- •Медицинская микробиология, её задачи, связь с другими медицинскими дисциплинами.
- •Вопросы врачебной этики и деонтологии в медицинской микробиологии.
- •Размеры и основные формы бактерий.
- •Окраска по Граму. Механизм окраски. Примеры грамположительных и грамотрицательных бактерий.
- •Окраска по Цилю-Нильсену. Применение, механизм окраски.
- •Строение бактериальной клетки.
- •Спорообразование у бактерий и его значение.
- •Химический состав бактериальной клетки, его особенности.
- •Питание бактерий. Механизмы, типы питания.
- •Классификация питательных сред по назначению.
- •Классификация бактерий по типу дыхания.
- •Способы создания условий для культивирования анаэробных микроорганизмов.
- •Рост и размножение бактерий. Характеристика роста бактериальной популяции на плотных и жидких питательных средах.
- •Влияние физических факторов на микроорганизмы.
- •Влияние химических факюровнамикроорганизмы. Дезинфекция.
- •Методы стерилизации, аппаратура.
- •Методы и критерии оценки чистоты воздуха в медицинских учреждениях.
- •Нормальная микрофлора желудочно-кишечного тракта организма человека.
- •Микрофлора женской половой сферы, ее возрастная динамика, особенности у девочек. Значение микрофлоры женской половой сферы для становления микрофлоры новорожденного.
- •Открытие вирусов. Критерии царства вирусов. Строение и химический состав вирионов.
- •Типы вирусной инфекции на уровне клетки. Фазы взаимодействия вируса с клеткой при продуктивной инфекции.
- •Интегративная вирусная инфекция. Онкогенные вирусы, классификация, вызываемые заболевания. Вирусо-генетическая теория онкогенеза ла.Зильбера.
- •Методы индикации и идентификации вирусов.
- •Вирусы бактерий (бактериофаги). Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги.
- •Организация генетического материала бактериальной клетки. Факторы вне-хромосомной наследственности (плазмиды, инсерционные элементы, транспо-зоны).
- •Виды генетической изменчивости. Мутации и генетические рекомбинации.
- •Трансформация у бактерий.
- •Трансдукция и фаговая (лизогенная) конверсия.
- •Конъюгация у бактерий.
- •Ненаследственная изменчивость (модификации). Диссоциация бактерий.
- •Практическое значение генетики и изменчивости микроорганизмов. Использование генной инженерии в медицине.
- •Антибиотики. Механизмы антимикробного действия. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
-
Окраска по Граму. Механизм окраски. Примеры грамположительных и грамотрицательных бактерий.
Окраска по Граму (в модификации Синева):
а) на фиксированный мазок накладывают фильтровальную бумагу, пропитанную генциан-фиолетовым, смачивают водой, окрашивают 2 минуты;
б) снимают бумагу и наносят на мазок раствор Люголя на 1 минуту, затем краситель сливают;
в) обесцвечивают мазок 96° спиртом 10-15 секунд (до исчезновения сине- фиолетовых струек);
г) промывают мазок водой;
д) докрашивают фуксином Пфейффера 30 секунд;
е) промывают мазок водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют.
По отношению к этой окраске все бактерии подразделяются на грамположительные (окрашиваются в сине-фиолетовый цвет) и грамотрицательные (окрашиваются в розово-красный цвет).
К грамположительным микроорганизмам относятся все кокки, кроме нейссерий, и палочковидные бациллы. К грамотрицательньш - нейссерии, неспорообразующие бактерии, вибрионы и спириллы.
Механизм окраски по Граму.
В основе дифференциации микроорганизмов на грамположителъные и грамотрицательные лежат отличия в строении клеточной стенки.
Основой клеточной стенки бактерий является пептидогликан, обусловливающий ее прочность и ригидность. У грамположительных бактерий пептидогликан многослоен, толщиной до 500 А и с ним связаны тейхоевые кислоты. У грамотрицательных бактерий толщина пептидогликана не более 150 А, нет тейхоевых. кислот, но есть наружная мембрана, которая в основном содержит липополисахариды.
Сущность механизма окраски по Граму заключается в следующем: вначале препарат окрашивают генциан-фиолетовым, а затем раствором Люголя, в результате чего образуется комплекс генциан-фиолетовый + йод, и все клетки окрашиваются в фиолетовый цвет. Последующая обработка спиртом дифференцирует два типа бактерий. У грамположительных бактерий образовавшийся комплекс не вымывается спиртом, что обусловлено прочной связью с тейхоевыми кислотами, плотностью и многослойностью пептидогликана и при докрашивании фуксином Пфейффера они сохраняют фиолетовую окраску. У грамотрицательных бактерий, комплекс генциан-фиолетовый + йод вымывается спиртом, т.к. нет тейхоевых кислот и тонкий слой пептидогликана, поэтому обесцвеченные микробные клетки при бкраске фуксином Пфейффера приобретают красный цвет.
-
Окраска по Цилю-Нильсену. Применение, механизм окраски.
Окраска по Цилю-Нильсену. Механизм.
а) На фиксированный мазок накладывают полоску фильтровальной бумаги, на нее наливают карболовый фуксин Циля и над пламенем спиртовки подогревают мазок 2-3 раза до появления паров.
б) После остывания мазка, бумагу снимают, и препарат обесцвечивают 5% раствором серной кислоты, погружая в стаканчик с кислотой 2-3 раза.
в) Затем мазок промывают водой и докрашивают метиленовым синим 3-5 ми нут.
г) Мазок промывают водой, высушивают и микроскопируют. Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в рубиново-красный цвет, а не
кислотоустойчивые - в синий.
Механизм окраски: При обработке препарата фуксином Циля, все клетки окрашиваются в красный цвет. При последующем обесцвечивании серной кислотой кислотоустойчивые бактерии, из-за особенностей своего химического состава, удерживают краситель. Кислотоподатливые - обесцвечиваются, поэтому при дальнейшем окрашивании метиленовой синью, воспринимают краситель и приобретают синий цвет.