42. Биохимические методы: классификация, возможности и этапы.

Используется для диагностики ферментопатии

Опр-ся в биологическизх жид-х начальных, побочных, конечных продуктов обмена веществ- кровь, моча, ликвор, пунктаты костного мозга, амниотическая жидкость, пот, волосы, ногти, кал. 

Виды: количественные методы и качественные методы(позволяют обнаружить избыточные концентрации субстратов блокированной ферментной реакции или их производных, накапливающихся при НБО). На первом этапе обследования (экспресс-диагностика) применяются методы массового биохимического скрининга: пробы на ФКУ, гликогенозы, галактоземию. Материал: кровь, моча. На втором этапе (уточняющая диагностика) применяют молекулярно-цитогенетические, молекулярно-биологические методы (количественное определение метаболитов, их кинетики и накопления).

Показания: 1) умственная отсталость2) нарушение ФР 3) плохое зрение 4) судороги, мышечная гипотония; 5) непереносимость отдельных пищевых продуктов и ЛС

Применение:

1.В МГК

2.для установление времени появления заболевания

3.для изучения гетерогенности наследственных молекулярных болезней

4.в научных целях

43.Неонатальный скрининг: цель, этапы, используемые методы

Неонатальный скрининг (скрининг новорожденных) - это массовое обследование всех новорождённых с целью раннего выявления наследственных болезней для проведения их своевременного лечения больных детей с целью предотвращения их инвалидизации.

Выбраны те заболевания, которые отвечают определенным критериям.

Во-первых, и фенилкетонурия, и врожденный гипотироз без своевременного лечения приводят к глубокой инвалидности.

Во-вторых, для предотвращения инвалидизации ребенка вследствие этих болезней имеются эффективные методы лечения.

В-третьих, - частота выше, чем 1 на 10000 новорожденных. И для фенилкетонурии и врожденного гипотироза разработаны точные биохимические методы лабораторной доклинической диагностики, т.е. еще до возникновения внешних, клинических проявлений заболевания.

На первом этапе в роддоме на 3-5-й день взятие крови для исследования. Кровь из пяточки и наносится на специальный бумажный тест-бланк, на котором имеются графы, куда записывается информация о ребенке. Такой тест-бланк с высушенными пятнышками крови пересылается по почте в лабораторию.

Второй этап -лабораторное исследование. Из пятен крови одного и того же тест-бланка проводится обследование ребенка и на фенилкетонурию, и на врожденный гипотироз. Только в первом случае определяется концентрация фенилаланина, а во втором - тиротропного гормона. Если концентрация этих веществ в пределах нормы, то на этом обследование завершается, а информация о нормальных результатах не передается. В случае превышения нормальных показателей, родителям ребенка, высылается письмо с просьбой повторное исследование.

Если повторно обнаружено превышение концентрации фенилаланина или тиреотропного гормона, то это указывает на наличие заболевания.

При ФКУ -на прием к врачу-генетику, где в процессе медико-генетического консультирования уточняется диагноз заболевания и назначается лечение. При врожденном гипотирозе, он чаще не имеет наследственной природы, ребенка к врачу-эндокринологу для уточнения диагноза и назначения соответствующей терапии.

Цель- раннее выявление наиболее распространённых врождённых и наследственных заболеваний, своевременное начало лечения которых позволяет предотвратить развитие тяжёлых проявлений.  I этап – «Сбор образцов». Осуществляется сотрудниками родильных стационаров: у доношенных новорожденных в родильном доме на 4 день жизни, у недоношенных детей на 7 день жизни берется кровь из пятки и в виде капель наносится на специальную фильтровальную бумагу (тест-бланк). Все полученные образцы крови высушиваются и отправляются в лабораторию неонатального скрининга.  II этап. Проводится в условиях специализированной автоматизированной лаборатории оснащенной иммунофлюоресцентными анализаторами.  III-й этап. Осуществляется координаторами скрининга. Заключается в уточнении данных II-го этапа и постановке диагноза, обеспечении лечения и диспансерного наблюдения за больными.  IV-й этап. Консультация ребёнка специалистами: генетиком, неонатологом, диетологом, эндокринологом (в зависимости от выявленной патологии);  V этап. Медико-генетическое консультирование семьи;  методы   Иммунофлуоресцентные - врожденный гипотиреоз, врожденная гипоплазия надпочечников, муковисцидоз и др.   Флуоресцентные (ФКУ, галактоземия и др.)   Тандемная масс-спектрометрия (ТМС) – аминоацидопатии (ФКУ и др.), органические ацидурии, нарушения окисления жирных кислот(MCAD и др.)   Энзимодиагностика ( недостаточность биотинидазы и др.)   Молекулярные методы.