б. подэндотелиальный слой

в. внутренняя эластическая мембрана - не выражена имеет рельеф - складки, выпячивания интимы - клапаны

II.средняя оболочка:

1.гладкомышечная ткань

2.слабое развитие циркулярного слоя

3.преобладание продольного слоя

III.адвентициальная оболочка:

-РСТ

-относительно наиболее выраженная оболочка

Классификация:

1.вены мышечного типа

2.вены волокнистого типа

Вены мышечного типа:

-в средней оболочке – гладкомышечные клетки

Вены волокнистого типа:

- вены в органах, имеющих плотные стенки (кости, трабекулы органов)

- наружная оболочка вены прочно сращена с органом

- отсутствует средняя оболочка

Возрастные изменения

Строение сосудов непрерывно меняется в течение всей жизни человека. Развитие сосудов под влиянием функциональной нагрузки заканчивается примерно к 30 годам. В дальнейшем в стенках артерий происходит разрастание соединительной ткани, что ведет к их уплотнению. В артериях эластического типа этот процесс выражен сильнее, чем в остальных артериях. После 60-70 лет во внутренней оболочке всех артерий обнаруживаются очаговые утолщения коллагеновых волокон, в результате чего в крупных артериях внутренняя оболочка по размерам приближается к средней. В мелких и средних артериях внутренняя оболочка разрастается слабее. Внутренняя эластическая мембрана с возрастом постепенно истончается и расщепляется. Мышечные клетки средней оболочки атрофируются. Эластические волокна подвергаются распаду и фрагментации, в то время как коллагеновые волокна разрастаются. Одновременно с этим во внутренней и средней оболочках у пожилых людей появляются известковые и липидные отложения, которые прогрессируют с возрастом. В наружной оболочке у лиц старше 60-70 лет возникают продольно лежащие пучки гладких мышечных клеток.

Возрастные изменения в венах сходны с таковыми в артериях. Однако перестройка стенки вены человека начинается еще на первом году жизни. - К моменту рождения человека в средней оболочке стенок бедренной и подкожных вен нижних конечностей имеются лишь пучки циркулярно ориентированных мышечных клеток. Только к моменту вставания на ноги (к концу первого года) и повышения гидростатического давления развиваются продольные мышечные пучки. У детей просвет вены примерно равен просвету соответствующей артерии, а у взрослых по просвет вены примерно вдвое больше просвета соответствующей артерии. Расширение просвета вен обусловлено меньшей эластичностью их стенки.

Сосуды сосудов до возраста 50-60 лет, как правило, бывают умеренно спазмированными, а после 60 лет просвет их расширяется.

Лимфатические сосуды многих органов у лиц старческого возраста характеризуются многочисленными мелкими варикозными вздутиями и выпячиваниями. Во внутренней оболочке стенок крупных лимфатических стволов и грудного протока у людей старше 35 лет увеличивается количество коллагеновых волокон. Одновременно количество мышечных клеток и эластических волокон уменьшается.

Регенерация

Мелкие кровеносные и лимфатические сосуды обладают способностью к регенерации. Восстановление дефектов сосудистой стенки после ее повреждения начинается с регенерации и роста ее эндотелия. Уже к концу первых - началу вторых суток на месте нанесенного повреждения наблюдается пролиферация эндотелиальных клеток.

В регенерации сосудов после травмы принимают участие эндотелиоциты, адвентициальные клетки, а в мелких сосудах - и перициты.

Мышечные клетки поврежденного сосуда, как правило, восстанавливаются более медленно и неполно по сравнению с другими тканевыми элементами сосуда. Восстановление их происходит частично путем деления миоцитов, а также в результате дифференцировки миофибробластов. Эластические элементы развиваются слабо. В случае перерыва среднего и крупного сосудов регенерации его стенки без оперативного вмешательства, как правило, не наступает, хотя восстановление циркуляции крови в соответствующей области может наблюдаться очень рано. Это происходит, с одной стороны, благодаря компенсаторной перестройке коллатеральных сосудов, а с другой - вследствие развития и роста новых мелких сосудов - капилляров.

Новообразование капилляров начинается с того, что цитоплазма эндотелиальных клеток артериол и венул набухает в виде почки, затем эндотелиальные клетки подвергаются делению. По мере роста эндотелиальной почки в ней появляется полость. Такие слепо заканчивающиеся трубки растут навстречу друг другу и смыкаются концами. Цитоплазматические перегородки между ними истончаются и прорываются, и во вновь образованном капилляре устанавливается циркуляция крови.

Лимфатические сосуды после их повреждения регенерируют несколько медленнее, чем кровеносные. Регенерация лимфатических сосудов может происходить за счет или почкования дистальных концов эндотелиальных трубок, или перестройки лимфатических капилляров в отводящие сосуды.

Вопрос №2

Кобобщенной системе крови относят:

собственно кровь и лимфу;

органы кроветворения — красный костный мозг, тимус, селезенку, лимфатические узлы;

лимфоидную ткань некроветворных органов.

Элементы системы крови имеют общие структурно-функциональные особенности, все происходят из мезенхимы, подчиняются общим законам нейрогуморальной регуляции, объединены тесным взаимодействием всех звеньев. Постоянный состав периферической крови поддерживается сбалансированными процессами новообразования и разрушения клеток крови. Поэтому понимание вопросов развития, строения и функции отдельных элементов системы возможно лишь с позиций изучения закономерностей, характеризующих всю систему в целом.

Кровь и лимфа вместе с соединительной тканью образуют т.н. внутреннюю среду организма. Они состоят из плазмы (жидкого межклеточного вещества) и взвешенных в ней форменных элементов. Эти ткани тесно взаимосвязаны, в них происходит постоянный обмен форменными элементами, а также веществами, находящимися в плазме. Лимфоциты рециркулируют из крови в лимфу и из лимфы в кровь. Все клетки крови развиваются из общей полипотентной стволовой клетки крови (СКК) в эмбриогенезе и после рождения.

Кровь

Кровь является циркулирующей по кровеносным сосудам жидкой тканью, состоящей из двух основных компонентов, — плазмы и форменных элементов. Кровь в организме человека составляет, в среднем, около 5 л. Различают кровь, циркулирующую в сосудах, и кровь, депонированную в печени, селезенке, коже.

Плазма составляет 55—60% объема крови, форменные элементы – 40—45%. Отношение объема форменных элементов ко всему объему крови называется гематокритным числом, или гематокритным показателем, - и составляет в норме 0,40 – 0,45. Термингематокрит используют для названия прибора (капилляра) для измерения гематокритного показателя.

Основные функции крови

дыхательная функция (перенос кислорода из легких во все органы и углекислоты из органов в легкие);

трофическая функция (доставка органам питательных веществ);

защитная функция (обеспечение гуморального и клеточного иммунитета, свертывание крови при травмах);

выделительная функция (удаление и транспортировка в почки продуктов обмена веществ);

гомеостатическая функция (поддержание постоянства внутренней среды организма, в том числе иммунного гомеостаза).

Через кровь (и лимфу) транспортируются также гормоны и другие биологически активные вещества. Все это определяет важнейшую роль крови в организме. Анализ крови в клинической практике является одним из основных в постановке диагноза.

Плазма крови

Плазма крови представляет собой жидкое (точнее, коллоидное) межклеточное вещество. Она содержит 90% воды, около 6,6 — 8,5% белков и другие органические и минеральные соединения - промежуточные или конечные продукты обмена веществ, переносимые из одних органов в другие.

К основным белкам плазмы крови относятся альбумины, глобулины и фибриноген.

Альбумины составляют более половины всех белков плазмы, синтезируются в печени. Они обусловливают коллоидно-осмотическое давление крови, выполняют роль транспортных белков для многих веществ, включая гормоны, жирные кислоты, а также токсины и лекарства.

Глобулины – неоднородная группа белков, в которой выделяют альфабета- и гаммафракции. К последней относятся иммунноглобулины, или антитела, - важные элементы иммунной (т.е. защитной) системы организма.

Фибриноген – растворимая форма фибрина, - фибриллярного белка плазмы крови, образующего волокна при повышении свертываемости крови (например, при образовании тромба). Синтезируется фибриноген в печени. Плазма крови, из которой удален фибриноген, называется сывороткой.

Форменные элементы крови

К форменным элементам крови относятся: эритроциты (или красные кровяные тельца), лейкоциты (или белые кровяные тельца), и тромбоциты (или кровяные пластинки). Эритроцитов

у человека около 5 x 1012 в 1 литре крови, лейкоцитов – около 6 x 109 (т.е. в 1000 раз меньше), а тромбоцитов – 2,5 x 1011 в 1 литре крови (т.е. в 20 раз меньше, чем эритроцитов).

Популяция клеток крови обновляющаяся, с коротким циклом развития, где большинство зрелых форм являются конечными (погибающими) клетками.

Лейкоциты

Лейкоциты, или белые кровяные клетки, в свежей крови бесцветны, что отличает их от окрашенных эритроцитов. Число их составляет в среднем 4 — 9 x 109 в 1 литре крови (т.е. в 1000 раз меньше, чем эритроцитов). Лейкоциты способны к активным движениям, могут переходить через стенку сосудов в соединительную ткань органов, где они выполняют основные защитные функции. По морфологическим признакам и биологической роли лейкоциты подразделяют на две группы: зернистые лейкоциты, илигранулоциты, и незернистые лейкоциты,

или агранулоциты.

По другой классификации, учитывающей форму ядра лейкоцита, различают лейкоциты с круглым или овальным несегментированным ядром – т.н. мононуклеарныелейкоциты, или мононуклеары, а также лейкоциты с сегментированным ядром, состоящим из нескольких частей – сегментов, - сегментоядерные лейкоциты.

В стандартной гематологической окраске по Романовскому — Гимзе используются два красителя: кислый эозин и основной азур-II. Структуры, окрашиваемые эозином (в розовый цвет) называют эозинофильными, или оксифильными, или же ацидофильными. Структуры, окрашиваемые красителем азур-II (в фиолетово-красный цвет) называют базофильными, или азурофильными.

У зернистых лейкоцитов при окраске азур-II – эозином, в цитоплазме выявляются специфическая зернистость (эозинофильная, базофильная или нейтрофильная) и сегментированные ядра (т.е. все гранулоциты относятся к сегментоядерным лейкоцитам). В соответствии с окраской специфической зернистости различают нейтрофилъные, эозинофильные и базофильные гранулоциты.

Группа незернистых лейкоцитов (лимфоциты и моноциты) характеризуется отсутствием специфической зернистости и несегментированными ядрами. Т.е. все агранулоциты относятся к мононуклеарным лейкоцитам.

Процентное соотношение основных видов лейкоцитов называется лейкоцитарной формулой, или лейкограммой. Общее число лейкоцитов и их процентное соотношение у человека могут изменяться в норме в зависимости от употребляемой пищи, физического и умственного напряжения и при различных заболеваниях. Исследование показателей крови является необходимым для установления диагноза и назначения лечения.

Все лейкоциты способны к активному перемещению путем образования псевдоподий, при этом у них изменяются форма тела и ядра. Они способны проходить между клетками эндотелия сосудов и клетками эпителия, через базальные мембраны и перемещаться по основному веществу соединительной ткани. Направление движения лейкоцитов определяется хемотаксисом под влиянием химических раздражителей — например продуктов распада тканей, бактерий и других факторов.

Лейкоциты выполняют защитные функции, обеспечивая фагоцитоз микробов, инородных веществ, продуктов распада клеток, участвуя в иммунных реакциях.

Агранулоциты (незернистые лейкоциты)

К этой группе лейкоцитов относятся лимфоциты и моноциты. В отличие от гранулоцитов они не содержат в цитоплазме специфической зернистости, а их ядра не сегментированы.

Лимфоциты в крови взрослых людей составляют 20—35% от общего числа лейкоцитов. Среди лимфоцитов различают малые лимфоциты, средние и большие. Большие лимфоциты встречаются в крови новорожденных и детей, у взрослых они отсутствуют. Большую часть всех лимфоцитов крови человека составляют малые лимфоциты.

Для всех видов лимфоцитов характерно наличие интенсивно окрашенного ядра округлой или бобовидной формы. В цитоплазме лимфоцитов содержится небольшое количество азурофильных гранул (лизосом).

Основной функцией лимфоцитов является участие в иммунных реакциях. Однако популяция лимфоцитов гетерогенна по характеристике поверхностных рецепторов и роли в реакциях иммунитета. Среди лимфоцитов различают три основных функциональных класса: B- лимфоциты, T-лимфоциты и т.н. нулевые лимфоциты.

B-лимфоциты впервые были обнаружены в специальном органе у птиц –фабрициевой сумке, (бурсе, bursa Fabricius), поэтому и получили соответствующее название. Они образуются в костном мозге. В-лимфоциты составляют около 30 % циркулирующих лимфоцитов. Их главная функция — участие в выработке антител, т.е. обеспечение гуморального иммунитета. Плазмолемма В-лимфоцитов содержит множество иммуноглобулиновых рецепторов. При действии

антигенов В-лимфоциты способны к пролиферации и дифференцировке в плазмоциты — клетки, способные синтезировать и секретировать защитные белки – антитела, или иммуноглобулины, которые поступают в кровь, обеспечивая гуморальный иммунитет.

Т-лимфоциты, или тимусзависимые лимфоциты, образуются из стволовых клеток костного мозга, а созревают в тимусе (вилочковой железе), что и обусловило их название. Они преобладают в популяции лимфоцитов, составляя около 70 % циркулирующих лимфоцитов. Для Т-клеток, в отличие от В-лимфоцитов, характерен низкий уровень поверхностных иммуноглобулиновых рецепторов в плазмолемме. Но Т-клетки имеют специфические рецепторы, способные распознавать и связывать антигены, участвовать в иммунных реакциях. Основными функциями Т-лимфоцитов являются обеспечение реакций клеточного иммунитета и регуляция гуморального иммунитета (т.е. стимуляция или подавление дифференцировки В-лимфоцитов). Т- лимфоциты способны к выработке сигнальных веществ - лимфокинов, которые регулируют деятельность В-лимфоцитов и других клеток в иммунных реакциях. Среди Т-лимфоцитов выявлено несколько функциональных групп: Т-хелперы, Т-супрессоры, Т-киллеры.

Нулевые лимфоциты не имеют поверхностных маркеров на плазмолемме, характерных для В- и Т-лимфоцитов. Их расценивают как резервную популяцию недифференцированных лимфоцитов.

Продолжительность жизни лимфоцитов варьирует от нескольких недель до нескольких лет. Т- лимфоциты являются «долгоживущими» (месяцы и годы) клетками, а В-лимфоциты относятся к «короткоживущим» (недели и месяцы).

Для Т-лимфоцитов характерно явление рециркуляции, т.е. выход из крови в ткани и возвращение по лимфатическим путям снова в кровь. Таким образом они осуществляют иммунологический надзор за состоянием всех органов, быстро реагируя на внедрение чужеродных агентов.

Среди клеток, имеющих морфологию малых лимфоцитов, следует назвать циркулирующие стволовые клетки крови, которые поступают в кровь из костного мозга. Из клеток, поступающих в кроветворные органы, дифференцируются различные клетки крови, а из поступающих в соединительную ткань, — тучные клетки, фибробласты и другие клетки соединительной ткани.

Лимфоциты в крови взрослых людей составляют 20—35% от общего числа лейкоцитов. Среди лимфоцитов различают малые лимфоциты, средние и большие. Большие лимфоциты встречаются в крови новорожденных и детей, у взрослых они отсутствуют. Большую часть всех лимфоцитов крови человека составляют малые лимфоциты.

Для всех видов лимфоцитов характерно наличие интенсивно окрашенного ядра округлой или бобовидной формы. В цитоплазме лимфоцитов содержится небольшое количество азурофильных гранул (лизосом).

Основной функцией лимфоцитов является участие в иммунных реакциях. Однако популяция лимфоцитов гетерогенна по характеристике поверхностных рецепторов и роли в реакциях иммунитета. Среди лимфоцитов различают три основных функциональных класса: B- лимфоциты, T-лимфоциты и т.н. нулевые лимфоциты.

B-лимфоциты впервые были обнаружены в специальном органе у птиц –фабрициевой сумке, (бурсе, bursa Fabricius), поэтому и получили соответствующее название. Они образуются в костном мозге. В-лимфоциты составляют около 30 % циркулирующих лимфоцитов. Их главная функция — участие в выработке антител, т.е. обеспечение гуморального иммунитета. Плазмолемма В-лимфоцитов содержит множество иммуноглобулиновых рецепторов. При действии антигенов В-лимфоциты способны к пролиферации и дифференцировке в плазмоциты — клетки, способные синтезировать и секретировать защитные белки – антитела, или иммуноглобулины, которые поступают в кровь, обеспечивая гуморальный иммунитет.

Т-лимфоциты, или тимусзависимые лимфоциты, образуются из стволовых клеток костного мозга, а созревают в тимусе (вилочковой железе), что и обусловило их название. Они преобладают в популяции лимфоцитов, составляя около 70 % циркулирующих лимфоцитов. Для Т-клеток, в отличие от В-лимфоцитов, характерен низкий уровень поверхностных иммуноглобулиновых рецепторов в плазмолемме. Но Т-клетки имеют специфические рецепторы, способные распознавать и связывать антигены, участвовать в иммунных реакциях. Основными функциями Т-лимфоцитов являются обеспечение реакций клеточного иммунитета и регуляция гуморального иммунитета (т.е. стимуляция или подавление дифференцировки В-лимфоцитов). Т- лимфоциты способны к выработке сигнальных веществ - лимфокинов, которые регулируют деятельность В-лимфоцитов и других клеток в иммунных реакциях. Среди Т-лимфоцитов выявлено несколько функциональных групп: Т-хелперы, Т-супрессоры, Т-киллеры.

Нулевые лимфоциты не имеют поверхностных маркеров на плазмолемме, характерных для В- и Т-лимфоцитов. Их расценивают как резервную популяцию недифференцированных лимфоцитов.

Продолжительность жизни лимфоцитов варьирует от нескольких недель до нескольких лет. Т- лимфоциты являются «долгоживущими» (месяцы и годы) клетками, а В-лимфоциты относятся к «короткоживущим» (недели и месяцы).

Для Т-лимфоцитов характерно явление рециркуляции, т.е. выход из крови в ткани и возвращение по лимфатическим путям снова в кровь. Таким образом они осуществляют иммунологический надзор за состоянием всех органов, быстро реагируя на внедрение чужеродных агентов.

Среди клеток, имеющих морфологию малых лимфоцитов, следует назвать циркулирующие стволовые клетки крови, которые поступают в кровь из костного мозга. Из клеток, поступающих в кроветворные органы, дифференцируются различные клетки крови, а из поступающих в соединительную ткань, — тучные клетки, фибробласты и другие клетки соединительной ткани.

.

Вопрос №3

Проточная цитометрия

- метод количественного анализа клеток в потоке несущей жидкости с использованием проточных цитометров.

Основные принципы метода:

1. из ткани получают клеточную суспензию, состоящую из отдельных клеток

2.клетки обрабатывают веществами, количественно связывающимися с определенными клеточными структурами:

1.антитела – на белки в клеточной поверхности

2.ДНК-зонды

3.РНК-зонды и т.д.

3.использование флуоресцентной метки, присоединяемой к получаемому комплексу

4.выстраивание клеток в потоке жидкости в один ряд, в одну линию

5.возбуждение флуоресцентных меток на клетках энергией лазера

6.измерение интенсивности люминесценции метки ФЭУ

7.обработка полученных результатов на ЭВМ

8.результаты исследований представлены в виде гистограмм распределения и вариационных рядов цифровых значений

Варианты:

1.количественная гистохимия

-измерение количества веществ в клетке с помощью проведения химических реакций

-пример – ДНК-цитометрия

2.иммунофенотипирование

-выявление комплекса антиген-антитело

Применение

[править]Иммун г я

иммунофенотипирование клеток периферической крови

определение фагоцитарной активности (захват меченных флюорохромами бактерий или дрожжей)

определение внутриклеточных цитокинов (спонтанная продукция и под действием различных специфических или неспецифических активаторов, таких как ФМА + иономицин, ЛПС, ФНОальфа)

определение внутриклеточных белков, например транскрипционных факторов GATA-3, T-bet, FoxP3 для дискриминации CD4 Т-лимфоцитов

определение пролиферативной активности (выявление инкорпорированого бромдезоксиуридина)

исследование клеточного цикла

оценка клеточной цитотоксичности

[править]Он

г я

количественный анализ внутриклеточных компонентов (ДНК)

анализ стадий клеточного цикла

выявление анеуплоидного клона

определение пролиферативной активности анеуплоидного клона

определение специфических маркеров

позволяет проводить наблюдение пациентов, входящих в группу риска

оценка состояния иммунной системы:

оценка клеточного звена иммунитета (определение субпопуляций лимфоцитов)

оценка функциональной состоятельности иммунокомпетентных клеток (NK тест, фагоцитарный тест и т. п.)

[править]

г я

определение цитоморфологической принадлежности клетки размер, соотношение ядро/цитоплазма, степень асимметричности и гранулярности клеток

оценка активности внутриклеточных ферментов с помощью флуорогенных субстратов

определение экспрессии поверхностных антигенов

анализ стадий клеточного цикла

измерение физиологических параметров клетки (внутриклеточный pH, концентрация свободных ионов Ca2+, потенциал наружной клеточной мембраны)

[править]Г ма

г я

анализ субпопуляционного состава клеток периферической крови

подсчет ретикулоцитов, анализ тромбоцитов по специфическим маркерам

дифференциальная диагностика лимфопролиферативных заболеваний и реактивных лимфоцитозов

диагностика лимфопролиферативных заболеваний

диагностика острых лейкозов

оценка минимальной резидуальной болезни

[править]Фарма

г я

измерение экспрессии маркеров

измерение активности внутриклеточных ферментов

определений стадий клеточного цикла в рамках изучения механизмов воздействия различных биологически активных веществ на клеточном уровне

В настоящее время проточная цитометрия применяется для выявления определённых клеток в исследуемых образцах (как бактериальных и грибковых, так и собственных клеток организма человека), определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам, а также мониторирования состояния вирусного процесса у ВИЧ-инфицированных пациентов.

Выявление бактериальных, грибковых, а также собственных клеток организма в биологических жидкостях крайне важно для диагностики многих заболеваний. В ходе одного из исследований было показано, что проточная цитометрия обладает в 100—1000 раз более высокой чувствительностью по сравнению с микроскопией и позволяет выявлять бактериальные клетки в количестве 10-100 в 1 мл крови. При более низкой концентрации бактерий в образце возможно проведение предварительной инкубации. Высокую чувствительность методу придает использование моноклональных антител, помеченных флуоресцирующим веществом.

Проточная цитометрия позволяет не только выявлять инфицирование микроорганизмами, но и определять спектр их чувствительности, причём, длительность исследования не превышает