Лабораторная работа «санитарно-бактериологическое исследование воды»
Санитарно-бактериологическое исследование воды заключается в следующем:
1. Определяют общее количество микробов в 1 мл.
2. Определяют титр кишечной палочки.
Взятие проб воды для санитарно-бактериологического исследования. Воду для санитарно-бактериологического исследования отбирают в количестве 500 мл в бутылки, предварительно простерилизованные в бумажных пакетах, с ватно-марлевой пробкой, покрытой сверху бумажным колпачком. К горлышку бутылки привязывают пакетик с завернутой в него запасной пробкой.
Из кранов водопроводных сооружений пробы берут в период наибольшего расхода воды после предварительной стерилизации крана обжиганием пламенем горящего тампона, смоченного спиртом, и последующего спуска воды в течение 10-15 мин при полностью открытом кране.
Пробы хлорированной воды берут во флаконы с дехлоратором, так как под действием хлора микробы в воде погибают. В качестве дехлоратора на 500 мл исследуемой воды добавляют 10 мг серноватистокислого натрия.
К отобранным пробам воды прилагают сопроводительный документ с указанием следующих данных:
1) место расположения крана;
2) дата отбора пробы с указанием года, месяца, числа и часа;
3) особые обстоятельства при отборе пробы (время спуска воды из крана, условия транспортировки и т. д.).
4) цель исследования: сделан ли отбор пробы в порядке текущего санитарного надзора или по особым показаниям.
Бактериологический анализ воды должен быть произведен не позднее 2 ч с момента ее взятия. Указанный срок может быть увеличен до 6 ч при условии сохранения или транспортировки пробы воды при температуре от 1 до 5°С, что достигается с помощью резиновых мешков, наполненных зимой теплой водой, а летом - льдом. ГОСТ 2871—82 «Вода питьевая. Гигиенические требования и контроль за качеством» нормирует следующие бактериологические показатели питьевой водопроводной воды:
а) общее число бактерий при посеве 1 мл неразведенной воды, определяемое числом колонии на мясо-пептонном агаре после 24-часового выращивания при температуре 37°С (не более 100); б) количество кишечных палочек в 1 л воды, определяемое числом колоний на среде Эндо с применением концентрации бактерий на мембранных фильтрах (не более 3).
Определение общего числа микробов в воде
Общее микробное загрязнение определяется количеством микроорганизмов в 1 мл воды, которые при посеве на мясо-пептонный агар и инкубации при 37±0,5°С в течение 24 ч образуют колонии, видимые простым глазом или при увеличении в 2-5 раз.
В зависимости от степени предполагаемого загрязнений производят посев не менее двух различных объемов воды, выбранных с таким расчетом, чтобы на чашках вырастало от 30 до 300 колоний. Водопроводную воду и воду артезианских колодцев засевают в неразведенном виде по 1 мл.
Из исследуемого образца неразведенной воды и из пробирок с ее разведениями в соответствии со степенью предполагаемого загрязнения берут по 1 мл, вносят в стерильные чашки Петри и заливают 10-12 мл растопленного и остуженного до 45 °С мясо-пептонного агара. Круговыми движениями руки, вращая чашки по горизонтальной поверхности стола, распределяют их содержимое равномерным слоем по всей площади дна. После застудневания агара чашки с посевами вверх дном помещают в термостат при 37±0,5°С на сутки.
После указанного срока выращивания приступают к подсчету колоний, выросших как на поверхности, так и в глубине агара.
Если в чашке с наиболее высоким разведением выросло свыше 300 колоний и анализ нельзя повторить, колонии подсчитывают при помощи пластинки с сеткой и лупы при сильном боковом освещении. Подсчитывают в разных местах чашки не менее 20 квадратов площадью 1 см2 каждый. Затем выводят среднее арифметическое число колоний, приходящееся на 1 см2, и умножают его на площадь чашки в квадратных сантиметрах.
Результаты анализа выражают количеством бактерий на 1 мл исследуемой воды, для чего число выросших на чашке колоний умножается на степень разведения воды.
За окончательное количество бактерий принимается среднее арифметическое результата подсчета на двух параллельных чашках. При оформлении протокола количество микроорганизмов, определенное .в 1 мл исследуемой воды, округляют (таблица1).
Таблица 1 Запись результатов определения микробного числа воды
При количестве колоний в 1 мл |
Запись результата анализа |
От I до 100 |
Конкретная цифра подсчета |
101-1000 |
Округленная до 10 |
1001- 100000 |
Округленная до 100 |
10 001-1000000 |
Округленная до 1000 |
100001-1000000 |
Округленная до 10000
|