- •Нингидриновая рекция
- •Хроматографическое разделение аминокислот на бумаге
- •Занятие 2 Физико-химические свойства белков
- •Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть занятия Высаливание белков сыворотки
- •Тепловая денатурация белков
- •Осаждение белков органическими растворителями
- •Осаждение белков органическими кислотами
- •Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Домашнее задание
- •6. Выберите правильный ответ.
- •7.Выберите правильный ответ.
- •8.Выберите правильный ответ.
- •Занятие 3 Белки крови. Методы разделения белков.
- •Вопросы к занятию
- •Практическая работа
- •Домашнее задание
- •Занятие 4 Ферменты. Свойства. Механизм действия.
- •Цель занятия
- •Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть Специфичность действия ферментов
- •Влияние температуры на активность фермента
- •Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Домашнее задание
- •Занятие 5 Коллоквиум по теме: «Белки. Ферменты»
- •Вопросы для самоподготовки
- •Занятие 6 Введение в обмен веществ. Биохимия питания
- •Лабораторная работа n1 Обнаружение аскорбиновой кислоты (проба Фелинга)
- •Количественное определение содержания витамина с – в твердых продуктах
- •Домашнее задание
- •Занятие 7 Минеральные вещества пищи. Региональные патологии, связанные с недостатком микроэлементов в пище и воде
- •Вопросы для самоподготовки
- •Практическая работа Определение кальция в моче трилонометрическим методом
- •Приложение для лечебного и медико-профилактического факультетов
- •Домашнее задание
- •Занятие 8 Сложные белки - хромопротеиды
- •Вопросы для подготовки студентов к занятию
- •Практическая часть
- •Домашнее задание
- •Занятие 9 Обмен хромопротеидов
- •Домашнее задание
- •Занятие 10 Биологическое окисление
- •Вопросы для подготовки к занятию:
- •Домашнее задание
- •Домашнее задание
- •Занятие 11 Свободно-радикальное и микросомальное окисление
- •Вопросы для самоподготовки
- •Приложение для педиатрического факультета
- •Домашнее задание
- •Занятие 12 Сложные белки - нуклеопротеиды
- •Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая работа Определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови и моче по методу Мюллера-Зейферта
- •Приложение для педиатрического факультета
- •Занятие 13 Обмен нуклеопротеидов Виды передачи генетической информации
- •Занятие 14 Обмен белков
- •Практическая часть занятия
- •Занятие 15 внутриклеточный обмен аминокислот
- •Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть Определение активности алт и аст
- •Домашнее задание
- •Источники и пути обезвреживания аммиака в разных тканях
- •Занятие 16 Индивидуальные пути обмена аминокислот
- •Домашнее задание
- •Приложение для педиатрического факультета
- •Ретенция азота у детей различного возраста
- •Занятие 17 Коллоквиум по теме: «Нуклеопротеиды. Обмен нуклеопротеидов Белки. Обмен белков»
Практическая работа Определение кальция в моче трилонометрическим методом
Принцип метода: мурексид образует с ионами Са в щелочной среде комплексное соединение красно-фиолетового цвета. При титровании трилоном Б (более сильный комплексообразователь) этот комплекс разрушается,
что приводит к появлению сине-фиолетовой окраски (мурексид в свободном виде).
Определение кальция в моче
Ход работы: 1 мл мочи + 10 мл бидист. воды + 5 мл 10% NаОН + несколько кристаллов мурексида до красно-фиолетовой окраски. Содержимое колбы титровать 0,01Н раствором трилона Б, постоянно перемешивая раствор до сине-фиолетового окрашивания.
Расчет производим по формуле:
С(Са) = 0,01 х А х Д (ммоль/сут), где
0,01 - концентрация трилона Б
А - количество трилона Б, пошедшего на титрование
Д - суточное количество мочи (1500 мл)
НОРМА: 2,5 -10 ммоль/сут (муж) 2,5 - 6,25 ммоль/сут (жен)
Результат:
Вывод:
Определение общего кальция в сыворотке крови
Ход работы: В две колбы налить по 25 мл 1% NаОН + несколько кристаллов мурексида. 0,002Н трилоном Б оттитровать содержимое обеих колб до сиреневого цвета. В одну колбу + 1 мл центрифугата сыворотки. Цвет
переходит в розовый. Титровать опытную пробу 0,002Н трилоном Б до цвета контрольной пробы.
А х 0,002 х 1000 х 0,2495
С(Са) = --------------------------- (ммоль/л)
0,5
А - количество трилона Б, пошедшего на титрование
0,002 - концентрация трилона Б
1000 - коэффициент пересчета на 1 л.
0,5 - количество сыворотки в 1 мл центрифугата
0,2495 - коэффициент пересчета мг% в ммоль/л
НОРМА: 2,25 - 2,64 ммоль/л
Результат:
Вывод:
ПРИЛОЖЕНИЕ ДЛЯ ПЕДИАТРИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА
Причины гиперкальциемии в детском возрасте:
1.Идиопатическая первичная гиперкальциемия
- наследственно повышенная чувствительность к витамину Д. Один из признаков - раннее закрытие родничка.
2.Приобретенная повышенная чувствительность к витамину Д, возникающая при гипотиреозе или длительной иммобилизации ребенка с лечебной целью.
Неонатальная гипокальциемия (гипопаратиреоз). Через 48 часов после рождения концентрация Са в сыворотке падает 2,04 - 2,77 до 1,42 - 2,42 ммоль/л. Позднее концентрация Са восстанавливается, а содержание фос-
атов стойко повышено. То же наблюдаетсяч при кормлении новорожденных неразведенным коровьим молоком из-за избытка фосфатов.
-
Приложение для лечебного и медико-профилактического факультетов
Химический состав живых клеток более чем на 90% представлен четырьмя элементами – углеродом, водородом, кислородом и азотом. Более 9% веса тела представлено элементами, которые в изобилии находились в воде первичного океана, где зародилась жизнь, это натрий, хлор, фосфор, кальций, магний, калий, сера (макроэлементы). Их суточная потребность составляет более 100 мг. Оставшиеся элементы, суммарная доля которых составляет 1%, чрезвычайно важны для организма. Это т.н. микроэлементы. Расстройства их метаболизма либо повсеместно распространены (например, железодефицитная анемия или кариес), либо крайне тяжелы, например микседема, селензависимая миокардиодистрофия.
К микроэлементам относятся металлические и неметаллические элементарные составляющие организма, содержание каждого из которых не превышает 1 мкг на г веса живой ткани. Некоторые авторы выделяют группу ультрамикроэлементов, которые можно обнаружить в организме лишь в следовых количествах.
Биологическая роль основных четырех элементов изучается в курсе биологической химии, т.к. эти элементы – составные компоненты белков, липидов, углеводов, нуклеиновых кислот.
Биологическа роль макроэлементов: металлы этой группы слабо связываются с отрицательно заряженными лигандами и существуют в виде катионов, относительно легко переносимых через клеточную мембрану. Их клетки используют для создания электрических биопотенциалов и биотоков, а также в качестве «спусковых крючков», опосредующих передачу сигналов.
Роль серы, которой взрослый человек потребляет в сутки не менее 1г, в жизнедеятельности организма выяснена недостаточно. Какие либо специфические расстройства, связанные с ее дефицитом не описаны. Однако сера является структурным компонентом аминокислот метионина и цистеина, а дисульфидные связи имеются практически во всех белках (в т.ч. гормонах, ферментах и т.д.). Сера имеется в структуре многих витаминов (тиамин, биотин, липоевая кислота). Богатейшие источники серы – сыры (263 мг/100г), яйца и мясо (230 мг/100г). Серосодержащие аминокислоты в норме служат источником сульфат – аниона (антитоксическое действие).
-
Натуральная еда содержит, как правило, достаточные и сбалансированные самой природой количества микроэлементов. В течение многих лет медицина сталкивалась только с эндемическими проявлениями их дефицита и дисбаланса. В последнее время частота встречаемости расстройств обмена микроэлементов увеличилась из-за расширения применения в практике полного парентерального питания.
-
В физиологических условиях микроэлементы образуют прочные комплексы с белками организма. В составе этих комплексов они и выполняют свои биологические функции:
-
Входят в состав прогормонов (цинк, гормонов (иод)
-
Осуществляют транспорт веществ (железо)
-
Входят в состав активных центров ферментов (железо, медь).
-
Входят в состав окислительно-восстановительных систем.
С учетом этих аспектов, 15 микроэлементов считаются незаменимыми для человека. В эту группу включаются 5 неметаллов – йод, селен, фтор, кремний, возможно – мышьяк, а также 10 металлов – железо, медь, цинк, кобальт, марганец, никель, хром, ванадий, молибден, олово.
Заболевания, связанные с нарушением метаболизма микроэлементов могут быть вызваны: 1. дефицитом микроэлементов; 2. дисбалансом микроэлементов; 3. токсичностью микроэлементов.
Дефицит микроэлементов может быть как эндогенным, так и экзогенным.
- Экзогенный дефицит может быть эндемическим или вследствие несбалансированного питания.
Примеры: селеновый дефицит в Восточной Финляндии, в китайской провинции Гень-Су, йода – Южный Урал, горные районы.
Железодефицитная анемия при квашиоркоре.
- Эндогенный дефицит может наступать как следствие: нарушения всасывания из ЖКТ, наследственных дефектов белков – транспортеров, наличие в пище компонентов, препятствующих абсорбции микроэлемента, потери микроэлемента с мочой , слущиванием эпителия, кровью и др.
- Дисбаланс в обеспечении микроэлементами состоит в том, что значительное превышение концентрации некоторых микроэлементов над оптимумом ведет к возникновению дефицита других микроэлементов. Это может быть обусловлено конкуренцией между элементами при всасывании и реабсорбции, а также при включении их в белки. Например, избыток цинка и молибдена способствует дефициту меди.
Токсические эффекты микроэлементов разнообразны и зависят от формы, в которой микроэлемент поступает в организм и от количества ядовитого вещества. Отравления могут быть острыми и хроническими.
Механизмы токсичности, при всем разнообразии, включают
-
ингибирование ферментов, путем связывания с аминокислотами их активных центров (свинец блокирует дельта-аминолевулинат синтазу), мышьяк – пируваткиназу
-
повреждения микроэлементами нуклеиновых кислот.
-
Нарушения синтеза белка (тяжелые металлы),
-
Нарушения фосфорилирования (фтор),
-
Нарушения мембранной проницаемости (ртуть).
-
Гаптенная активность некоторых микроэлементов, провоцирующих при попадании в легкие, в эпидермис тяжелые гиперэргические реакции замедленного типа (никелевый и йодный контактный дерматит, бериллиевый аллергический альвеолит и дерматит),
-
Нарушения продукции гормонов (свинец угнетает синтез тиреоидных гормонов, тропных гормонов аденогипофиза, гормонов надпочечников и гонад).
Токсичность микроэлементов, попадающих в тело человека в ультрамикромалых дозах наиболее значимо для здоровья пациентов, неспособных экскретировать их из организма. Алюминий – это металл, который очень распространен в земной коре. Но живые клетки избегают алюминия. При хронической почечной недостаточности алюминий не выводится и накапливается в мозге, костях. Это ведет к инвалидизирующим расстройствам (апатия, потеря памяти, деменция, дезориентирование в пространстве, судороги, миалгия, астения, анемия).
Профессиональные болезни. Токсический энцефалит у производителей свинцовых аккумуляторов. Марганцевый паркинсонизм у сварщиков. Берриллиоз у производителей катодных трубок.
Адресная инкорпорация радиоактивных изотопов. Стронций и цезий задерживаются в костях. Иод – в щитовидной железе.