12. Виды иммунитета. Особенности противовирусного, противогрибкового иммунитета.

Иммунитет, виды и формы. Структура иммунной системы. Факторы неспецифической защиты.

В настоящее время считается, что наследственный (врожденный, видовой) и приобретенный иммунитет зависит от согласованной деятельности пяти основных систем : макрофагов, комплемента, интерферонов, Т- и В- лимфоцитов, главной системы гистосовместимости (МНС- в английском варианте), обеспечивающих различные формы иммунного ответа.

В современном понимании иммунология- это не только наука, изучающая защиту от инфекционных заболеваний. Иммунология- наука, изучающая механизмы самозащиты организма от всего генетически чужеродного, поддержания структурной и функциональной целостности организма (гомеостаза организма). Подробнее - см. лекцию 1.

Центральным биологическим механизмом иммунитета является механизм распознавания “своего” и “чужого”. Пример- необходимость защиты от собственных мутантных и раковых клеток (одномоментно в организме находится около 10 млн. измененных клеток).

Иммунитет- целостная система биологических механизмов самозащиты организма, с помощью которых он распознает и уничтожает все чужеродное (генетически отличающееся).

Выделяют две основные формы иммунитета- видовой (врожденный) и приобретенный. Приобретенный иммунитет может быть естественный (результат встречи с возбудителем) и искусственный (иммунизация), активный (вырабатываемый) и пассивный (получаемый), стерильный (без наличия возбудителя) и нестерильный (существующий в присутствии возбудителя в организме), гуморальный и клеточный, системный и местный, по направленности- антибактериальный, антивирусный, антитоксический, противоопухолевый, антитрансплантационный.

В основе видового иммунитета лежат различные механизмы естественной неспецифической резистентности. Среди них- кожные покровы и слизистые оболочки, нормальная микрофлора организма, фагоцитоз, воспаление, лихорадка, система комплемента, барьерные механизмы лимфоузлов, противомикробные вещества, выделительные системы организма, главная система гистосовместимости.

Кожа и слизистые- первая линия защиты против возбудителей. Кроме функции механического (анатомического) барьера кожа обладает бактерицидной активностью. Слизь, лизоцим, желудочный сок, слезная жидкость, слюна, деятельность мерцательного эпителия способствует защите слизистых оболочек.

Нормальная микрофлора организма препятствует колонизации организма посторонней микрофлорой (конкуренция за субстраты, различные формы антагонизма, в т.ч. выделение антибиотических веществ, изменение рН и др.).

Фагоцитоз и система комплемента- вторая линия защиты организма против микроорганизмов, преодолевших поверхностные барьеры. Клеточные факторы системы видовой резистентности- фагоциты, поглощающие и разрушающие патогенные микроорганизмы и другой генетически чужеродный материал. Представлены полиморфоядерными лейкоцитами или гранулоцитами- нейтрофилами, эозинофилами и базофилами (клетками миелопоэтического ряда), а также моноцитами и тканевыми макрофагами (клетками макрофагально- моноцитарной системы).

Значение фагоцитирующих клеток для защиты организма впервые доказал И.И.Мечников, разработавший фагоцитарную теорию иммунитета.

Стадии фагоцитоза.

Процесс фагоцитоза (поглощения твердофазного объекта) состоит из пяти стадий.

1.Активация (усиление энергетического метаболизма). Факторами активации и хемотаксиса являются бактериальные продукды (ЛПС, пептиды), компоненты комплемента (С3 и С5), цитокины и антитела.

2.Хемотаксис.

3.Адгезия.

4.Поглощение.

5.Исход фагоцитоза.

Адгезия связана с наличием ряда рецепторов на поверхности фагоцитов ( к Fc- фрагментам антител, компонентам комплемента, фибронектину), обеспечивающих прочность рецептор- опосредованных взаимодействий опсонинов, обволакивающих микроорганизмы и ограничивающих их подвижность (антитела, С3в, фибронектин).

Фагоциты обладают амебоподобными псевдоподиями. При поглощении образуется фагосома с поглощенным объектом (бактерией), к ней присоединяется и сливается содержащая литические ферменты лизосома, образуется фаголизосома.

Возможно три исхода фагоцитоза:

- завершенный фагоцитоз;

- незавершенный фагоцитоз;

- процессинг антигенов.

Завершенный фагоцитоз- полное переваривание микроорганизмов в клетке- фагоците.

Незавершенный фагоцитоз- выживание и даже размножение микроорганизмов в фагоците. Это характерно для факультативных и особенно - облигатных внутриклеточных паразитов. Механизмы персистирования в фагоцитах связаны с блокадой фагосомо- лизосомального слияния (вирус гриппа, микобактерии, токсоплазмы), резистентностью к действию лизосомальных ферментов (гонококки, стафилококки), способностью микробов быстро покидать фагосомы после поглощения и длительно пребывать в цитоплазме (риккетсии).

В процессе фагоцитоза происходит “окислительный взрыв” с образованием активных форм кислорода, что обеспечивает бактерицидный эффект.

К одной из важнейших функций макрофагов (наряду с хемотаксисом, фагоцитозом, секрецией биологически активных веществ) является переработка (процессинг) антигена и представление его иммунокомпетентным клеткам с участием белков главной системы гистосовместимости (МНС) класса 2.

Фагоцитоз- не только уничтожение чужеродного, но и представление антигена для запуска иммунных реакций и секреции медиаторов иммунных и воспалительных реакций. Система макрофагов- центральное звено не только естественной резистентности (видового иммунитета), но и играет важную роль в приобретенном иммунитете, кооперации клеток в иммунном ответе.

Воспаление как защитная реакция организма на различные повреждения тканей возникло на более высокой ступени эволюции, чем фагоцитоз и характерно для высокоорганизованных организмов, обладающих кровеносной и нервной системами.

Инфекционное воспаление сопровождается различными сосудистыми и клеточными (включая фагоцитоз) реакциями, а также запуском целого ряда медиаторов воспалительных реакций (гистамина, серотонина, кининов, белков острой фазы воспалеия, лейкотриенов и простагландинов, цитокинов, системы комплемента).

Многие бактериальные продукты активируют клетки макрофагально- моноцитарной системы и лимфоциты, отвечающие на них выделением биологически активных продуктов- цитокинов, в частности интерлейкинов. Их можно характеризовать как медиаторы клеточных иммунных реакций. В воспалительных реакциях основную роль имеет интерлейкин-1 (ИЛ-1), стимулирующий лихорадку, повышающий проницаемость сосудов и адгезивные свойства эндотелия, активирующий фагоциты.

Лихорадка. Повышение температуры тела- защитная реакция организма, ухудшающая условия для размножения многих микроорганизмов, активирует макрофаги, ускоряет кровоток и усиливает обменные процессы в организме.

Барьерные функции лимфоузлов. По выражению П.Ф.Здродовского (1969) лимфоузлы- своеобразный биологический фильтр для возбудителей, переносимых с лимфой. Здесь проникшие через кожу или слизистые и занесенные током лимфы микроорганизмы задерживаются и подвергаются действию макрофагов и активированных лимфоцитов.

Система комплемента- комплекс белков и гликопротеидов сыворотки крови человека и позвоночных животных (их более 20). Отдельные компоненты опосредуют процессы воспаления, опсонизацию чужеродных фрагментов для последующего фагоцитоза, участвуют наряду с макрофагами в непосредственном уничтожении микроорганизмов и других чужеродных клеток (лизис бактерий и вирусов). В условиях физиологической нормы компоненты системы комплемента находятся в неактивной форме. Известны три пути активации системы комплемента- классический, альтернативный и с использованием С1- шунта.

Классический путь- каскад протеазных реакций с компонента С1q до С9, реализуется при наличии антител к соответствующему антигену. С комплексом “антиген- антитела” взаимодействует компонент С1q, затем С4, следом- С2. Образуется комплекс “антиген- антитела-С1С4С2”, с ним соединяется С3 (центральный компонент системы) и запускается цепь активации с эффекторными функциями (опсонизация и лизис бактерий, активация системы макрофагов, воспаление).

Альтернативный путь реализуется при первичном контакте с возбудителем (когда еще нет антител). Он индуцируется ЛПС и другими микробными антигенами. С1, С4, С2 не участвуют, альтернативный и классический пути смыкаются на уровне С3.

Система интерферонов.

Интерфероны- синтезируемые различными клетками организма гликопротеиды широкого спектра биологической активности (прежде всего антивирусной), быстрый ответ организма на получение клетками неспецифического сигнала чужеродности. Существует целая система интерферонов, которые разделены на альфа, бета и гамма подтипы с выраженной гетерогенностью свойств. Противовирусное действие проявляется в способности подавлять внутриклеточное размножение ДНК- и РНК- вирусов (прежде всего в результате блокировки синтеза вирусных макромолекул). Индукцию синтеза интерферонов вызывают вирусы, бактерии, риккетсии, простейшие, синтетические соединения.

Киллерные клетки.

В обеспечении видового иммунитета существенную роль принадлежит Т- цитотоксическим лимфоцитам (Т- киллерам), а также главной системе гистосовместимости (подробнее- в следующих лекциях).

Т- киллеры по представлению антигенов главной системы гистосовместимости класса 1 распознают любые чужеродные антигены (включая мутантные, например- раковые клетки), атакуют и уничтожают их.

Клетки NK (natural killer- натуральные киллеры) имеют важное значение в поддержании генетического гомеостаза и противоопухолевой защите, их функции распознавания не зависят от представления антигенов МНС (major histocompatibility complex) класса 1.

Системы неспецифической резистентности и видового иммунитета способствуют поддержанию структурной и функциональной целостности организма и являются основой для формирования приобретенного (специфического) иммунитета. Стыкуясь на этом, более высоком уровне, системы видового и приобретенного иммунитета образуют единую и наиболее эффективную систему самозащиты организма от всего чужеродного.

Иммунная система

Иммунная система- совокупность органов, тканей и клеток, обеспечивающих клеточно- генетическое постоянство организма. Принципы антигенной (генетической) чистоты основываются на распознавании “своего- чужого” и в значительной степени обусловлены системой генов и гликопротеидов (продуктов их экспрессии)- главным комплексом гистосовместимости (MHC), у человека часто называемой системой HLA (human leucocyte antigens). На лейкоцитах человека четко экспрессированы белки МНС, с помощью исследования лейкоцитов типируют антигены МНС.

Органы иммунной системы.

Выделяют центральные (костный мозг- кроветворный орган, вилочковая железа или тимус, лимфоидная ткань кишечника) и периферические (селезенка, лимфатические узлы, скопления лимфоидной ткани в собственном слое слизистых оболочек кишечного типа) органы иммунитета.

Клетки- предшественники иммунокомпетентных клеток продуцируются костным мозгом. Некоторые потомки стволовых клеток становятся лимфоцитами. Лимфоциты подразделяют на два класса- Т и В. Предшественники Т- лимфоцитов мигрируют в тимус, где созревают в клетки, способные участвовать в иммунном ответе. У человека В- лимфоциты созревают в костном мозге. У птиц незрелые В- клетки мигрируют в сумку (бурсу) Фабрициуса, где достигают зрелости. Зрелые В- и Т- лимфоциты заселяют периферические лимфоузлы. Таким образом, центральные органы иммунной системы осуществляют образование и созревание иммунокомпетентных клеток, периферические органы обеспечивают адекватный иммунный ответ на антигенную стимуляцию- “обработку” антигена, его распознавание и клональную пролиферацию лимфоцитов- антиген- зависимую дифференцировку.

26.Неспец.факторы защиты орг-ма:кожн.,слиз.,лимф.барьеы.Фагоцитоз.Лизоцим: Кожа и слиз.обол.мех-ки преп-т проник-ю ми\о и др.АГ в орг-м.Отторжение верх.слоев эпидермиса,секреты сальн.и потовых желез спос-т их удал-ю с пов-ти кожи и слиз.обол.Кожа пре-т собой не только мех.барьер но и бактерицидными св-ми облад-т,т.к.связ-ны с дейст.молоч.и жир.к-т,разл-х фер.,выд-х потов-м и сальными железами.Мех-ю защиту оказ-т также реснит-й эпит-й,удаляя слизю вместе с попав-ми ми\о.Аннтимикробным дейс-м облад-т укс-я,молоч.,мурав.,и др.к-ты,выд-ми потовыми и сальными железами,НСl и др.фер.Особая роль в антимикробном дейс-и принад-т фер.лизоциму-протеолит.фер.,выд-й Фелингом,получ-й наз-е муроминидаза т.к.расщ-т Кл.ст.бакт-й.,выз-я их гибель и спос-т фагоцитозу.Лизоцим выр-т макрофаги и нейтрофилы.Сод-ся в большом кол-ве во всех секретах,жид.,тк.орг-ма.Сниж-е Ур-ня фер.прив-т к возн-ю инфек-х ит др.восп-х забол-х.Лизоцим явл-ся термостаб.крис.б..Мех-м бактериостат.д.сост-т в гидролизе связей N-ацетилмурамовой к-ты и N-ацелглюкозамином в полисах.цепях пептидогликаного слоя Кл.ст.б.,в рез-те измен-ся ее прониц-ть,сопр-ся диффуз-й Кл.сод-го в орг.ср.Фагоцитоз-пр-с поглощ-я и перев-я АГ в-в,в т.ч.ми\о,Кл-ми мезодер-го проис-я-наз-ми фагоцитами.Мечников разл-л фагоциты:на микрофаги и макрофаги.Микро-и макрофаги обьед-т в 1 с-му-макрофагов,к ней отн-ся ткан-е макрофаги:эпител-е Кл.,звез-е ретикулоэндотел-ты,альвеол-е и перитон.Ма,Кл.Лнгерганса и др.Ф-ии Ма:1)погл-е и уни-е в орг-ме чужер-х суб-й(отмир.кл.,раков.кл.,вируса,ми\о и т.д.)2)вы-т бав-фер.(лизоцим пероксидазу,эстерау)б.комп-та,интерлекины.На пов-ти Ма им-ся рец-ры к АТ и комп-ту и к с-ме мед-в обесп-х их взим-е с Т- и В-л. 3)=>Ма акт-т защит.ф-ииТ-л 40прин-т уч-е в связ-е и распоз-е АТ. Стадии фагоцитоза:1)адсорб-я частиц на пов-ти Ма за счет электростас.сил и хим.сродства ч.к рец-м фагоцита. 2)инвагинация Кл.мемб.,захват ч. И погруж-е в протоплазму 3)образ-е фагосомы,т.к.пузырька в протоплазме вокруг поглощ-й ч-цы. 4)слияние фагосомы с лизосомой фагоцита,сод-й 10-кит фер. И образ-е фаголизосомы.=>перев-езах-й ч-цы фер.,проимс-т расщ-е до неАГ в-в,а если ч-ца чужер-я,то не проис-т перев-я ло неАГ в-в,а перед-ся Ма Т- и В-зв.,т.е.вкл-ся спец-е звено им-та. Фагоцитоз-явл=-ся важн-й защит.р-й.Фагоциты захв-т б.,в.,грибы и инак-тт их по сред-м набора фер. И спос-ти сер-ть Н2О2-наз.завер.фагоцитоз.В нек.случаях захв-е фагоцитом ми\о выживают и разм-ся в нем(напр.гонококи,туб.палочка,ВИЧ)-в таких случая фагоцитоз наз.незавер-й.Фагоцитоз усил-ся АГ-опсонинами т.к.связ-й ими АГ легче адср-ся на пов-тифагоцита=-наз.опсонизацией-т.е.подготовкпа ми\о к захвату фагоцитами.

27.Комп-т.Его роль,стр-ра,ф-ии,пути акт-иии:Комплемент(допол-е)-с-ма белк-х фракций сыв.кр.,облад-й спос-тью выз-ть лизис микробов и др.кл.Откры Борже фран.уч-й.К.сост-т из- 20 разл.по физ-хим.св-м б.сыв.кр.-его обозн-т «С»,послед-й обоз-т цифрамиС1-С10.Каждый комп-т им-т субьед-цу,кт.образ-ся при расщ-ии,обоз-ся мальними лат.буквами,напр.С2а.Б.комп-та явл-ся глобулинами или гликопротеинами.Выр-ся Ма,нейтр-ми,и сост-т 5-10%всех б.сыв.кр.Мех-м дейс-я:К.нах-ся в орг-ме в неакт-м сост-ии,акт-ся в момент обаз-я комп-са АГ-АТ.После акт-и,дейс-е носит каскадный характер и прд-т серию протеолит.р-й,напр-х на усил-е имуных Кл.р-й и акт-ю дейс-я АТ по устран-ю АГ.Сущ-т 2 пути акт-ии К.:1)Клас-й:осущ-ся с уч-м АТ,при этом способе проис-т присоед-е к комп-су АГ-АТ вначале присоед-е компонента С1 комплем-та,затем к образ-му комп-су присоед-ся С4,С2,С3,эти комп-т акт-ся с пом.С5 фер.,причем р-я протек-т уже без уч-я комп-са АГ-АТ.Комп-т С5 прик-т к мемб.кл.,и на нем образ-ся литический комп-с-наз.мембраноатак-м т.к.осущ-т лизис Кл. 2)Альтернат-й путь-проис-т без уч-е АТ и осущ-ся до выр-ке АТ в орг-ме.Альтр-й путь также зак-ся акт-й комп-та С5и образ-и мемб-атак-го комп-са,но без уч-е комп-в С1,С2,С4.Весь пр-с нач-ся с акт-ии С3,кот.м.проис-т непоср-но в рез-те прмого дейс-я АГ.Актив-й К.взаим-т с факторами В и D(фер-ми)с-мы комп-та и б.пропердином.Образ-й комп-с вкл.комп-т С5,на кот.и форм-ся мембраноатак.комп-с.Мех-м дейс-я такого К.на Кл.до конца не выяснен.С-ма К.обесп-т: а)цитолит-е и цитоток-е д.АТ на Кл-мишени,благ-ря мемб-атак.комп-су б)акт-я фагоцитоза в рез.связ-я с иммунными комплексами и адсорбции их рец-ми Ма в)уч-е в индукции иммунного ответа г)уч-е в р-я анафилаксии,т.к.нек фрагменты облад-т биол.акт-тью,они высв-т гистамин изтучных Кл.,выз-т сокр-е глад.муск.,т.к.выз-т анафил-ю р-ю.

28.Интерфероны,природа.Спос-бы пол-я и прим-я:И.-пред-т собой белок,облад-м противовир.,противоопух.,имуномодул-м св-ми,выраб-й многими кл. в ответ на внедрение в.или слож-х биополимеров.И.гетерогенен по своему сост-му.И.вкл-т более 20б.разл.по физ-хим.св-м.Все они обьед-н в 4 гр.по ист-ку проис-я:альфа,бета,гамма,мю.Альфа-И.-выр-т В-л.,его пол-т из лейкоцитов кр.-поэтому наз.лейкоциторным. Бета-И.-пол-т из заражении вир-ми культуры Кл.фибринобластов чел-ка-наз.фибринобластным.Гамма-И.из Т-л,сенсоб-х АГ-наз.имуными.Мю-И.-открыт недавно св-ва мало изучены.И-ны облад-т видовой спец-тью.т.е.И.чел-ка менее эф-н для жив.и наоборот.Мех-м дейс-я:И.не дейс-т вне Кл.Адсорбир-сь на пов-ти Кл.или проник-я внутрь Кл.,он через геном Кл.влияет на пр-сы репродукции в.или пролиф.кл.Поэтому дейс-е И.в осн-м профил-е ,но исп-т и в лечении.И.играет большую роль в 1)поддер-е рез-ти к в.,пояэтому его прим-т для проф-ки и леч-я многих вир-х инф-й(грипп,герпес,вир.гепатит)2)Антипролиф-е дейс-е,особ-ног гамма-И.,ис-ся для леч-я злокач-х опухолей 3)имуномодул-е срод-во-для коррекции работы Им.с-мы,при имунодеф-х.

29.Аг:опрд-е св-ва.АГ б.,грибов,в.:АГ-это любые генетт-ки чужер-е в-ва,кот.попав во внутр.ср.орг-ма,или образ-сь в ог-ме,выз-т ответную спец.мунолог.р-ю,прояв-ся син-м АТ,появ-е сенсоб-х лимф-в или вон-м тлер-ти к этому в-ву.АГ микробов-в-ва,разного проис-я несущие приз-ки генетт.чуже-ти и вызыв-е разл-е им-е р-ии. Св-ва:1)имун-ть- спос-ть индуц-ть ИО в генетт.выр-ки АТ 2)спец-тьопред-ся стр-й эпитопа 3)толер-ть-св-ва АГ индуц-ть арект-ть-это отсут-е им.р-ии на АГ 4)чужер-ть-АГ несут отпечаток работы др.гена 5)макромол-ть-не ниже 5000D. Класс-я: 1)по проис-ю.:экзо-эндогены 2)По природе:бел-к,небел-е 3)По стр-ре:глоб-е,фибрилл-е4)По необх-ти цч-е Т-л в р-ии АГ+АТ:Т-зав.,Т-незав. 5)По имун-ти:полноц-е АГ(выз-й полный иммунный ответ),неполноц-еАГ. 6)По стр-ре чужер-ти:алоАГ-аздл-е АГ внутри 1 вида,ГетероАГ-встреч-е у разл.видов жив.АГ гистосовместимости.При пересадках органов возникает проблема совместимости тканей, связанная со степенью их генетического родства, реакциями отторжения чужеродных аллогенных и ксеногенных трансплантатов, т.е. проблемами трансплантационного иммунитета. Класс-я АГ б.по топографии:1)жгутиковые(Н)-образ-ны б.флагелином,лок-ся в локомот-м апп.кл.,термолаб.,после обраб-ки фенолом АГ св-ва схр-ся. 2)капсульные(К)-расп-ся на пов-ти кл.срт-р,им.у капсулообр.б.,сст.из кислых полисах-в(бацилла сиб.язвы) 3)Сомат-е(О)АГ-связ-е с Кл.ст.б.ЛПС,термолаб.,альдегиды и спирты наруш.АГ стр-ру. 4)Vi-АГвар-т капсульного АГ,образ-ся у возб.брюш.тифа. АГ-вирусов:вирусный АГ м.б.стр-м и нестр-м.Стр-е пред-ны в-ми ,кодируемые н.к. и Кл-ми метаболитами,захват-ми вирионами при почковании.Нестр-е АГ-не входят в сос-в вириона,а образ-ся в инфиц.кл.на разл-х этапах репродукции в.У вирусов выд-т:ядерные,кА-е,суперкап-е АГУ параи ортомиксовир-в им-ся повер-е V-АГ-гемаглют-н и нейроменидаза.

30.Р-я им-та:аггл.,прец.,связ.комп-та,Кумбса.Компонеты,мех-м,спос-бы пост-ки,прим-е:Р-я агглют-ии:Аггл-я-наз.склеивание микробов или др.кл.при возд-и на них спец-х АТ в прис-ии электролита.Р-я аггл-ии быв-т спец.и неспец. 1)Спец.-прим.для диаг-ки многих ифн-х забол-й.Быв-т 2 типов: а)Опред-е вида или типа микроба(р-я груббера) б) обнар-е АТ в сыв.кр.больного(Р-я Видаля).Р-я грубера –став-ся для обнар-я неизв-х АГ с пом.изв-х АТ.Выд-т 2 р-ии груббера: 1)Ориен-я р-я на стекле:стяв-ся когда болезнь м.б.выз-на раз.видами микробов,для облег-я работы ставят проверено ориен-ю р-ю(при лаб.диаг.бюш.тифа,паратифов)на пред.ст.наносят сыв.,развед-ю 1:10 или 1:25,разв-т в физ.р-ре,покач-т ст.в те.2-3мин.,до появ-я агглют-и.Набл-т за появ-м зерен аглютината в кап-х. 2)развер-я р-я Грубера:ставят с 1 сыв.,реагир-й препол-но в ориен-й р-ии.(ставят для окон-йт идентиф-ии и опред.титра)для вып.данной р-ии надо взять аггл.сыв.с указанным титром.Из основного развед-я аггл.сыв.готовят ряд послед-х двукрат-х разв-й сыв-ки до титра,берут ряд проб-к ,в т.ч.и контр-е,во все вносят по 1 мл физ.р-ра,затем в 1 пр.вносят 1 мл осн-го рзв-я аггл.сыв.,после из 1 проб.берут 1 мл сыв.и переел-т во 2-ю и т.д.,и титруем до ого разв-я кот.б.указан на ампулеПосле пригот-я сыв.в каждую прою-ку вносят взвесь микробов,встряхивают,в тер-т на 18-20ч.Р-я счит.+если аггл-я микробов наст-т при разв-ии сыв.от 2\3титра и до ее окон-гог титра.Р-я кастеллани-р-я истощения-для получ.моновал.сыв.-устранить групповую аггл-ю можно,удалив из сыв.АТ в отнош-е АГ,явл-ся общими для гомолог.микрба.Это дост-ся путем смешивания густой взвеси микробов и сыв.,дающих групп.аггл-ю.,что ведет к адсорб-ии на их пов-ти АТ. Р-я Видаля-для диаг.брыш.тифа и всех видо в тифов(для обнар-я любого инф-го забол-я).Исп-т:исслед.сыв.,0,85% р-р NaCl ,АГ-диаг-м.Диаг-м-взвесь в р-ре убитых микробов,сохр-х свою АГ стр-ру.Сначала гот-т осн-е разв-е в зав-ти от титра,затем дел-т серию разв-й путем послед-го преноса из 1 проб.в др.1 мл.В контр-й проб.вносят изотон-й р-р NaCl,затем в каждую проб.вносят микробы,проб.встряхивают и в термостат.Р-я счит.+ если аллг-я выражена не менее 2-мя ++.

Р-я преципитации:для диаг-ки ряда инф.забол-й б.и вирусов:сиб.язвы,чумы,натур.оспы,полимиелита. К р-ии прецип.отн-ся АГ-мелка частица(ДНК,б.,лек-во,яд)при доб-ии АТ проис-т помут-е р-ра,только в зоне эквив-ти.Вып-е нераствор-гог комплекса:АГ-АТ в виде осадка набл-ся при эквив-х соотн-х ингредиента. 1)Р-я кольцопрец-ии-еси на столбик с АТ осторожно наслаив-ть АГ,то на грание обаз-ся кольцо(осторожно насл-ть для попад-я в зону экв-ти)-узкая проб-ка вносит 0,2мл прецмп.сыв-ки,пипеткой медл-но насл-т 0,1мл р-раАГ.Через 2-3 мин.в случае +р-ии на границе между сыв.и исслед.АГ появ-ся преципитат в виде белого кольца. 2)П-я пре-ии в агаре:Чаки залив.агаром,в кот.вырез-т несл.луночект на равном раст.др.от др.В центр вносят сыв.сод-ю АТ,в ост-е –АГ.На месте встречи АГ-АТ –мутные полоски-дуги прец-ии.Позв-т опред-ть токсигенность исслед.б.(напр.дифтер.палочку)с пом.антитоксич.сыв.3)Р-я имунофлюоресценции:к АГ+АТ(меченые флюрохромом)-образ-ся светящийся комп-с-обнар-ся при люмин-й микроскопии.Цель:для почсчета лимф-в,для опред-я формы обьекта,локал-ии на среде тк. и т.д.

Р-я связыв-я компл-та-исп-т компл-т кт.сод-ся в сыв.кр.морс.свинки.Гемолит-я акт-ть комп-та термолаб-на и посл-тью утрачена при прогревании сыв.в теч.30мин.при 56*С.При адсорб-ии комп-та на комп-се АГ-АТ его дейс-е прояв-ся в р-ии лизиса АГ.Для учета рез-в вводят гемолит-ю с-му.Она сост-т из взвеси эр-в барана в изотон.р-ре хлорина натрия и гемолит.сыв.кролика.Полож-я р-я –хар-ся здержкой гемолиза вслед-ии адсорб-ии комп-та с-мо АГ-АТ.отриц.р-я-хар-ся налич-м гемолиза,т.к.своб-й комп-т связ-ся с сис-й эр-ты барана-гемол-я сыв.кролика.РСК облад-т высокой чуст-тью и спец-тью,что позв-т ее исп-ть для серодиаг-ки многих забол-й,а также для выяв-я АГ в кр.боьного.

Р-я Кумбса:

Позв-т обнар-ть неполные АТ,блокир-е или тормозящие аглют.АТ.1)непрямой м.-уст.нал-е несвяз-х АТ в сыв.больного 2)прямой м.-уст-т нал-е в кр.больных АТ,связ-х с эр-митех-к апост-ки:1)опыткая проб-ка: эр-ты больного+антиглоб-я сыв. 2)контрольная:эр-ты+норм-я сыв.+антиглоб.сыв. 3)исслед.сыв.+эр-ты(без резус АГ)+Антиглоб.сыв.

31.Р-я имунофлюоресценции.Имунофер.анализ,имуноблотинг: Имунофлюорес-й анализ-явл-ся экспресс-диаг-й,высокочувс-й.Выд-т 2 метода: 1)Прямой м.-(м.Кунса)- к исслед-й взвеси микробов,фиксир-й на стекле доб-т сыв-ку,меченую флюрохромом(изотиоцианит флуоресцеина),образ-ся комп-с АГ-АТ при освечение УФ дает ярко зел.цв. 2)непрямой м.-исп-т в осн-м диагн-е сыв.против к-л микроба,доб-е этой сыв.к используемой взвеси микробов выз-т образ-е комп-са АГ-АТ.Этот комп-с выяв-ся с пом.универ-й флуоресц-й сыв.,сод-й АТ гамма-глоб-й фракции кр.того вида жив.,от кот.была пол-на диагн-я сыв-ка. Свят-йся комп-с выяв-т при люминесцентом микроскопии.Непрямой м. можно исп-ть для выяв-я АТ в сыв.кр.

Имунофер-й анализ:наиб.широко расп-й имунол-й метод. Выд-т неск.методов:1)Прямой твердофазный ИФА: сыв.инкуб-т с АГ,фикс-м на тв.суб-те,после инкуб-ии АТ несвяз-ся с АГ удал-т многократным промыв-м.Далее вносят меченую фер-м антисыв.к АТ-м,связав-ся с АГ.Оценка рез-та:опред-т кол-во фер-та-маркера,кот.связ-н с АТ. 2)Конкурентный твердофазный ИФА:позв-т непоср-н регист-ть АГ с АТ,а не анал-ть 2-е его измен-я.Метод отл-ся высой чувс-тью-от 70-90% для разл-х возб-й.сущ-т в 2-х вар-х: а)с АТ-позит-й сыв.,т.е.в ней есть спец-е АТ к АГ,фикс-му на пов-ти твер.фазы микропланшетки.Мех-м:спец.тела в исслед-й сыв.связ-т с АГ,фиксир-й на тв.суб-те.Спец-е тела меченные фер-м не взаим-т со свя-ми АГ-сод-е маркера низкое.б)АТ-негативной сыв.(в ней нет спец.АТ к исслед-му АГ).Мех-м: неспецюАТ в исслед.сыв.не связ-т АГ,фиксир-е на тв.суб-те Спец-е АТ,меченые фер-м взам-т со связ-ми АГ-сод-е маркера высокое.

Имуноблоттинг:метод идентификации Аг с пом.соов-х сыв.На практике прим-т для идентиф-ии Аг ВИЧ.Мех-м:сначала электрофорезом в полиакриловом геле выд-т Аг вируса,затем на полосу преципитата наклад-т носитель(нитроцел-ю пленку)и продол-т электрофорез.После чего на пленку наносят сыв.пациента и инкуб-т.После отмывания несвяз-х АТ проводят ИФА-на пленку наносят Антисыв.к Ig чел-ка,меченую фер-м,и хромогенный суб-т,измен-й окраску при взам-ии с фер-м.При нал-ии комп-са АГ-АТ-антисыв-ка к Ig на носителя пов-ся окраш-е пятна.

32.Диагностикумы.Моноклональные АТ.Аглютин-е и адсор-е сыв.: Диаг-м-взвесь в р-ре убитых микробов,сохр-х свою АГ стр-ру.Диагност-е имун-е сыв.широко прим.для опред.вида или типа микроба,выд-го от больного или носителя.Сыв-ки пригот-т путем иммунизации жив.соотв-ми АГ.

Агглют-я сыв-ка:прим-ся для идентиф.микробов,с опред-м морф.,культ-х,б\хсв-в.Агглют-й наз-ся склеивание микроба.Груп-я аггл-я затруд-т опред-е вида микроба и серолог-ю диаг-ку забол-я.Устранить групп-ю аггл-ю можно,удалив из сыв.АТ в отношении АГ явл-ся общими для гомологичного микроба.Это дост-ся постановкой р-ии Кастелани(р-я истощения)Сыв-ки пол-т путем имун-ии жив-х.Для имун-ии жив.м.прим-ть и живые и убитые вакцины.Спец-е адсорбир-е аллгют-е сыв.пол-т путем удаления методом адсорбции неспецюгрупповых АТ из нативных сыв-к.Испол-е адсор-х сыв-к дает возможность опред-я выд-го микроба в пределах вида или типа при пом.р-ии аггл-и на стекле.Для адсорб-ии агглют-х сыв.в кач-ве адсорбента м.прим-ся живые и убитые вакцины.Наил-й адсор-й спос-тью облад-т живые вакцины,сод-е все АГ комп-ты в неизмененном виде.

33.Вакцины.опред-е класс-я.Имунные сыв.:Вакцины-наз-ся имунобиол-е препараты,предназ-е для создания акт.искус-го имун-та.Клас-я: по способам пригот-я: 1)Живые(атенуиров-е)-готовят из вакцин-х штаммов возб-ля со сниж-й вирул-тью.Дост-ва:высокая имуног-ть(макс.напряж-й стойкий имун-т. Нед-ки:трудность получ-я,слож-е усл-я тран-ки,возм-ны забол-я.Прим.: БЦЖ-бацилла кальмета и Генетта-мутант-живая вакцина против туб-за.Живая вакцина Себина,антирабич-я в.-против бешенства,аваксим-в.против вирусного гепатита А, сибиреаз-я живая в.,Ваксигрип-против гриппа 2)Убитая в.(инактив-я)дел-ся на а)корпускул-е-пол-т путем полной инактивации свежевыд-х вырул-х иммунных штаммов возб.за счет термич.обраб-ки.Нед-ки:нал-е в них большого кол-ва АГ,кот.не выз-т формир-я имун-та,перегружают имун-ю с-му. Б)Химич-я в.-пол-т путем извлечения акт-х имуногенных фракций из микробной Кл.:УЗ,к-й и т.д.Достоинства убитых в.:безвредны,нет жестких усл-й хранения. Нед-ки:имун-т менее напр-й,недос-но стойкий,что треб-т ревакцинации. Прим:в.стаф-я(сод-т раст-е АГШ стаф-ка) Хим.в.против гепатита В(сод.повер-й АГ против гепатита В),хим.в.пртив брюш.тифа(сод-т Vi-АГ сальмонеллы тифи) 3)Новые вакцины-а)гено-инженерные-потум клониования детерминант иммуногенности микроба-разр-ны вакцины с АГ ВИЧ . б)синтет-е-пол-т их искус-но:ДНК-вакцины,аллерговакцины-сод-=т набор АГ пыльцы.

Иммунные сыв.-все иммунные сыв.очищают от балластных в-в методом ферментирования и диализа.По особ-м мишени для тАТ сыв.быв-т: 1)антибактер-е(антистреп-е,антистаф-е,антисинегнойные) 2)антиток-е(антиботулич-е,антидиф-е,антигангренозная) 3)антивир-я(аг=нтигриппозная)По ист-ку по-я сыв.быв-т: 1)гомологичные-т.е.пол-е от чел-ка 2)гетерог-е пол-е от жив.(достоин-ва высокий титр АТ)Все чужер-е сыв.вводят по безредкот.к.м.выз-ть аллер-ю)

34.Имунотерапия и имунопроф-ка инфек-х болезней:Имунотерапеия-введ-е с леч.целями имун-х преп-в(напр.АТ,ИФН,цитокины)Имунопроф-ка-введ-е имун-х преп-в с целью предотв-я развития инфх заболев-й(вакцины,сыв.,имуномодул-ры. Известно обльшое кол-во имуномод-в: 1)Эндоген-е-в виде разл-х цитокинов спос-ны коррек-ть имуноадаптогенез и физ-ки вырав-ть гомеостаз орг-мат в целом. 2)Экзоген-е : а)природ-е-микробного происх-я(ЛПС)повыш-т антимикробную рез-ть,акт-ть Ма. Б)Синтет-е-исп-т адаптогены и химиопрепарты с выраж-м имунотропным эф-м-поликлональные активаторы.Гл-й прин-п исп-я имуномод-в-знание мишеней,на кот.они дейс-т: 1)одни преп-ты стим-т с-му фагоцитов,лейкопоэз 2)др-е-Т-кл-е звено имун-та(Ил-2,гамма-интер-н,тимические переп-ты)3)третьи-на В-звено имун-та(миелопид,ИЛ-4,5,6)Эф-ты преп-в: 1)Активное дейс-е-сост-т в индуцир-ии препар-ми иммунных –й.Такими эф-ми облад-т вакцины,изгот-е на основе живот.происх-я 2)Пассивное д.-эф-ты преп-в,предст-т собой эффекторные продукты имунокомпетентных клеток.Такими эф-ми облад-т Ig,цитокины. )Спец.дейс-я-лбесп-е защиту от конкр-го возб-ля(противокоревая вакцина,столб-й анатоксин) 4)Неспец.д.-неизб-го стим-е ф-ии имунокомпетентных Кл.напр.имуномод-ры,биостим-ры .

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ