График Корниш-Боудена
Многие ферменты катализируют реакции с участием 2-х и более субстратов
S1 + S2 |
E |
P1 |
+ P2 |
|
Ферментативная реакция с образованием тройного комплекса
Случайный механизм
Упорядоченный
Ферментативная реакция без образования тройного комплекса
Пинг-понг
ИНГИБИРОВАНИЕ ФЕРМЕНТОВ
I) НЕОБРАТИМОЕ ИНГИБИРОВАНИЕ
II)ОБРАТИМОЕ ИНГИБИРОВАНИЕ : 1) конкурентное
2)бесконкурентное
3)неконкурентное
4)смешанное
I. НЕОБРАТИМОЕ ИНГИБИРОВАНИЕ
II. Обратимое ингибирование: конкурентное, неконкурентное, бесконкурентное, смешанное
Субстрат
Фермент
Конкурентный
ингибитор
Неконкурентный
ингибитор
1. КОНКУРЕНТНОЕ ИНГИБИРОВАНИЕ
Продукт
Субстрат
Фермент
ингибитор
Субстрат (S) и ингибитор (I) связываются с одним и тем же сайтом
Сульфаниламиды – структурные аналоги п-аминобензойной кислоты
Преобразования уравнения Михаэлиса - Ментен : двойной обратный график ( уравнение Lineweaver- Burk)
Наклон =
y = a∙x + b
Кинетический тест для определения механизма ингибирования
(1) Конкурентное ингибирование
При увеличении концентрации ингибитора:
1.Vmax → не меняется
2.Km → увеличивается
3.Коэффициент наклона → увеличивается
4. α = 1 +[ I ] / kI |
Без ингибитора |
|
Наклон = |
2. БЕСКОНКУРЕНТНОЕ (UNCOMPETIVE) ИНГИБИРОВАНИЕ
Ингибитор cвязывается |
|
только с фермент- |
|
субстратным комплексом |
Продукт |
|
Фермент
Субстрат |
ингибитор |
Субстрат (S) и игибитор (I) связываются с разными сайтами