- •1. Введение
- •1. Допастеровская эра (до 1865 г.).
- •2. Послепастеровская эра (1866 – 1940 гг.).
- •3. Эра антибиотиков (1941-1960 гг.).
- •4. Эра управляемого биосинтеза (1961 – 1975 гг.).
- •5. Эра новой биотехнологии (после 1975 г.).
- •Вопросы для самоконтроля
- •2. Живая клетка – основа биологических систем
- •Эндоплазматический ретикулум (эр)
- •Аппарат Гольджи
- •Цитоплазматический матрикс
- •Клеточные органеллы
- •Хлоропласты
- •Клеточная стенка
- •3. Общая характеристика организмов – объектов биотехнологии
- •Эукариоты. Водоросли
- •Принципы подбора биотехнологических объектов
- •Вопросы для самоконтроля
- •4. Основы генетики микроорганизмов
- •Репликация
- •Синтез белка
- •Регуляция генной активности
- •Изменчивость
- •Генетическая рекомбинация
- •Плазмиды
- •Вопросы для самоконтроля
- •5. Метаболизм и принципы его регуляции
- •Анаболизм и катаболизм
- •Углеводы как источник энергии
- •Анаэробное дыхание
- •Брожение
- •Молочнокислое брожение
- •Спиртовое брожение
- •Маслянокислое брожение
- •Аминокислоты как источник энергии
- •Липиды как источники энергии
- •Двууглеродные соединения как источники энергии
- •Рост микроорганизмов на углеводных средах, спиртах, органических кислотах, углеводородах, с1-соединениях
- •Вопросы для самоконтроля
- •6. Ассимиляция у автотрофных и гетеротрофных организмов
- •Биосинтез углеводов
- •Поглощение света и возбуждение пигментов.
- •Биосинтез нуклеиновых кислот
- •Синтез пуриновых нуклеотидов:
- •Регуляция метаболизма
- •Первичные метаболиты
- •Производство аминокислот.
- •Производство органических кислот.
- •Производство спиртов.
- •Производство витаминов.
- •Вторичные метаболиты
- •Антибиотики.
- •Вопросы для самоконтроля
- •7. Питание микроорганизмов
- •Механизм поступления веществ в клетку
- •1) Пассивная диффузия.
- •4) Перенос (транслокация) групп.
- •1.Фотолитотрофия.
- •2. Фотоорганотрофия.
- •3. Хемолитотрофия.
- •4. Хемоорганотрофия.
- •Потребности микроорганизмов в дополнительных питательных веществах
- •Минеральные элементы.
- •Ростовые вещества.
- •Вопросы для самоконтроля
- •8. Рост, размножение и культивирование микроорганизмов
- •Рост бактериальной клетки
- •Размножение бактерий
- •Размножение бактериальной популяции
- •Непрерывные культуры
- •Синхронные культуры
- •Вопросы для самоконтроля
- •9. Подготовка биологических объектов для биотехнологического процесса
- •Гибридизация микроорганизмов
- •1. Получение генов.
- •2. Введение гена в вектор.
- •3. Перенос генов в клетки организма-реципиента.
- •4. Идентификация клеток-реципиентов, которые приобрели желаемый ген (гены).
- •Генетическая инженерия и конструирование новых организмов
- •Улучшение продуцентов, используемых в производстве, методами генетической инженерии
- •Клеточная инженерия
- •Получение гибридных клеток
- •Возможности клеточной инженерии
- •Культуры тканей и клеток высших растений
- •Культуры клеток животных и человека
- •Трансплантация эмбрионов
- •Гибридомная технология
- •Вопросы для самоконтроля
- •10. Культивирование биологических объектов
- •Принципы действия и конструкции биореакторов
- •Системы перемешивания и аэрации
- •1. Аппараты с механическим перемешиванием.
- •2. Аппараты с пневматическим перемешиванием.
- •3. Аппараты с циркуляционным перемешиванием.
- •Лабораторные, пилотные и промышленные биореакторы: проблемы масштабирования
- •Биотехнологические процессы и аппараты периодического и непрерывного действия
- •Периодические процессы.
- •Специализированные типы биотехнологических процессов и аппаратов Анаэробные процессы.
- •Твердофазные и газофазные процессы.
- •Поверхностные процессы.
- •Вопросы для самоконтроля
- •11. Словарь терминов
- •12.Список использованной литературы
Вопросы для самоконтроля
1. Фотосинтез: характеристика светового и темнового процессов.
2. Составьте схему синтеза пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов.
3. Охарактеризуйте основные стадии биосинтеза белка.
4. Перечислите основные механизмы регуляции метаболизма.
5. Что такое оперон? Каким образом осуществляется механизм регуляции синтеза ферментов?
6. Дайте общую характеристику первичным метаболитам.
7. Дайте общую характеристику вторичным метаболитам.
8. Антибиотики: общая характеристика, классификация, значение.
7. Питание микроорганизмов
Питание является неотъемлемой функцией каждого живого организма. В процессе питания организм получает вещества, необходимые для синтеза клеточных структур, а также служащие источником энергии для всех процессов жизнедеятельности.
Ферментное оснащение микроорганизмов
Питание микроорганизмов как физиолого-биохимический процесс осуществляется благодаря наличию в клетке различных ферментов, катализирующих все жизненно необходимые реакции. В соответствии с катализируемыми реакциями все ферменты разделяются на шесть классов: оксидоредуктазы (окислительно-восстановительные ферменты), трансферазы (транспортируют отдельные радикалы и атомы от одних соединений к другим), гидролазы (ускоряют реакции гидролиза), лиазы (отщепляют от субстрата химические группы негидролитическим путем), изомеразы (превращают органические соединения в их изомеры), лигазы (ускоряют синтез сложных соединений из более простых). В микробной клетке ферменты энергетического обмена и транспорта питательных веществ локализованы в цитоплазматической мембране и ее производных, ферменты белкового синтеза связаны с рибосомами. Многие ферменты не связаны с отдельными структурами клетки, а находятся в цитоплазме в растворенном виде.
Ферменты бактерий подразделяются на эндо- и экзоферменты. Эндоферменты функционируют только внутри клетки и катализируют реакции биосинтеза и энергетического обмена. Экзоферменты выделяются клеткой в окружающую среду, расщепляя макромолекулы питательных субстратов до простых соединений, усваиваемых клеткой в качестве источников энергии, углерода и др. К ним относятся гидролитические ферменты, играющие важную роль в питании микроорганизмов.
В зависимости от условий образования ферментов их разделяют на конститутивные и индуцибельные. Большинство гидролитических ферментов являются индуцибельными (подробнее см. «Регуляция метаболизма»).
Физиология питания
Основную часть микробной клетки составляет вода – 80-90% общей массы.
В состав клеток микроорганизмов входят следующие элементы:
Элемент |
% массы сухого вещества |
Углерод |
50 |
Кислород |
20 |
Азот |
14 |
Водород |
8 |
Фосфор |
3 |
Сера |
1 |
Калий |
1 |
Натрий |
1 |
Кальций |
0,5 |
Магний |
0,5 |
Хлор |
0,5 |
Железо |
0,2 |
другие элементы |
0,3 |
Углерод имеет наибольшее значение для питания микроорганизмов. Потребности различных микроорганизмов в источниках углерода разнообразны. Фотосинтезирующие организмы потребляют наиболее окисленную форму углерода – СО2. Другие организмы получают углерод главным образом из органических веществ. При этом питательная ценность органических источников углерода зависит от строения их молекул, и связана с легкостью их перехода в углеводы или близкие к ним соединения, которые затем превращаются в вещества с тремя атомами углерода (пируват). Высокой питательной ценностью обладают вещества, содержащие спиртовые группы (-СНОН, -СН2ОН, -СОН).
Азот служит материалом для образования аминных (NH2 ) и иминных (NH) групп в молекулах аминокислот, пуринов и пиримидинов, нуклеиновых кислот и других веществ клетки. Самый доступный источник азота для многих микроорганизмов – ионы аммония (NH4+) и аммиак (NH3). Большинство микроорганизмов способны использовать минеральные и органические соединения азота.
Сера, как и азот, является необходимым компонентом клеточного материала всех организмов, в которых она встречается главным образом в восстановленной форме (сульфидная группа). Большинство микроорганизмов может использовать сульфаты как питательное вещество, однако существуют бактерии, нуждающиеся для биосинтеза в источниках восстановленной серы.
Основные органические соединения, характерные для микроорганизмов всех типов, синтезируются клетками из веществ той среды, где развивается микроб.
Вещества, необходимые для жизнедеятельности микроорганизмов и поступающие из окружающей среды, называются питательными, а среды, содержащие их – питательные среды.
Состав питательных сред определяется пищевыми потребностями микроорганизмов. Конструктивные и энергетические процессы у микроорганизмов очень разнообразны, поэтому также разнообразны их потребности в питательных веществах. Из этого следует, что универсальных сред, одинаково пригодных для роста всех без исключения микроорганизмов, нет.
Основными компонентами любой питательной среды для культивирования микроорганизмов являются соединения углерода и азота. Именно эти соединения определяют специфичность подавляющего большинства питательных сред.
Для каждого вида или группы близких видов микроорганизмов необходима своя среда. Среды, предназначенные для развития одного вида или группы микроорганизмов, называют элективными. Элективные среды обычно применяют на первом этапе выделения микроорганизмов из естественных субстратов (например, среда Эшби для Azotobacter). Дифференциально-диагностические среды дают возможность быстро отличить одни виды микроорганизмов от других или выявить некоторые их особенности (например, агаризованная среда Эндо для бактерий рода Escherichia).
По составу среды для культивирования микроорганизмов делят на натуральные (естественные) и синтетические. К натуральным относятся среды, состоящие из продуктов животного или растительного происхождения. Это могут быть клетки и ткани или экстракты из них. На таких средах хорошо развиваются многие микроорганизмы, т.к. в них содержатся в основном все необходимые компоненты. Синтетические среды представляют собой комплекс определенных химически чистых соединений, взятых в точно указанных концентрациях. Состав этих сред, в отличие от естественных, всегда известен. Выделяют группу полусинтетических сред, которые состоят из природных продуктов в комбинации с рядом определенных химических соединений.
Особенности питания микроорганизмов заключаются в следующем:
- питательные вещества поступают в клетку через всю ее поверхность, специальных органов питания нет;
- высокая скорость процессов метаболизма (например, бактериальная клетка за сутки потребляет питательных веществ в 20 раз больше веса своего тела);
- быстрая адаптация к меняющимся условиям окружающей среды.