Влияние рН

Активность ферментов

•Единица активности фермента – количество фермента, катализирующее превращение определенного количества субстрата или образование продукта за ед. времени

•Международная единица:

•1 МЕ = 1 мкмоль S/мин

•Катал:

•1 SI = 1 моль S/сек

•Число оборотов:

•Число молекул субстрата, претерпевающих превращение в ед. времени в расчете на 1 молекулу фермента (1 каталитический центр) в условиях насыщения фермента субстратом

Число оборотов некоторых ферментов

Влияние концентрации субстрата на скорость ферментативной реакции

1. Начальная скорость ( V0 ) :

[S] намного превышает [E]

2.Максимальная скорость ( V max) :

любое увеличение [S] вызывает бесконечно малое увеличение V0

1.Престационарное состояние : начальный период, большой избыток [S].

4.Стационарное состояние : [ES] остается постоянным

5.K-2 пренебрежимо мало

УРАВНЕНИЕ МИХАЭЛИСА – МЕНТЕН

k1([Et] – [ES])[S] = k-1[ES] + k2[ES]

1. E + S ↔ ES относительно быстрая и обратимая стадия

2.ES ↔ E + P , ES –комплекс распадается медленно: лимитирующая стадия

3.При низкой [S] большинство молекул фермента не связаны с субстратом, при [S] >> [E] все активные центры фермента «насыщены» субстратом

1.При высоких [S], [S] >>> Km , V0 = Vmax

2.При низких [S], [S] <<< Km , V0 = Vmax· [S] / Km

3.Константа Михаэлиса-Ментен: Km

Km = (k2+ k-1 )/ k 1

V0 = Vmax · [S] / Km + [S] Vmax/2 = Vmax · [S] / Km + [S] 2[S] = Km + [S]

Km = 2[S] – [S] = [S]

Значения Km некоторых ферментов

Преобразования уравнения Михаэлиса - Ментен : двойной обратный график ( уравнение Lineweaver- Burk)

y = a∙x + b