Структура занятия.

1. Теоретическая часть:

1. Повторение теоретического материала по теме «Химия белка».

2. Вводное слово преподавателя.

Для обнаружения белков в моче при болезнях почек, для изучения изменений свойств белков крови при болезнях печени, для удаления белков из растворов реакции осаждения находят широкое применение в медицинской практике. Для осаждения используют органические кислоты – ТХУ, сульфосалициловую, причем последняя осаждает не только белки, но и пептиды, её используют для обнаружения малых количеств белков в биологических жидкостях. Осаждение белков проводят органическими растворителями и алкалоидными реактивами.

2. Указания к занятию:

1. Внимательно изучите инструкцию.

2. Прочитайте и осмыслите ход выполнения лабораторных работ.

3. Соблюдайте меры предосторожности в работе с реактивами.

4. При работе с пипетками используйте резиновые груши с переходником.

3. Практическая часть.

1. Лабораторная работа № 1. Осаждение белков органическими кислотами: трихлоруксусной и сульфосалициловой.

Принцип: ТХУ осаждает только белки и часто используется для отделения белков от аминокислот, пептидов и других низкомолекулярных азотсодержащих соединений. Сульфосалициловая кислота (как самая чувствительная) используется для обнаружения белка в моче, она осаждает и пептиды.

ОПЫТ 1:

6 капель раствора белка + 2 капли 20% раствора сульфосалициловой

кислоты → осадок белка.

ОПЫТ 2:

6 капель раствора белка + 2 капли 10% раствора ТХУ → осадок белка

3.2. Лабораторная работа № 2: Осаждение белков органическими растворителями – этиловым спиртом и ацетоном.

Принцип: Белки не растворяются в спирте, ацетоне и других органических растворителях, так как происходит денатурация белковых молекул.

ОПЫТ 1: ОПЫТ 2:

5 капель раствора белка + 5 капель раствора белка +

+ 20 капель этилового спирта + + 20 капель ацетона + 1 капля

+ 1 капля насыщенного раствора насыщ. р-ра хлористого натрия

хлористого натрия

осадок осадок

3.3. Лабораторная работа № 3: Осаждение белков алкалоидными реактивами.

Принцип: Алкалоидные реактивы – танин, пикриновая кислота и другие, в кислой среде осаждают белки. Протамины и гистоны осаждаются в нейтральной среде.

ОПЫТ 1:

5 капель раствора белка + 2 капли 1% уксусной кислоты + 2 капли

10% раствора танина → осадок серого цвета.

ОПЫТ 2:

5 капель раствора белка + 2 капли раствора пикриновой кислоты →

→ осадок желтого цвета.

4. Зарисовать схемы, отражающие проведение опытов, оформить наблюдение. Сделать выводы.