Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Физиология системы крови. Учебное пособие
.pdf
51
возможно установление отцовства (или отрицание oтцoвства).
Наследование группы крови и резус-фактора происходят независимо
друг от друга. Если оба родители имеют положительный резус, у
ребенка будет только положительный. Если оба родителя имеют
отрицательный резус – ребёнок наследует чаще – отрицательный.
Если же один из родителей резус-положительный, а другой резусотрицательный – то вероятность peзус- принадлежности малыша
определяется 50% на 50%. Есть вероятность наследования резуса
через несколько поколений (случай, когда у отца и матери
положительный резус, а у родившегося ребёнка – отрицательный
резус). Обязательны исследования родителей на совместимость -женщины с рeзус-отрицательной кровью относится к гpуппе риска.
В течении беременности у женщины с резус-отрицательной кровью
обязательно необходимо определение титра резус-антител в крови в
динамике.
В клинической практике (хирургия, травматология,
гинекология) часто встречаются случаи необходимости переливания
крови. Оно производится с соблюдением основных следующих
правил и требований:
1. Переливание цельной крови осуществляется только по
принципу одноименной группы (для детей это правило является
строго обязательным). Кровь донора 0 (I) группы можно переливать
реципиенту 0 (I) группы, и так далее. В экстренных ситуациях, когда
нет времени или возможности делать анализ, допустимо
переливание крови I группы реципиентам остальных групп ("до
выяснения"), так как 0 (I) группа крови является универсальной. В
этом случае порция вводимой крови ограничивается минимальным
объёмом. (Исключение - с учётом резус-фактора, нельзя переливать
"положительную", если у реципиента "отрицательная"(это чревато
резус-конфликтом).
2. В клинике перед переливанием крови необходимо
провести биологическую и индивидуальную пробы. Первая
заключается в уточнении группы крови по системе АВО и резус, а
вторая – введении больному небольшой порции (5-10мл)
переливаемой крови и наблюдении в течении 10-15 минут за его
реакцией на введенную кровь. Если не наблюдается признаков
гемотрансфузионного шока (покраснение кожи, появление сыпи на
руке, повышение температуры, озноб, головокружение и «мелькание
мошек перед глазами), то производят запланированное переливание.
52
В настоящее время кроме традиционных доноров крови,
существуют доноры плазмы, клеток крови, костного мозга. Донор
плазмы вначале отдает порцию крови, затем плазма извлекается, а
эритроциты вновь возвращаются донору, производится реинфузия
форменных элементов крови. Такая процедура взятия плазмы
получила название плазмафереза. У доноров клеток крови также
первоначально берется порция крови, затем извлекается нужная
фракция форменных элементов, например, эритроциты, лейкоциты,
тромбоциты, лимфоциты, а остаток вновь вводится донору –
производится реинфузия плазмы и остальных клеток. Этот способ
получения фракций клеток крови называется цитаферез. Таким
способом получают лейкоконцетраты, тромбоконцетраты,
эритроцитарную массу. На станциях переливания крови можно
получить эрирцитарную массу, эритроцитарную взвесь, плазму
крови, сухую палазму, тромбоцитарный концетрат,лейкоцитарный
концетрат, альбумин, протеин, криопреципитат, протромбиновый
комплекс, фибриноген, тромбин, фибринолизин, гамма – глобулин,
иммуноглобулин, иммуноглобулин анти –Д, иммуноглобулин
антистолбнячный, антистафилококковый и т.п.
В физиологической литературе также имеются данные о связи
между групповыми свойствами крови и особенностями
типологических характеристик человека, предрасположенностью к
отдельным заболеваниям, режимом питания.
Учет группы крови, её анализ при планировании семьи
Супругам – желательно определить группы и резус - фактор
крови. Положительный резус-фактор у женщины и отрицательный у мужчины не представляют никакого повода для беспокойства.
Если же у женщины окажется резус-отрицательная кровь, а у ее
мужа - резус-положительная, то во время беременности возможно
развитие резус-конфликта, поэтому женщине рекомендуется до
беремености сделать анализ крови на антитела к резус-фактору.
Дело в том, что если женщина до беременности перенесла
хирургическую операцию (в т.ч. аборт) или переливание крови, либо
если беременyость не первая, то существует вероятность
образования в ее кpoви специфических антител. У резусотрицательной женщины с резус-положительным плодом возможны
иммунные осложнения (гемолитическая болезнь новорожденных и
др.) и особенно - со второй-третьей беременности. Для
предупреждения осложнений вводят антирезус-гамма-глобулин.
53
Надо регулярно исследовать кровь на резус-антитела. Кстати, анализ
кpoви на определение группы крови и резус-фактора необходимо
сдать и будущему папе. Этот анализ показывает, попадаете ли вы и
ваш ребенок в группу риска из-за конфликта ваших групп крови или
резус-факторов.
Необходимо учитывать резус-фактор и при переливании крови.
Резус-конфликт может развиться при повторном переливании резусположительной кpoви лицам с резус-отрицательной кровью.
Женщины с первой группой крови -- тоже - группа риска. Учёт
анализа крови на железо поможет предотвратить анемию, которая
часто возникает во время беременности. При необходимости, врач
пропишет таким женщинам железосодержащие препараты.
7.1 Лабораторная работа Определение группы крови (в системе
АВО).
Цель работы: определить групповую принадлежность и резус-
фактор с помощью синтетических цоликлонов
Совокупность эритроцитарных (агглютиногены) и плазменных
(агглютинины) белков определяет разделение крови на группы. Из
многочисленных типов классификации наиболее распространена
классификация Янского-Ландштейнера (АВО) и резуспринадлежность (Rh+ и Rh-). Открытие групп крови и Rh-фактора
сделало возможным ее переливание от донора к реципиенту.
В основе разделения крови людей на группы в системе АВО
лежит наличие в эритроцитах агглютиногенов (А, В), а в плазме крови агглютининов (α, β). При взаимодействии одноименных агглютиногенов и агглютининов происходит склеивание эритроцитов.
Агглютинины возникают у человека еще в эмбриональном
периоде развития. Агглютинины появляются позже, и титр их в
сыворотке крови у детей первых недель после рождения очень
низок. В зависимости от наличия или отсутствия в эритроцитах
агглютиногенов А и В. Различают четыре группы крови: группу I,
или о (α, β); группу II, или А (β); группу III, или В (α); группу IY, или
АВ (в скобках указаны агглютинины плазмы). В сыворотке IY
группы агглютининов α и β нет.
В настоящее время в клинике широко используют
синтетические цоликлоны – растворы с аналогами агглютининов α и
β. Этот метод надежен и прост: агглютинация происходит прямо
54
между одноименными агглютиногенами исследуемой крови и
аггютининами цоликлонов.
Эритротесты цоликлон анти-А (розовый цвет) и анти-В (синий
цвет).
Оборудование: цоликлоны анти-А, и анти-В, предметное
стекло, белая бумага, стеклянные палочки, стерильный
скарификатор, спирт, вата и карандаш по стеклу.
ХОД РАБОТЫ
1. Взять чистое предметное стекло, карандашом по стеклу нанести
цифры 1, 2.
2. Ниже надписи нанести по капле (0,1 мл) реагента анти-А и анти-
В и предметное стекло поместить на белую бумагу.
3. Ватным тампоном, смоченным спиртом протереть мякоть 4-го
пальца левой руки и скарификатором проколоть протертый палец,
отступив от середины на 1-2 мм влево.
4. Первую каплю крови стереть сухим тампоном. Со второй капли
отдельными чистыми палочками перенести ее в каждую каплю
реагента, с таким расчетом, чтобы на капле реагента было в 10 раз
меньше крови (0,01 мл).
5. Реактив и кровь тщательно перемешать стеклянной палочкой,
пока смесь не будет иметь равномерную розовую окраску.
6. Покачивая стекло, наблюдать в течение 1-5 минут за каплями
смеси. Если капля смеси остается гомогенной, равномерно окрашенной, то это значит, что реакции гемагглютинации (РГА) нет. Если
проявляются красные мелкие комочки, разделенные прозрачной
плазмой, значит РГА есть. Группу крови определите по таб. 18 и рис.
6
Таблица 18 - Определение групп крови с помощью
синтетических цоликлонов
Эритротест цоликлон
анти-А
Эритротест цоликлон
анти-В
Группа крови
-
-
О ( I )
+
-
А ( II )
-
+
В ( III )
+
+
АВ ( IY )
«-» - реакции агглютинации нет
«+» - реакция агглютинации есть
Оценка результатов. Отсутствие агглютинации в обеих
55
пробах служит доказательством принадлежности исследуемой
крови к I (О) группе крови. Если агглютинация произошла с
реагентом анти-А, то кровь принадлежит ко II (А) группе. Если
агглютинация произошла с реагентом анти-В, то кровь III (В)
группы. В случае агглютинации в обеих пробах, кровь следует
отнести к IY (АВ) группе.
Рис. 6 Определение групп крови с помощью стандартных сывороток (А) и
синтетических цоликлонов анти-А и анти-В (Б)
Таблица 19 - Совместимость различных групп крови
Группа
сыворотки
Группа эритроцитов
I (О)
II (А)
III (В)
IV (АВ)
I б,в
- + + + II в - - + +
III б
- + - + IV - - - -
Примечание: «+» - группы несовместимы (наличие
агглютинации),
«-» - группы совместимы (отсутствие агглютинации)
По вертикали – кровь отдает, по горизонтали – кровь принимает.
(знак «-»).
Оформление протокола:
1. Запишите результаты исследования в тетрадь, заполнив таблицу
18.
56
Таблица 20
Цоликлон
Анти-А
Цоликлон
Анти –В
групповая принадлежность
2. Перенесите в тетрадь общую схему четырех групп крови,
обозначив штриховкой реакцию агглютинации в соответствующих
кружках.
3. Зарисуйте наблюдаемую вами картину с образцом исследованной
крови, сделайте заключение о ее групповой принадлежности.
4. По таблице 20 сделайте заключение о совместимости своей
группы крови с другими группами.
7.2 Лабораторная работа: Определение резус-фактора (Rh)
Кроме агглютиногенов, определяющих четыре группы крови
(система АВО), эритроциты могут содержать в разных комбинациях
и многие другие агглютиногены. Среди них особенно большое
значение имеет резус-фактор.
Rh-агглютиноген (резус-фактор) не имеет в плазме
«врожденных» агглютининов. Они могут вырабатываться иммунной
системой резус-отрицательного реципиента при переливании ему
резус-положительной крови или организмом резус-отрицательной
матери, беременной резус-положительным плодом, если плацента
имеет дефекты, и вследствие нарушения ее барьерных функций
кровь плода и матери смешиваются. В первом случае повторное
переливание резус-несовместимой крови может привести к
аутоиммунному гемолизу, так как резус-антитела являются
сильнейшими гемолитическими ядрами. Во втором случае, если
целостность плаценты нарушена, иммунная система матери
вырабатывает резус-антитела к эритроцитам плода, что может
привести к частичному, а при высоком титре антител к полному
гемолизу крови плода и его внутриутробной гибели.
Оборудование: стерильный скарификатор, вата, спирт,
57
стеклянная палочка, предметное стекло, стандартный цоликлон
анти-Д-супер, физиологический раствор (0,9%).
ХОД РАБОТЫ
1. Нанесите на предметное стекло каплю стандартной сыворотки
«цоликлон анти-Д-супер». Рядом с сывороткой поместите каплю
исследуемой крови (размер капли должен быть вдвое меньше, чем
капля сыворотки).
2. Стеклянной палочкой перемешайте каплю крови с каплей
сыворотки, образуя общую каплю размером с копеечную монету.
3. Покачивая предметное стекло, наблюдайте за реакцией. Для
лучшего выявления наличия или отсутствия аггллютинации можно
добавить в пробу каплю физиологического раствора (0,9%).
4. Если исследуемая кровь резус-положительна (Rh+), то в пробе
со стандартной сывороткой «цоликлон анти-Д» наблюдается
агглютинация эритроцитов. Если кровь резус-отрицательна (Rh-),
агглютинация в пробе будет отсутствовать. При наличии
агглютинации кровь считают резус-положительной, а при
отсутствии агглютинации – отрицательной.
Оформление протокола:
1. Определите Rh-принадлежность исследуемой крови.
2. Запишите результаты в тетрадь, заполнив таблицу 19
Таблица 21: Результаты собственных исследований
Группа
крови
(система
АВО)
Анти-А
(наличие
агглютинации – знак
«+», отсутствие – «-»)
Анти-В
(наличие агглютинации
– знак «+», отсутствие
– «-»)
Результаты
исследований
(Ваша группа
крови)
Резус-
фактор
Цоликлон анти-Д
Наличие
агглютинации (кровь
резус-положительна –
знак «+»)
Отсутствие
агглютинации (кровь
резус-отрицательна –
знак «-»)
Результаты
исследований
(Ваш резус-
фактор)
Контрольные вопросы для самостоятельного изучения
1. Что положено в основу деления людей по группам крови?
2. Что представляют собой агглютинины и агглютиногены? Где
они располагаются?
3. Основные правила переливания крови.
58
4. Понятие о резус-факторе.
5. Объясните значение Rh-фактора при переливании крови.
6. Свертывание крови в онтогенезе.
7. Особенности переливания крови у детей.
8. Физиологическое обоснование мероприятий при длительном
кровотечении после операции удаления зуба.
9.Физиологическое обоснование способов предотвращения и
остановки кровотечения при операциях в ротовой полости.
10. резус – конфликт между организмом матери и плода.
8. Свертывание крови
Лабораторная работа 8.1. - Подсчет тромбоцитов
Тромбоциты
Тромбоциты, или кровяные пластинки – плоские клетки
неправильной округлой формы диаметром 2–5 мкм. Тромбоциты
человека не имеют ядер - это фрагменты клеток, которые меньше
половины эритроцита. Количество тромбоцитов в крови человека
составляет 180–320х10'/л, или 180 000–320 000 в 1 мкл. Имеют место
суточные колебания: днем тромбоцитов больше, чем ночью.
Увеличение содержания тромбоцитов в периферической крови
называется тромбоцитозом, уменьшение – тромбоцитопенией.
Главной функцией тромбоцитов является участие в гемостазе.
Тромбоциты помогают "ремонтировать" кровеносные сосуды,
прикрепляясь к поврежденным стенкам, а также участвуют в
свертывании крови, которое предотвращает кровотечение и выход
крови из кровеносного сосуда.
Способность тромбоцитов прилипать к чужеродной
поверхности (адгезия), а также склеиваться между собой (агрегация)
происходит под влиянием разнообразных причин. Тромбоциты
продуцируют и выделяют ряд биологически активных веществ:
серотонин (вещество, вызывающее сужение кровеносных сосудов и
уменьшение кровотока), адреналин, норадреналин, а также
вещества, получившие название пластинчатых факторов
свертывания крови. Так, у тромбоцитов есть различные белки,
способствующие коагуляции крови. Когда лопается кровеносный
сосуд, тромбоциты прикрепляются к стенкам сосуда и частично
закрывают брешь, выделяя так называемый тромбоцитарный фактор
59
III, который начинает процесс свертывания крови путем
превращения фибриногена в фибрин. Тромбоциты способны
выделять из клеточных мембран арахидоновую кислоту и
превращать ее в тромбоксаны, которые, в свою очередь, повышают
агрегационную активность тромбоцитов. Эти реакции происходят
под действием фермента циклооксигеназы.
Тромбоциты способны к передвижению за счет образования
псевдоподий и фагоцитозу инородных тел, вирусов, иммунных
комплексов, тем самым, выполняя защитную функцию. Тромбоциты
содержат большое количество серотонина и гистамина, которые
влияют на величину просвета и проницаемость капилляров,
определяя тем самым состояние гистогематических барьеров.
Тромбоциты образуются в красном костном мозге из гигантских
клеток мегакариоцитов. Унопотентная клетка претерпевает
неполное деление, потому что ядро делится, а цитоплазма нет. В
результате образуется мегакариобласт, от цитоплазмы которого в
конце отделяются пластинки.
Продукция тромбоцитов регулируется тромбоцитопоэтинами.
Тромбоцитопоэтины образуются в костном мозге, селезенке,
печени. Различают тромбоцитопоэтины кратковременного и
длительного действия. Первые усиливают отщепление тромбоцитов
от мегакариоцитов и ускоряют их поступление в кровь. Вторые
способствуют дифференцировке и созреванию мегакариоцитов.
Продолжительность жизни тромбоцитов составляет от 5 до 11
дней. Разрушаются кровяные пластинки в клетках системы
макрофагов.
Активность тромбоцитопоэтинов регулируется интерлейкинами
(ИЛ-6 и ИЛ-11). Количество тромбоцитопоэтинов повышается при
воспалении, необратимой агрегации тромбоцитов
Оборудование: микроскоп, счетная камера Горяева, смеситель
для лейкоцитов, скарификатор, чашка Петри, 5%раствор уксусной
кислоты (СН3СООН), вата, спирт, жидкость Реес –Эккера,
дистиллированная вода.
Ход работы:
1. Прокалывают палец, получают каплю крови. Смесителем для
лейкоцитов набирают до метки 0.5. консервирующую жидкость Реес
–Эккера, до метки 1.0 –исследуемую кровь, а затем до метки 11 –
раствор 5% уксусной кислоты для гемолиза эритроцитов. Смесь
60
тщательно перемешивают встряхиванием. Заполняют счетную
камеру. В связи с тем, что оседание тромбоцитов происходит
медленно, камеру на 15-20 минут оставляют в чашке Петри, а затем
производят подсчет тромбоцитов в 80 малых квадратах. Результат
подсчета, умноженный на 1000, дает общее число тромбоцитов.
Оформление результатов работы:
Отметьте количество тромбоцитов, полученное в результате
подсчета. В выводе следует указать, соответствуют ли полученные
данные норме.
Клиническая интерпретация анализа:
Тромбоцитоз вызывают: острые инфекции, гнойные и
септические процессы, хронический панкреатит, цирроз пени,
болезни сердца, ревматоидный артрит, железодефицитная
анемия, хирургические операции, полицитемия, метаплазия
костного мозга, хронический миелолейкоз, остеомиелосклероз. У
50% пацентов с «неожиданным» тромбоцитозом выявляется
злокачественное новообразование.
Тромбоцитопения - бывает приобретенной и
наследственной. Приобретенную тромбоцитопению вызывают:
лекарственные средства (аспирин, анестетики, В –блокаторы,
декстран), аплазия костного мозга, голодание, цирроз печени,
почечная недостаточность, пароксизмальная ночная
гемоглобинурия, вирусные инфекции. Острые лейкозы.
Наследственную тромбоцитопению вызывают: болезнь
Виллебранда, синдром Вискотта – Олдрича, синдром Мея -Хегглица
ионизирующее излучение, бензол, алкоголь.
Лабораторная работа 8.2. - Анализ механизма свертывания
Гемостаз – это совокупность биохимических и
физиологических механизмов, направленных на предупреждение и
остановку кровотечений, а также для поддержания жидкого
состояния крови. Кровь является очень важной составляющей
организма, ведь при участии этой жидкой среды протекают все
обменные процессы его жизнедеятельности. Количество крови у
взрослых людей составляет в среднем у мужчин -5 литров и у
женщин – 3,5 литров. При различных травмах и порезах, при
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]