5.6. Фибринолитическая (плазминовая) система. Современные методы изучения

• Наиболее распространенные в клинической практике методы оценки состояния фибринолитической системы основаны на:

• 1) исследовании времени и степени лизиса (растворения) сгустков крови или эуглобулиновой фракции плазмы (общеоценочные пробы);

• 2) определении концентрации плазминогена, его активаторов и ингибиторов (ТАП; ПАИ-1; α2-антиплазмин).

• Вопрос 5.3.

5.7. Лабораторные методы оценки факторов внешнего и внутреннего пути свертывания (ачтв, птв/мно, микст-тесты, ядовые тесты)

• АЧТВ – активированное частичное тромбопластиновое время (отражает изменение активности факторов контактного пути активации свертывания крови – внутреннего пути; тест чувствителен к дефициту всех факторов свертывания крови кроме ф.VII).

• Коагуло-тест: лиофильно высушенный фософолипидный (ФЛ) реагент эрилид (кефалин), легкая фракция каолина (суспензия), 0,025 М раствор кальция хлористого.

• Принцип метода: инкубирование тестируемой плазмы с оптимальным стандартизованным соотношением ФЛ и каолина активирует факторы внутреннего пути свертывания. Добавление в систему ионов кальция купирует цитрат плазмы (консервант) и позволяет получить фибриновый сгусток. АЧТВ регистрируют с момента добавления ионов кальция до момоента образования сгустка.

• Норма – 35-45 секунд (зависит от тест-системы).

ПТВ (ПВ)/МНО протромбиновое время/международное нормализованное отношение

• Во внешнем пути свертывания ключевое место отводится тканевому тромбопластину. Внешний путь invitroпринято моделировать тестом протромбинового времени, когда к исследуемой цитратной плазме, бедной тромбоцитами, добавляют тромбопластин, представляющий собой солевой экстракт тканей, содержащий тканевой тромбопластин и фософолипиды.

• Этим методом определяется активность нескольких факторов свертывания крови (факторов протромбинового комплекса): ф. II(протромбин), ф.VII(проконвертин), ф.X(Стюарта) и ф.V(проакселерин).

• Для проведения теста требуется тканевой тромбопластин, ФЛ и ионы кальция.

• Тест является одним из базовых тестов, используемых в повседневной клинической практике.

Принцип метода

• Основным реагентом является тромбопластин – солевой экстракт тканей (легкие, плацента, головной мозг) животных и человека.

• Определяется время свертывания бедной тромбоцитами цитратной плазмы в присутствии ионов кальция и избытка тканевого тромбопластина.

• В этих условиях время образования сгустка зависит только от активности факторов протромбинового комплекса.

Принцип метода

• Состав набора: 1. тромбопластин, 2. 0,025 М раствор кальция хлористого.

• При добавлении к исследуемой цитратной плазме избытка тканевого тромбопластина и ионов кальция время образования сгустка фибрина зависит только от активности факторов внешнего и общего пути коагуляции: I,II,V,VII,X.

• Измеряют время образования фибринового сгустка после внесения в исследуемую плазму тромбопластина и кальция хлористого.

• Тест проводят ручным методом или при помощи фотооптических коагулометров.

Способы выражения результатов протромбинового теста

1. ПВ – время свертывания плазмы при добавлении тромбопластина (норма 14-18 секунд*);

2. ПО (протромбиновое отношение)=ПВ плазмы больного/ПВ нормальной плазмы (норма 0,9-1,1*);

3. МНО=По ^мич(норма 0,8-1,2*);

4. Активность протромбина по Квику (рассчитывается по калибровочному графику, норма 70-130%);

5. ПИ (протромбиновый индекс)=(ПВ нормальной плазмы/ПВ плазмы больного) х 100 (норма 80-120%).

Расчет МНО позволяет клиницисту использовать в работе таблицы соответствия МНО и необходимого и достаточного уровня антикоагулянтной терапии.

* норма зависит от используемой в лаборатории тест-системы

мич - Международный индекс чувствительности тромбопластина. Тромбопластин представляет собой реактив, который использует конкретная лаборатория. Изготавливают такие реактивы множество разных фирм. Поэтому в паспорте конкретного тромбопластина указывается величина его очистки и чувствительности (МИЧ). Получить показатель МНО можно, если возвести отношение исследуемого протромбинового времени больного к его средней нормальной величине в степень, равную цифре МИЧ используемого тромбопластина.