Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
методичні вказівки для лабораторних і контрольних робіт_зв.doc
Скачиваний:
1
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
648.7 Кб
Скачать

2. Реакції необоротного осадження білків.

Дослід 3. Осадження білків солями важких металів.

У дві пробірки наливають по 2-3 мл розчину білка. Доливають по краплях у першу пробірку 0,5%-вий розчин плюмбум ацетату Pb(CH3COO)2, у другу — 5%-вий розчин купрум (II) сульфату CuSO4.

Білки з солями важких металів утворюють міцні солеподібні та комплексні сполуки, які випадають в осади, нерозчинні в первісному розчинникові. Для того, щоб переконатися у необоротності реакцій осадження білка, вміст обох пробірок поділяють навпіл. До однієї половини доливають по 1-2 мл дистильованої води і переконуються у необоротності осадження білка. До другої половини додають надлишок відповідних осаджувачів: у першу пробірку 0,5%-го розчину плюмбум ацетату, у другу — 5%-го розчину купрум (II) сульфату. Спостерігають перерозчинення створеного ними осаду білка. Таке розчинення пояснюється адсорбцією надлишку іонів металу і перезарядженням білкового комплексу, внаслідок чого в розчин переходить комплекс зміненого білка з металом.

Дослід 4. Осадження білків алкалоїдними реактивами.

Розчини білків можуть утворювати осади додаванням алкалоїдних реактивів. До них відносяться танін (міститься в чаї), фосфорно-вольфрамова і фосфорно-молібденова кислоти, пікринова кислота, розчин Калій гексаціаноферату (ІІ) та інші.

У пробірку наливають 1-2 мл розчину білка, підкислюють 2-3 краплями 10 %-го розчину оцтової кислоти і додають 2-3 краплі 5 %-го розчину калій гексаціаноферату (ІІ), вміст пробірки взбовтують після додавання кожної краплі. Випадає осад білка.

Дослід 5. Осадження білків мінеральними кислотами.

Концентровані мінеральні кислоти (крім, фосфатної) викликають необоротне осадження білків з розчину. Це осадження пояснюється як явищем дегідратації білкових молекул, так і утворенням солей із білка та кислоти. Надлишок мінеральних кислот, за винятком нітратної, розчиняє осад білка, що утворився.

У пробірку обережно наливають 1 мл концентрованої хлоридної або сульфатної кислоти і обережно 1 мл білка. На межі двох рідин спостерігається поява осаду білка у вигляді невеликого білого кільця. При струшуванні вмісту пробірки відбувається розчинення осаду білка в надлишку цих двох кислот.

Дослід 6. Осадження білків органічними кислотами.

У пробірку наливають 1-2 краплі білка і додають кілька крапель 3 %-го розчину три хлороцтової кислоти CCl3COOH. Спостерігають випадіння осаду білка.

Дослід 7. Осадження білків нагріванням.

У пробірку наливають 1-2 мл розчину білка і нагрівають над полум’ям горілки. Внаслідок того, що білки денатурують і переходять в нерозчинний стан, утворюється осад білка.

Результати лабораторної роботи оформлюються у вигляді таблиці 3.

Таблиця 3.

Тип осадження

Номер і назва досліду

Реактиви, що використовували

Пояснення реакції

оборотне

1

2

необоротне

3

4

5

6

7

Завдання для самостійної роботи: вивчити теоретичний матеріал за темою, підготувати відповіді на контрольні питання.