Работа № 19. Щелочной гидролиз белка (2 часа)

Цель занятия - изучить качественные реакции на серосодержа­щие аминокислоты и наличие их в белках куриного яйца и кератине волос.

Содержание работы. Провести реакцию Фоля на белок курино­го яйца и кератин волос.

Подготовка к занятию. Изучить качественные реакции на серо­содержащие аминокислоты, вспомнить из органической химии ос­новные серосодержащие аминокислоты, качественные реакции на общий белок, условия гидролиза белков.

Литература [2, с. 139-143; 4, с. 73; 7, с. 113-114].

Вопросы для самоконтроля

1. Напишите структурные формулы серосодержащих аминокис­лот.

2. Перечислите качественные реакции на белки, на серосодержа­щие аминокислоты.

3. Напишите реакцию Фоля с цистеином.

4. Напишите реакцию гидролиза дипептида.

5. Какие серосодержащие аминокислоты входят в состав склеропротеина (кератина) волос?

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, спиртовка, 10%-ный раствор гидроксида натрия, 1%-ный раствор сернокислой меди, 0,5%-ный раствор уксуснокислого свинца.

Ход работы

Опыт 1. Реакция Фоля на серосодержащие аминокислоты. В про­бирку налить 1-2 мл уксуснокислого свинца и по каплям добавлять раствор едкого натра до растворения образовавшегося осадка гидро­ксида свинца. Затем прилить 4-5 капель белка и нагреть смесь. На­блюдать постепенное потемнение раствора.

Опыт 2. Щелочной гидролиз белка. Положить в пробирку прядку волос (лучше светлых) и залить их 2 мл 10%-ного раствора КаОН. Осторожно нагрейте пробирку на спиртовке, следя за гидролизом ке­ратина. Когда волосы исчезнут, отлейте несколько капель гидролиза-та в пробирку и добавьте 1-2 капли 1%-ного раствора сульфата меди. К оставшейся части раствора добавьте 5 капель раствора уксуснокис­лого свинца. Запишите и объясните наблюдения, схемы реакций. Сделайте вывод.

Контрольные вопросы

1. Почему при сжигании шерсти, волос ощущается запах серы?

Работа 20. Выделение муцина из слюны и изучение его свойства (2часа)

Цель занятия - выделит муцин из слюны и изучить его свойст­ва.

Содержание работы. Выделить муцин из слюны, осадив его рас­твором уксусной кислоты, провести бизретовую реакцию и реакцию с α-нафтолом, подтверждающую наличие моносахаридов в муцине.

Подготовка к занятиям. Необходимо знать классификацию бел­ков - протеидов, их физические и химические свойства.

Литература [ 2,с.161-169; 4,с.91-95; б.с.92-98; 7, с. 131; 8, с. 102-107].

Вопросы для самоконтроля

1. Какие белки относятся к гликопротеидам? Приведите примеры.

2. Какие мукополисахариды Вы знаете?

3. Какими свойствами - кислыми или основными - обладает му­цин?

4. В каких раствора муцин осаждается, а в каких - растворяется?

5. В каких секретах содержится муцин?

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, стеклянные па­лочки, уксусная кислота (1%-ный раствор), гидроксид натрия (10%-ный раствор), соляная кислота (0,1%-ный раствор), сульфат ме­ди (1%-ный раствор), ос-нафтол (0,2%-ный раствор), серная кислота концентрированная.

Ход работы

В три пробирки собрать по 1-2 мл слюны и добавить в каждую по каплям 1%-ный раствор уксусной кислоты до появления сгустков муцина. Осадок муцина в пробирках осторожно промыть водой, при­держивая сгусток палочкой.

После промывания к сгустку муцина в первой пробирке добавить 1 мл 10%-ного раствора едкого натрия, размешать и после растворе­ния провести биуретовую реакцию. Для этой цели добавить еще 5-6 капель едкого натрия и 1-2 капли сернокислой меди. Пробирку встряхнуть и наблюдать появление розовой или фиолетовой окраски.

Во вторую пробирку прилить 1 мл 0,1%-ного раствора соляной кислоты и наблюдать растворение осадка.

В третью пробирку к сгустку муцина добавить 5-6 капель α-нафтола, смешать и осторожно добавить концентрированную серную кислоту. На границе двух слоев жидкости появляется фиолетовое окра­шивание, подтверждающее наличие в муцине моносахаридов.

Вместо α-нафтола можно взять 1%-ный раствор тимола, образу­ется более отчетливое красное кольцо.

Контрольные вопросы

1. В чем суть качественной реакции на моносахариды муцина?