54. Признаки пригодности крови, условия ее хранения.

Оценка годности консервированной крови и ее компонентов для переливания. Перед трансфузией определяют пригодность крови для переливания: учитывают целостность упаковки, срок годности, нарушение режима хранения крови (возможное замерзание, перегревание). Наиболее целесообразно переливать кровь со сроком хранения не более 5-7 сут, так как с удлинением срока хранения в крови происходят биохимические и морфологические изменения, которые снижают ее положительные свойства. При макроскопической оценке кровь должна иметь три слоя. На дне расположен красный слой эритроцитов, он покрыт тонким серым слоем лейкоцитов и сверху определяется прозрачная слегка желтоватая плазма. Признаками непригодности крови являются: красное или розовое окрашивание плазмы (гемолиз), появление в плазме хлопьев, помутнения, наличие пленки на поверхности плазмы (признаки инфицирования крови), наличие сгустков (свертывание крови). При срочном переливании не отстоявшейся крови часть ее отливают в пробирку и центрифугируют. Розовое окрашивание плазмы указывает на гемолиз. При переливании замороженных компонентов крови упаковки с кровью быстро подогревают до температуры 38 0С, затем эритроциты отмывают от использованного криокорректора-глицерина для эритроцитов и диметилсульфоксида для лейкоцитов и тромбоцитов.

Консервирование крови - это комплекс воздействий на нее, имеющих своей целью создание условий для длительного хранения крови вне организма в стерильном состоянии с максимальным сохранением ее биологических свойств (как форменных элементов, так и жидкой части крови).

Для консервирования крови используются два метода:

· консервирование при положительных температурах;

· консервирование при отрицательных температурах.

Хранение крови при положительных температурах обычно происходит в бытовых комнатных холодильниках.

Они обеспечивают поддержание температурного режима в пределах от +2 до +4°С. При таких температурах можно хранить консервированную цельную кровь, эритроцитную массу, нативную плазму.

Различные компоненты крови имеют разные сроки хранения. Так, например, эритроциты могут сохранять свои свойства в течение нескольких недель, а лейкоциты и тромбоциты - только несколько дней. Это объясняется тем, что лейкоциты и тромбоциты - ядерные клетки с более сложными функциями, а при длительном хранении в первую очередь изменения затрагивают ядро клетки. Срок хранения нативной плазмы ограничен тремя днями. Это обусловлено тем, что за это время инактивируется большая часть биологически активных веществ, входящих в ее состав.

Для того чтобы избежать таких нежелательных последствий при длительном хранении крови, используется ее консервирование при отрицательных температурах. Это позволяет увеличить срок хранения крови за счет того, что обменные процессы в клетках в значительной степени подавляются, а это препятствует раннему их "старению".

Для криоконсервирования используются следующие температурные режимы:

· умеренно низкие температуры (-40...-60°С),

· ультранизкие температуры (-196°С).

Величиной температуры определяются сроки, в течение которых эритроциты смогут сохранить свои свойства. При умеренно низких температурах они могут храниться несколько месяцев, а при ультранизких - 10 и более лет.

Принимая во внимание то, что ядерные клетки "стареют" быстрее, чем эритроциты, для консервирования лейкоцитов и тромбоцитов желательно использовать ультранизкие температуры, так как при умеренно низких температурах срок хранения уменьшается до нескольких недель.

Криоконсервирование эритроцитов

Общие сведения

Цельная кровь при положительных температурах (+2...+6°С) может сохраняться в течение ограниченного периода времени. При использовании раствора глюгицира потеря функциональной активности клетками крови происходит к концу третьей недели хранения в результате истощения содержания ферментов и коферментов, ответственных за поддержание метаболических процессов. А при условии добавления метаболитов углеводно-фосфорного обмена срок сохранения полноценных эритроцитов удлиняется до 30-35 дней. При этом по мере увеличения срока хранения ухудшаются морфофункциональные свойства эритроцитов. Поэтому был разработан метод хранения эритроцитов при ультранизких температурах, позволяющий сохранять клетки крови в биологически полноценном состоянии в течение многих лет. Для предотвращения гибели или повреждения клеток при замораживании к ним в определенных соотношениях добавляются специальные химические агенты, так называемые криопротекторы, или криофилактики, а сам метод получил название криоконсервирования.

Криопротекторы в зависимости от механизма ограждающего действия на клетки делят на две группы:

· эндоцеллюлярные (т.е. проникающие внутрь клетки);

· экзоцеллюлярные (т.е. не проникающие внутрь клетки).

Криопротектором первой группы является глицерин. В силу того, что он быстро проникает в эритроциты, его широко применяют для криоконсервирования эритроцитов. Механизм его защитного действия еще окончательно не изучен, но уже сейчас можно говорить о том, что глицерин влияет на процессы как внутриклеточной, так и внеклеточной кристаллизации, отдаляя и замедляя ее наступление по мере понижения температуры. Он также оказывает структурирующее влияние на внутриклеточную воду.

У глицерина есть один существенный недостаток - он является гиперосмолярным веществом по отношению к плазме крови. Из-за этого эритроциты, замороженные с ним, нельзя сразу после оттаивания переливать больному или помещать в любую изотоническую среду, поскольку глицеринизированные эритроциты начинают притягивать на себя воду из плазмы, быстро увеличиваются в объеме, теряют стойкость и разрушаются, т.е. имеет место так называемый осмотический шок, или осмотический гемолиз. Поэтому криоконсервированные в глицерине эритроциты перед трансфузией больному подвергаются специальной обработке - отмыванию.

Методы замораживания эритроцитов

В клинической практике для консервирования эритроцитов крови человека используют два основных метода замораживания:

быстрое - со скоростью охлаждения несколько градусов в секунду,

медленное - со скоростью снижения температуры несколько градусов в минуту.

Есть еще и третий метод замораживания - это так называемое ультрабыстрое замораживание. При этом методе скорость охлаждения достигает 100° в секунду. Но он не получил применения в клинической практике из-за того, что достаточно большие объемы крови (250-500 мл) замораживать таким образом просто невозможно.

Поэтому более подробно остановимся на основных методах замораживания эритроцитов.

Быстрое замораживание эритроцитов

В настоящее время замораживание, хранение и отмывание эритроцитов перед их введением больному осуществляется в отделениях долгосрочного хранения крови (банках крови), располагающих для этого соответствующей аппаратурой и штатами.