Количественное определение

Для количественного определения в душице обыкновенной используют прибор, изображенный на рис.

Рисунок 2: Прибор для определения эфирного масла [11]

Прибор для определения эфирного масла состоит из круглодонной колбы а вместимостью 1000 мл, паропроводной изогнутой трубки б, холодильника в, градуированной трубки приемника г, оканчивающейся внизу спускным краном д и сливной трубкой е. В верхней части приемника имеется расширение ж с боковой трубкой з, которая служит для внесения растворителя эфирного масла в дистиллят и сообщения внутренней части прибора с атмосферой. Колба и паропроводная трубка соединяются через нормальный шлиф. Градуированная трубка имеет цену деления 0,02 мл. Для заполнения прибора водой используется резиновая трубка "и" с внутренним диаметром 4,5-5 мм, длиной 450 мм и воронка к диаметром 30-40 мм.

Перед каждым определением через прибор пропускают пар в течение 15-20 мин. После 6-8 определений прибор необходимо промыть последовательно ацетоном и водой.

Навеску 25,0 г измельченного сырья помещают в колбу, приливают 400 мл воды, колбу соединяют с паропроводной трубкой и заполняют водой градуированную и сливную трубки через кран при помощи резиновой трубки, оканчивающейся воронкой. Колбу с содержимым нагревают и кипятят с интенсивностью, при которой скорость стекания дистиллята составляет 60-65 капель в 1 мин в течение времени, указанного в соответствующей нормативно - технической документации на лекарственное растительное сырье. Время перегонки 2 часа.

Через 5 мин после окончания перегонки открывают кран, постепенно спуская дистиллят так, чтобы эфирное масло заняло градуированную часть трубки приемника, и еще через 5 мин замеряют объем эфирного масла.

Содержание эфирного масла в объемно-весовых процентах (Х) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляли по формуле:

V х 100 х 100

Х = -------------;

m(100 - W)

где V - объем эфирного масла в миллилитрах; m - масса сырья в граммах; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах. [11]

Физико-химические методы определения терпенового соединения.

1. Тонкослойная хроматография

С целью определения подлинности травы душицы обыкновенной разработана методика ТСХ-анализа данных видов растений. В качестве экстрагента использовали спирт этиловый 70% и воду очищенную. В водном и водно-спиртом извлечениях обнаружили тимол (под действием реактива пятно окрашивается в ярко-оранжевый цвет). Для идентификации тимола в водно-спиртовое извлечение (около 5 мл) добавляли 1 мл хлороформа, что позволило сконцентрировать анализируемое вещество. Наиболее чёткое разделение удаётся достичь при системе растворителей хлороформ-этанол в соотношении 6:1. Для идентификации тимола в качестве свидетеля был использован 0,5% раствор РСО тимол. При облучении УФ-светом(254нм) указанное соединение обнаруживается в виде фиолетовых пятен на светлом флуоресцирующем фоне. [12]

• 2. Газовая хроматография.

Исследуемый раствор: фильтруют эфирное масло, полученное для анализа эфирного масла, в небольшом количестве, добавляют безводного сульфата натрия и доводят до 5,0 мл смесью гексана ополаскивают аппарат.

Эталонный раствор: растворяют 0,20 г тимола и 50 мг карвакрола в гексане и разбавляют до 5,0 мл тем же растворителем.

Колонка:

- материал: плавленный кварц;

- размер: L = 60 м, Ø = 0,25 мм;

-неподвижная фаза: макрогол 20 000 R (толщина пленки 0,25 мкм).

Переносчик: газообразный азот для хроматографии или гелий для хроматографии.

Поток: 15 мл / мин.

Разделение: 1:100

Температура:

Детектирование пламенно-ионизационное.

Порядок элюирования: в порядке, указанном в составе контрольного раствора; записать время задерживания этих веществ.

Используя времена задержания, определенные по хроматограмме, определяют местонахождение компонентов контрольного раствора на хроматограмме. [13]