- •Биологическая химия для бакалавров направления «Биология»
- •Введение
- •1. Цели и задачи дисциплины
- •2. Объем дисциплины и виды учебной работы
- •3. Формы и содержание текущего и итогового контроля
- •Система рейтинговой оценки
- •Система итоговой оценки знаний
- •4. Рекомендуемая литература
- •Организация работы студента
- •II. Работа с веществами и растворами
- •III. Обращение с нагревательными приборами
- •Занятие № 1. «Введение в курс»
- •Экспериментальная работа.
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 3. «Физико-химические свойства углеводов»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 4. «Физико-химические свойства липидов»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 5. «Строение и физико-химические свойства аминокислот и белков»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 6. «Ферменты»
- •Вопросы к контрольной работе:
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 7. «Ферментативный катализ»
- •Экспериментальная работа. Опыт 1. Определение активности амилазы (диастазы) мочи по Вольгемуту.
- •Практическое задание
- •Занятие № 8. «Роль витаминов в метаболизме»
- •Вопросы к контрольной работе:
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 9. «Гормональная регуляция обмена веществ»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 10. Коллоквиум I: «Уровни организации биогенных соединений. Ферменты. Витамины. Гормоны»
- •Занятие № 11. «Обмен веществ и энергии»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 12. «Цикл трикарбоновых кислот»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 13. «Обмен углеводов (часть 1)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 14. «Обмен углеводов (часть 2)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 15. «Обмен липидов (часть1)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 16. «Обмен липидов (часть 2)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 17. «Биологические свойства клеточных мембран»
- •Экспериментальная работа.
- •X - содержание холестерина в калибровочном растворе, ммоль/л
- •Занятие № 18. Коллоквиум I I: «Обмен веществ и энергии»
- •Занятие № 19. «Белковый обмен (часть 1)»
- •Экспериментальная работа.
- •Расчетные методы определения биологической ценности белка.
- •Содержание незаменимых (для человека) аминокислот в некоторых видах продуктов, г на 100 г белка
- •Занятие № 20. «Белковый обмен (часть 2)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 21. «Биохимическая детоксикация»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 22. «Обмен нуклеиновых кислот и молекулярные механизмы синтеза белка»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 26. Коллоквиум III: «Азотистый обмен и биохимические механизмы синтеза белка».
- •Физиологические показатели обмена веществ у домашних и сельскохозяйственных животных.
- •Вопросы итоговой аттестации
- •Биологическая химия
Занятие № 6. «Ферменты»
Цель занятия: Сформировать знания о природе, свойствах и механизмах действия ферментов.
Вопросы к контрольной работе:
Ферменты: классификация и номенклатура.
Строение ферментов: апофермент, кофермент, каталитический центр, аллостерический центр и их биохимическое значение.
Отличие ферментов от неорганических катализаторов: термолабильность, влияние рН на активность, специфичность. Особенности ферментного катализа. Чем объяснить, что в качестве биологических катализаторов природой избраны именно белки?
Какие вещества относят к числу коферментов? Классификация коферментов. Механизм действия коферментов. Чем отличается кофермент от простетической группы?
Активность ферментов. Активаторы и ингибиторы ферментов. Механизм их действия. Типы ингибирования ферментов.
Способы регулирования скоростей ферментативных реакций и направленности биохимических процессов. Понятие о проферментах, изоферментах, мультиферментных комплексах и их роли в метаболизме.
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Экспериментальная работа.
Опыт 1. Термолабильность ферментов.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Водяная баня.
4. Химический стаканчик, 50 мл.
5. Газовая горелка.
6. Держатель для пробирок.
7. Маркер для пробирок.
Реактивы. 1. Дистиллированная вода.
2. Крахмал, 1%-ный раствор.
3. Реактив Люголя.
4. Раствор амилазы.
Пронумеруйте три пробирки и налейте в них по 1 мл раствора слюны (амилаза).
Для получения раствора слюны предварительно ополосните рот дистиллированной водой. Затем наберите в рот приблизительно 20-25 мл дистиллированной воды. В течение 10-15 сек. тщательно полощите рот. Полученный раствор амилазы соберите в стаканчик и используйте для дальнейших опытов.
Слюну в пробирке №1 прокипятите в течение 2-х минут в кипящей водяной бане.
Затем во все пробирки добавьте по 1 мл 1%-ного раствора крахмала.
Пробирки №1 и 2 поставьте в водяную баню (37°С) на 10 минут.
Пробирку №3 погрузите на 10 минут в лед.
По истечении указанного времени во все пробирки добавьте по 1 капле реактива Люголя или раствора йода. Результаты опыта занесите в таблицу:
№ проб. |
Субстрат |
Фермент |
Условия инкубации |
Окраска с йодом |
1 |
|
|
|
|
2 |
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
Объясните результаты эксперимента.
Опыт 2. Влияние рН среды на активность фермента.
Приборы: 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Водяная баня.
4. Маркер для пробирок.
Реактивы: 1. Буферные растворы (рН 4,0; 7,0; 9,0).
2. Раствор амилазы.
3. Крахмал, 1%-ный раствор.
4. Реактив Люголя.
Пронумеруйте три пробирки.
Налейте в каждую пробирку по 1 мл буферных растворов с различным значением рН (4,0; 7,0; 9,0).
Во все пробирки добавьте по 1 мл раствора амилазы и по 1 мл 1%-ного раствора крахмала, инкубируйте в водяной бане (37°С) 10 мин.
Затем в каждую пробирку добавьте по 1 капле реактива Люголя или раствора йода. Результаты наблюдений занесите в таблицу:
№ проб. |
Субстрат |
Фермент |
рН среды |
Условия инкубации |
Окраска с йодом |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Объясните полученные результаты и сделайте вывод относительно оптимума рН амилазы.
Опыт 3. Специфичность ферментов.
Приборы: 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Водяная баня.
4. Маркер для пробирок.
5. Газовая горелка.
6. Держатель для пробирок.
Реактивы: 1. Крахмал, 1%-ный раствор.
2. Сахароза, 1%-ный раствор.
3. Сахараза, 1%-ный раствор.
4. Реактив Люголя.
5. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор.
6. Сульфат меди, 2%-ный раствор.
Пронумеруйте 4 пробирки.
В 1-ю и 2-ю пробирки налейте по 1 мл раствора крахмала, в 3-ю и 4-ю пробирки – по 1 мл 1%-ного раствора сахарозы.
В 1-ю и 3-ю пробирки добавьте по 1 мл раствора слюны, во 2-ю и 4-ю пробирки – по 1 мл раствора сахаразы.
Содержимое пробирок инкубируйте 10 минут в водяной бане при 37° С.
Затем в 1-ю и 2-ю пробирки добавьте по 1 капле реактива Люголя или раствора йода.
C 3-ей и 4-ой пробиркой проведите реакцию Троммера, для чего в каждую из двух пробирок добавьте 0,5 мл 10%-ного раствор гидроксида натрия и 2 капли 2%-ного раствора сульфата меди. Нагрейте пробирки до кипения в кипящей водяной бане.
Наблюдения запишите в таблицу:
№ проб. |
Субстрат |
Фермент |
Условия инкубации |
Окраска с йодом |
Окраска с реакцией Троммера |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Объясните полученные результаты и сделайте вывод относительно специфичности изученных ферментов. Какие виды специфичности вы знаете?
Опыт 4. Изучение влияния активаторов и ингибиторов на активность ферментов.
Приборы: 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Водяная баня.
4. Маркер для пробирок.
Реактивы: 1. Крахмал, 1%-ный раствор.
2. Дистиллированная вода.
3. Реактив Люголя.
4. Хлорид натрия, 1%-ный раствор.
5. Сульфат меди, 1%-ный раствор.
Пронумеруйте три пробирки.
В 1-ю пробирку налейте 1 мл воды, во 2-ю – 1 мл 1%-ного раствора хлористого натрия, в 3-ю – 1 мл 1%-ного раствора сульфата меди.
Во все пробирки налейте по 1 мл 1%-ного раствора крахмала и по 1 мл раствора слюны.
Содержимое пробирок инкубируйте 10 минут в водяной бане при 37оС.
Затем во все пробирки добавьте по 1 капле реактива Люголя или раствора йода. Наблюдения занесите в таблицу:
№ проб. |
Субстрат |
Фермент |
Добавленное вещество |
Условия инкубации |
Окраска с йодом |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Сделайте вывод о влиянии изученных веществ на активность амилазы.
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________