23.Количетвенный метод определения содержания белка на полуавтоматическом приборе Кьельтек.

Метод Кьельдаля основан на минерализации органических соеденений биологических объектов с последующим определением общего азота по количеству образовавшегося аммиака.

Отбор образца. Масса навески 0,1 - 1 гр.

Подготовка образца к анализу. В пробирку для минерализации помещают:

- взвешенный образец вместе с безазотной бумажной салфеткой;

- две таблетки катализатора «Кьельтаб»;

- добавляют 12_см3 концентрированной серной кислоты

Минерализация пробы. Специальное устройство

Digestor DS-6 состоит из:

- блока для минерализации/сжигания (U=230 В)

- штатива для крепления пробирок

- тепловых экранов

Процесс минерализации проводят при t=420 °С, продолжительность 40-60 мин.

По окончании процесса минерализации образуется сульфат аммония, поэтому далее осуществляется дистилляция

Дистилляция — отгонка аммиака в присутствии концентрированного раствора гидроксида натрия Титрование. Колбу с дистиллятом вынимаем и титруем (дистиллят) 0,1Н раствором соляной кислоты Титрование проводим вручную на полуавтоматическом титраторе Раствор в колбе приобретает голубоватый серый цвет Отмечаем количество кислоты, пошедшей на титрование

Количество азота (N,%)

N=(V1-V2)*H*14,007*100/M V1 — кол-во кислоты, затраченное на титрование иследуемого образца, см³;

V2 — кол-во кислоты, затраченное на титрование холостого образца, см³;

H — нормальность раствора соляной кислоты;

14,007 — количество азота, эквивалентное раствору гидроксида натрия, мг;

М — масса иследуемого образца, мг.

Содержание белка

Б=N*F

Б — содержание белка, %;

N — количество азота, %;

F =6,25 — коэффициент пересчета

24.Метод Дюма для определения азота в органических соединениях. Анализатор белкового азота Rapid-Cube.

Дюма метод разработан Ж. Дюма в 1831.

1.Навеску анализируемого в-ва сжигают в кварцевой трубке в атмосфере СО₂ в присут. СuО и металлич. Сu.

2.Объем выделившегося N₂ измеряют в азотометре (градуир. сосуде), после чего рассчитывают содержание N в анализируемом образце.

3.Образующиеся наряду с азотом СО, СО2, О2, Н2О, оксиды азота и др. связываются в трубке (медью или ее оксидом) или поглощаются водным р-ром щелочи, к-рым заполнен азотометр.

Дюма метод в описанном варианте применяется редко.

Анализатор белкового азота RAPID N Cube (Elementar /Германия/)

Анализатор для быстрого и абсолютно безопасного определения азота (белка) в продуктах питания, объектах окружающей среды и др. методом сжигания по Дюма. Количество образца - до 1 г или до 1 мл жидкости.

Прибор имеет встроенный автосамплер на 60 образцов массой до 1 г, или на 120 образцов до 300 мг.

Для любого варианта возможна дозагрузка образцов во время анализа.

Сжигание пробы при Т = 960°C в трубке из нержавеющей стали. Концентрация кислорода 100% достигается путем импульсной подачи кислорода непосредственно к образцу. Экономия кислорода достигает 95%.

Далее образовавшийся азот определяется на детекторе по теплопроводности специальной конструкции, устойчивом к избытку кислорода. В качестве газа-носителя в анализе используется CO2 . Электронный контроллер потока установлен непосредственно перед детектором, что обеспечивает исключительную стабильность сигнала. Заводская калибровка остается стабильной в течении нескольких месяцев и даже лет. Эффективная многостадийная система осушки газов позволяет проводить анализ до 1 мл жидкости.