38. Подсчет количества эритроцитов.

Для подсчета форменных элементов крови, взятую из пальца, разбавляют в специальных смесителях. Для подсчета числа эритроцитов пользуются счетной камерой.

Ход работы:

1.Перед началом работы необходимо разобраться в устройстве сетки счетной камеры. Для этого помещают камеру под микроскопом и сначала на малом, а затем под большим увеличением рассматривают сетку, находят малые квадратики и большие квадраты.

2.В предварительно высушенную чистую коническую пробирку точно отмеривают 4 мл физ.р-ра и осторожно выдувают в нее 0,02 мл капиллярной крови.

3.Выпустив предварительно наружу 1-2 капли, наносят капельку на сетку камеры, предварительно путем притирания плотно закрытую покровным стеклом. На предметное стекло в том месте, где на нем расположена сетка, поместите покровное стекло и тщательно прижмите его большими пальцами рук. До появления ньютоновых колец-окрашенных в цвет радуги полосок. Поместите предметное стекло на столик микроскопа, найдите при малом увеличении сетку. Затем, установив большое увеличение, производите подсчёт.

39. Подсчет количества ретикулоцитов.

40. Определение дегенеративных форм эритроцитов.

41. Дифференцировка клеточных элементов костного мозга.

Особенности строения клеток , выявляемых при окраске и мокроскопии , позволяют отличать их друг от друга. При описании клетки следует обращать внимание на их размер, строение ядра и цитоплазмы, их отношение, характер зернистости.

42. Нормальная миелограмма.

Для клинико-лабораторной диагностики в детской гематологии совершенно необходимо исследование клеточной формулы пунктатов костного мозга.

При оценке пунктата костного мозга, кроме количества подсчитанных клеток, необходимо учитывать и соотношение между молодыми и более зрелыми формами нейтрофилов- так называемый костно-мозговой индекс созревания нейтрофилов. В норме этот индекс меньше единицы и, по Г.А.Алексееву, равен 0,6-0,8. Индекс определяется по следующей формуле:

Промиелоциты+ миелоциты + метамиелоциты

ИСН=

Палочкоядерные+ сегментоядерные

Индекс созревания эритробластов – это соотношение количества гемоглобиносодержащих нормобластов к количеству всех клеток эритробластического ряда:

Полихроматофильные+ оксифильные эритробласты

ИСЭ=

Эритробласты + пронормобласты+ полихроматофильные+ оксифильные эритробласты

В норме этот индекс по Г.А.Алексееву равен 0,8.

Наличие большого количества ретикулоцитов позволяет заподозрить скрытое кровотнчение.

43. Определение количества гемоглобина.

Производится калориметрическими способами. Гематиновый метод Сали основан на образовании р-ра коричневого цвета при взаимодействии гемоглобина с хлористоводородной кислотой. Прибор представлен штативом, в который вставлены 3 пробирки. Две крайние запаяны и содержат р-р гематина; средняя градуирована, нужна для исследования. Прилагается пипетка и стеклянная палочка.

Необходимо: гемометр Сали, пипетка, скарификатор, вата, 0.1% р-р HCI, спирт, эфир, йод, вода. Объект: человек.

Ход работы: В среднюю пробирку гемометра наливают 0,1% р-р HCI до нижней метки. Пипеткой берут 20 мкл крови из пальца, и, обтерев кончик ее ватой, тотчас выдувать кровь на дно пробирки так, чтобы верхний слой кислоты оставался не окрашенным. Не вынимая пипетку, споласкивают ее кислотой. После этого содержимое пробирки перемешивают, ударяя пальцами по дну пробирки, и ставят в штатив на 5-10 минут. Это время необходимо для полного превращения гемоглобина в солянокислый гематин. Затем к содержимому пробирки добавляют по каплям воду до тех пор, пока цвет полученного р-ра не будет совершенно одинаков с цветом стандарта боковых пробирок.

Цифра, стоящая на уровне полученного р-ра, показывает содержание гемоглобина в исследуемой крови.