
- •Медицинская микробиология, её задачи, связь с другими медицинскими дисциплинами.
- •Вопросы врачебной этики и деонтологии в медицинской микробиологии.
- •Размеры и основные формы бактерий.
- •Окраска по Граму. Механизм окраски. Примеры грамположительных и грамотрицательных бактерий.
- •Окраска по Цилю-Нильсену. Применение, механизм окраски.
- •Строение бактериальной клетки.
- •Спорообразование у бактерий и его значение.
- •Химический состав бактериальной клетки, его особенности.
- •Питание бактерий. Механизмы, типы питания.
- •Классификация питательных сред по назначению.
- •Классификация бактерий по типу дыхания.
- •Способы создания условий для культивирования анаэробных микроорганизмов.
- •Рост и размножение бактерий. Характеристика роста бактериальной популяции на плотных и жидких питательных средах.
- •Влияние физических факторов на микроорганизмы.
- •Влияние химических факюровнамикроорганизмы. Дезинфекция.
- •Методы стерилизации, аппаратура.
- •Методы и критерии оценки чистоты воздуха в медицинских учреждениях.
- •Нормальная микрофлора желудочно-кишечного тракта организма человека.
- •Микрофлора женской половой сферы, ее возрастная динамика, особенности у девочек. Значение микрофлоры женской половой сферы для становления микрофлоры новорожденного.
- •Открытие вирусов. Критерии царства вирусов. Строение и химический состав вирионов.
- •Типы вирусной инфекции на уровне клетки. Фазы взаимодействия вируса с клеткой при продуктивной инфекции.
- •Интегративная вирусная инфекция. Онкогенные вирусы, классификация, вызываемые заболевания. Вирусо-генетическая теория онкогенеза ла.Зильбера.
- •Методы индикации и идентификации вирусов.
- •Вирусы бактерий (бактериофаги). Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги.
- •Организация генетического материала бактериальной клетки. Факторы вне-хромосомной наследственности (плазмиды, инсерционные элементы, транспо-зоны).
- •Виды генетической изменчивости. Мутации и генетические рекомбинации.
- •Трансформация у бактерий.
- •Трансдукция и фаговая (лизогенная) конверсия.
- •Конъюгация у бактерий.
- •Ненаследственная изменчивость (модификации). Диссоциация бактерий.
- •Практическое значение генетики и изменчивости микроорганизмов. Использование генной инженерии в медицине.
- •Антибиотики. Механизмы антимикробного действия. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
-
Трансформация у бактерий.
Трансформация - форма генетической изменчивости, при которой бактерия-реципиент поглощает из внешней среды трофическим путем фрагменты ДНК бактерии-донора. Это приводит к образованию рекомбинантных бактерий, обладающих некоторыми свойствами донорских клеток.
Впервые феномен трансформации был установлен ФХриффитсом в 1928г. на модели бескапсульного (П типа) и капсульного (Ш типа) пневмококков (рис.6). Для проведения опыта использовали 3-х белых мышей. Первую мышь заражали живыми, бескапсульными (невирулентными) пневмококками II типа. Второй мыши вводили убитую культуру капсульных (вирулентных) пневмококков Ш типа; третьей мыши - смесь живых пневмококков П типа и убитых пневмококков Ш типа.
В результате опыта в живых оставались первая и вторая мыши; погибала третья мышь, т.к. живые бескапсульные пневмококки П типа поглощали фрагменты ДНК убитых капсульных и сами превращались в капсульные (вирулентные) пневмококки Ш типа.
-
Трансдукция и фаговая (лизогенная) конверсия.
Трансдукция — перенос генетического материала от клетки-донора к клетке-реципиенту с помощью умеренного бактериофага. Обычно при этом фаг переносит лишь небольшой фрагмент ДНК бактерии-донора. В результате трансдукции бактерия-реципиент приобретает новые фенотигшческие признаки: ферментативные свойства, устойчивость к антибиотикам, вирулентность и др. При выходе бактериофага из клетки, фрагмент донорской трансдуцированной ДНК остается в хромосоме клетки-реципиента, а, следовательно, сохраняются и новые фенотипические признаки. Таким образом, при трансдукции бактериофаг выполняет только транспортную функцию.
Фаговая (лизогеннаяУ конверсия изменения свойств бактерии-реципиен-та под влиянием собственного гена умеренного фага. Например, геном умеренного дифтерийного фага содержит ген tox , который кодирует синтез дифтерийного экзотоксина. Если ДНК такого умеренного фага интегрирует с ДНК нетоксигенной дифтерийной палочки, то последняя превращается в токсигенную, т.е. продуцирующую дифтерийный экзотоксин. При выходе из клетки умеренного фага с геном tox +, дифтерийные бактерии утрачивают способность к продукции экзотоксина.
-
Конъюгация у бактерий.
Конъюгация - передача генетического (хромосомного и внехромосомного) материала от бактерии-донора к бактерии-реципиенту при их непосредственном контакте.
Необходимым условием для конъюгации является наличие у бактерии-донора F-плазмиды (полового фактора), которая контролирует синтез половых ворсинок (sex-pili) на поверхности клеток-доноров.
Бактерии, имеющие F-плазмиду, называются мужскими (F*) клетками. Женские (F) клетки не имеют этой плазмиды. Процесс конъюгации между F+ и F- клетками имеет следующие стадии: 1) установление контакта между донором и реципиентом с помощью половых ворсинок; 2) прохождение генетического материала через канал половой ворсинки от донора к реципиенту; 3) рекомбинация между донорской и реципиентной ДНК.
F-плазмида может находится как в автономном состоянии в цитоплазме, так и в интегрированном с хромосомой клетки. Находясь в автономном состоянии, она контролирует только собственный перенос при конъюгации. В результате F- клетка превращается в F+ клетку, содержащую F-плазмиду. Если F-плазмида интегрирована с хромосомой бактерии, то при конъюгации она контролирует перенос части хромосомной ДНК в клетку-реципиент. С помощью интегрированной F-плазмиды частота переноса хромосомных генов между бактериями существенно возрастает. Поэтому бактерии, у которых F-плазмида интегрирована с хромосомой, обозначают как Hfr (от англ. high frequency recombination), т.е. обеспечивающие высокую частоту рекомбинаций.