15. Влияние физических факторов на микроорганизмы.

1. Ультразвук. Под его действием в цитоплазме бактерий образуются кави-тационные полости, заполненные парами жидкости под высоким давлением до 10 ООО атм. Это приводит к разрушению цитоплазматических структур клетки. Практическое применение: для получения эндотоксинов, некоторых антигенов, для стерилизации пищевых продуктов и обеззараживания воды.

2. Ультрафиолетовый свет - повреждает ДНК микробной клетки. Действие УФ-света на бактерии было доказано опытом Бухнера, который заключается в следующем: в чашку Петри с МПА делают посев культуры микроорганизмов, например, S.typhi «сплошным газоном». На посев накладывают черную бумагу с вырезанными буквами, составляющими какое-либо слово, например, «typhus» и подвергают его действию прямых солнечных лучей в течение 1-1,5 часов. После этого черную бумагу снимают и ставят чашку на сутки в термостат при 37°С. На следующий день рост культуры микробов наблюдается только на тех участках среды, которые были защищены от действия УФ-лучей.

Практическое применение УФ-света: стерилизация воздуха в операционных, ро­дильных залах, палатах новорожденных, в боксах бактериологических лабораторий и др.

3. Низкая температура. Под ее действием в цитоплазме клеток образуются кристаллы воды и солей, разрушающие структуру клетки. Практическое приме­нение: для получения эндотоксинов путем многократного замораживания и оттаивания бактериальных культур, что приводит к разрушению клеток.

4. Высокая температура - вызывает денатурацию белков и инактивацию ферментов микроорганизмов. Практическое применение: для стерилизации.

18. Влияние химических факюровнамикроорганизмы. Дезинфекция.

Дезинфекция (обеззараживание) - уничтожение патогенных микроорганизмов во внешней среде (с помощью химических веществ).Целью дезинфекции является предупреждение передачи возбудителей от инфицированного организма через объекты внешней среды. Дезинфекция отли­чается от стерилизации по конечному результату.

19. Методы стерилизации, аппаратура.

Стерилизация или обеспложивание (sterilis - бесплодный) - полное унич­тожение микроорганизмов и их спор в различных объектах (питательные среды, посуда, перевязочный материал, хирургические инструменты и др.).

Методы стерилизации.

I. Физические

1). Прокаливание в пламени спиртовки. Этот способ имеет ограни­ченное применение, в частности, для стерилизации бактериологических петель.

2). Сухим жаром в печи Пастора (воздушный стерилизатор). Режим сте­рилизации: 180°С, 1 час. Стерилизуют стеклянную посуду (чашки Петри, пипет­ки, пробирки), хирургические инструменты.

3). Паром под давлением в автоклаве (паровой стерилизатор):

а) стерилизация неспороносного материала. Режим - 1,5 атм. (127°С), 30 мин. Используют для стерилизации простых питательных сред (МПА, МПБ), бактериологической посуды и уничтожения отработанных культур неспороносных бактерий;

б) стерилизация спороносного материала. Режим - 2 атм, (133°С), 20 мин. Используют для уничтожения культур спороносных бактерий, а также стери- лизации постельного белья, вещей, посуды от больных газовой гангреной, сибирской язвой,столбняком;

в) стерилизация изделий из резины (катетеры, зонды). Режим - I атм. (121°С), 45 мин.

Способ автоклавирования основан на том, что образующийся при кипении воды пар не выходит наружу, а, скапливаясь в замкнутом пространстве, повыша­ет давление. Соответственно давлению увеличивается и температура кипения воды. В результате образуются молекулы «острого» пара с высокой кинетиче­ской энергией, а следовательно, и с большей проникающей способностью, кото­рые повреждают бактерии и их споры.

Методы контроля стерилизации:

1. химический - использование веществ в запаянных ампулах (сера, бен­зойная кислота с красителем), имеющих температуру плавления не ниже 120° С. Этот тест используют для контроля режима стерилизации при 1-1,5 атм.

2. биологический - проверка на жизнеспособность культуры спороносных бактерий после автоклавирования при режиме 2 атм. В качестве тест-культур используют: B.mesentericus (картофельная палочка) и B.subtilis (сенная палочка).

4). Дробная стерилизация:

а) текучим паром в автоклаве с открытым выпускным краном. Этот вид сте- рилизации основан на разрушении вегетативных клеток микроорганизмов под действием пара - применяют в тех случаях, когда стерилизуемый материал не выдерживает высокой температуры (120-127°С), например, питательные среды с молоком, желчью, углеводами и др. Режим стерилизации - 100°С, ЗОмин., 3 дня подряд. Механизм: в 1-й день погибают вегетативные формы, а споры остаются; на 2-ой день часть спор прорастает в вегетативные клетки и погибает при стерилизации; к 3-му дню прорастает остальная часть спор и также погибает при 100°С.

б) тиндализация. Стерилизация материала при 56-58°С по 1 часу в течение 5-6 дней подряд. Применяют для стерилизации питательных сред, содержащих сыворотку крови, витамины, которые легко разрушаются при более высокой температуре.

5). Пастеризация (частичная стерилизация) - уничтожение только вегета­тивных форм болезнетворных бактерий, но не бактериальных спор. Режим -80°С, Юмин. Обычно пастеризуют пищевые продукты (молоко, соки, вино, пиво и .др.).

6). Стерилизация УФ-облучением. Применяют для стерилизации воздуха в микробиологических лабораториях, боксах, операционных, процедурных ка­бинетах и др. Ее проводят бактерицидными лампами различной мощности (БУВ-15,БУВ-30идр.)

II. Механический метод стерилизации (фильтрование) основан на меха­нической задержке микроорганизмов и их спор мелкопористыми фильтрами с определенным диаметром пор. В микробиологической промышленности и в ла­бораторной практике широко применяется фильтрация материала через асбестовые и нитроцеллюлозные фильтры.