Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Физиология системы крови. Учебное пособие
.pdf
21
общей осмолярности крови обеспечивается белками (в %)?
Задача №2 – Концентрация глюкозы в крови -6.6мосм/л. Какая
часть общей осмолярности крови зависит от содержания в ней
глюкозы (в%)?
Задача №3 – Концентрация натрия в крови равна 145 ммоль/л.
Изотонический коэффициент хлористого натрия 1.8. Какая часть
общей осмолярности крови обеспечивается за счет хлорида натрия
(в %)?
Выводы: Указать, какое осмотически активное вещество играет
главную роль в формировании осмолярности крови. Дать определение понятиям: «осмотическое давление» и «осмотическая концентрация». Написать, в каких единицах измеряются эти величины.
Вопросы для самоконтроля:
1. Электролитный состав плазмы.
2. Понятие об осмолярности плазмы.
3. Какие вещества создают осмотическое давление и каково его
значение?
4. Понятие об изо-, гипо- и гипертонических растворах.
5. Какие вещества создают онкотическое давление и каково его
значение?
6. Количество белков в раннем онтогенезе.
Лабораторная работа № 5.6. Определение скорости
оседания эритроцитов
Одно из важнейших свойств крови - суспензионное –
заключается в том, что все форменные элементы крови находятся во
взвешенном состоянии. Выделяют две основные причины
суспензионного свойства крови: постоянная циркуляция крови по
сосудам и наличие альбуминов в плазме крови, которые
преобладают над глобулинами. Скорость оседания эритроцитов –
это их свойство осаждаться на дне сосуда (капилляр), при
сохранении крови в несвертывающемся состоянии в виде так
называемых монетных столбиков, над которыми образуется слой
прозрачной жидкости – плазмы.
Эритроциты оседают потому, что их относительная плотность
больше, чем относительная плотность плазмы. СОЭ зависит от
белкового состава плазмы, главным образом от соотношения
глобулинов и альбуминов (в норме АГ – коэффициент равен 1,5-2,3).
Сдвиг коэффициента за счет увеличения количества глобулинов
22
ускоряет СОЭ, что имеет место при многих патологических
(воспаление, туберкулез) и некоторых физиологических
(беременность) процессах.
Все белковые молекулы (фибриноген, α1-глобулин, α2-глобулин,
β-глобулин) в разной степени снижают отрицательный заряд мембран эритроцитов (тета-потенциал), способствующий взаимному
отталкиванию эритроцитов и поддержанию их во взвешенном
состоянии. Наибольшее влияние оказывают фибриноген,
иммуноглобулины. СОЭ зависит от многих факторов: количества,
объема, формы и величины заряда эритроцитов, их способности к
агрегации, белкового состава плазмы. В большей степени СОЭ
зависит от свойств плазмы, чем от эритроцитов. Особенно большое
значение имеет состав белков плазмы и соотношение белковых
фракций. В норме в плазме крови содержится 6.5–8.5% белков:
альбуминов – 4.0 - 4.5%; глобулинов - - 2.0–3.0%; фибриногена – 0.2
– 0.4%. Отношение альбуминов и глобулинов - белковый
коэффициент- составляет 1.5–1.7. Изменение СОЭ имеют большое
диагностическое и прогностическое значение (таб. 9).
Таблица 9 - Нормативная величина СОЭ
Новорожденные
Мужчины и
дети старше
1 года
Женщины
Беременные
женщины
Пожилые
обоего пола
1-2 мм/ч
1-10 мм/ч
2-15 мм/ч
50-60 мм/ч
15-20 мм/ч
Цель работы – Определить скорость оседания эритроцитов
у человека методом Панченкова
Оборудование: прибор Панченкова, лимоннокислый
натрий, скарификатор, донорская кровь или образцы крови.
ХОД РАБОТЫ
Прибор Панченкова представляет собой штатив, в котором
строго в вертикальном положении закреплены специальные
капилляры. Определение производится в специальных
градуированных капиллярных пипетках, имеющих просвет 1 мм и
длину 100 мм. Они градуированы в миллиметрах (мм). Метка «0»
находится на расстоянии 100 мм от нижнего конца; метка «К»
(кровь) располагается на уровне «0», метка «Р» (реактив) – на уровне
50 мм (рис. 1).
23
Рис. 1 Прибор Панченкова
а – общий вид; б) – капилляр с метками; К – кровь; Р - реактив
1. Капилляр предварительно промыть 3,7% раствором цитрата
натрия. Затем набрать цитрат натрия до метки «Р» и выдуть его на
часовое стекло.
2. В тот же капилляр двукратно набрать кровь до метки «К»).
Количество цитрата и крови может быть разное – 25 мкл цитрата и
100 мкл крови, 50 мкл цитрата и 200 мкл крови, но соотношение их
должно быть обязательно 1:4.
3. Смешать обе порции крови с цитратом на часовом стекле.
Смесь набрать в капиллярную пипетку до метки «0».
4. Капилляр с цитратной кровью поставьте в штатив
вертикально между двумя резиновыми прокладками и оставьте на 1
час. Через час определите величину оседания по столбику плазмы
над осевшими эритроцитами: деление капиллярной пипетки,
соответствующее границе плазмы и эритроцитов, запишите как
величину СОЭ, мм/ч.
5. Важно поддерживать определенную температуру в
помещении – 18-220С (при более низкой температуре оседание
замедляется, при более высокой ускоряется).
24
Оформление протокола
Таблица 10 - Результаты собственных исследований
Пол
СОЭ, мм/ч
Полученное значение
Нормативное значение
Мужчины
1-10 мм/ч
Женщины
2-15 мм/ч
1. Занесите данные исследования в таблицу 10.
2. Сравните полученные результаты с нормативными.
3. Сделайте вывод.
Контрольные вопросы для самостоятельного изучения
1. Суспензионные свойства крови.
2. Что такое СОЭ? Нормативные показатели СОЭ у мужчин
и женщин.
3. Какие факторы оказывают влияние на СОЭ?
4. Причины повышения СОЭ.
5. Причины понижения СОЭ.
6. Какова роль вязкости крови в реакциях оседания
эритроцитов
7. Каково влияние количества форменных элементов крови на
величину СОЭ?
8. Какой реактив и с какой целью используют для определения
СОЭ
9.Особенности СОЭ у детей.
Клиническая интерпретация анализа:
Увеличение СОЭ вызывают –менструальный и
предменструальный период, беременность, инфекционные болезни,
туберкулез, ревматизм, гипо- и гипертиреозы, эндокардит,
инфаркты миокарда, легких и почек, гепатиты, циррозы печени,
язвы желудка и 12-ти перстной кишки, перитонит, абсцесс легкого,
миеломная болезнь, лейкоз, злокачественные опухоли, диабет
Снижение СОЭ вызывают: гипогидратация, ацидоз, кахексия,
желтуха, вирусный гепатит, серповидная анемия, брюшной тиф и
накопление в крови желчных кислот.
25
6. Форменные элементы крови
Лабораторная работа 6.1.
Подсчет количества эритроцитов в крови (в счетной
камере Горяева)
Эритроциты – красные кровяные клетки, выполняют в
организме следующие функции:
дыхательная, регуляция рН крови, питательная, защитная,
участие в процессе свертывания. Эритроциты являются носителями
разнообразных ферментов (холинэстераза, угольная ангидраза,
фосфатаза) и витаминов (В1, В2, В6, аскорбиновая кислота);
Эритроциты определяют групповые признаки крови. Особая
форма эритроцитов приводит к увеличению диффузионной
поверхности, что способствует лучшему выполнению основной
функции эритроцитов – дыхательной. Специфическая форма
обеспечивает также прохождение эритроцитов через узкие
капилляры.
Кровь имеет красный цвет благодаря присутствующему в
эритроцитах белку гемоглобину. Именно гемоглобин связывает
кислород и разносит его по всему организму, обеспечивая
дыхательную функцию и поддержание рН крови. 96% этого
вещества относится на долю белка глобина и 4% - на долю гемма.
Гем –это двухвалентное железо, соединенное с протопорфирином.
Всего молекула глобина содержит 574 кислотных остатка. Основное
свойство гемоглобина – легко присоединять кислород при высоких
концентрациях О2 в среде. И легко отдавать его при низком
напряжении. В норме уровень гемоглобина у мужчин – 130 – 160 г/л,
а у женщин – 115–145 г/л.Обычно его определяют с помощью
гемометра Сали по одноименному методу.
Различают различные виды и соединения гемоглобина:
первоначально эмбрион имеет гемоглобин Р(примитивный), затем у
плода появляется гемоглобин F(фетальный), а после рождения в
основном функционирует гемоглобин А (адультус). Различаются
они и по степени сродства к кислороду.
В зависимости от того, с каким газом соединен гемоглобин.
Различают - окси -, дезокси – и карбгемоглобин. Патологическими
соединениями гемоглобина являются карбоксигемоглобин
(соединение с угарным газом) и метгемоглобин (с измененной
валентностью железа: +3 с низким сродством к кислороду).
26
У мужчин в крови содержится в среднем 130–1б0 г/л
гемоглобина, у женщин – 120–150 г/л. В клинических условиях
принято вычислять степень насыщения эритроцитов гемоглобином.
Это так называемый цветовой показатель. В норме он равен 1. Такие
эритроциты называются нормохромными. При цветовом показателе
более 1,1 эритроциты гиперхромные, менее 0,85 – гипохромные.
Цветовой показатель важен для диагностики анемий различной
этиологии.
Содержание эритроцитов в крови обозначают их числом в
одном кубическом миллиметре или в одном литре крови.
В норме в крови у мужчин содержится 4,0 – 5,0х1012/л, или 4
млн – 5 млн эритроцитов в 1 мкл, у женщин – 4,5х1012/л, или 4,5 млн
в 1 мкл. Повышение количества эритроцитов в крови называется
эритроцитозом, уменьшение эритропенией.
Цель работы. Овладеть техникой подсчета эритроцитов и
усвоить их физиологические функции
Оборудование: микроскоп, смеситель, счетная камера
Горяева, покровное стекло, спирт, вата, скарификатор, разводящая
жидкость (3% раствор хлорида натрия).
ХОД РАБОТЫ
Поместить камеру Горяева под микроскоп и рассмотреть сетку.
I
27
Рис. 2 Подсчет эритроцитов в счетной камере Горяева
I-устройство камеры: 1-предметное стекло; 2-средний брусок;
3-боковые бруски; 4-предметное стекло.
II-порядок подсчета эритроцитов (обозначен стрелками).
III-сетка счетной камеры с эритроцитами при большом
увеличении.
А-смеситель;
Б-схема счетной камеры: отшлифованное толстое плоское
предметное стекло с тремя наклеенными площадками. Средняя из
28
них расположена ниже боковых на 0,1 мм. На ней нанесена сетка.
Над средней площадкой к боковым возвышениям предметного
стекла притирают покровное стекло;
В- сетка камеры. Обычно пользуются камерой с двумя сетками,
разграниченными глубокой поперечной канавкой. Сетка Горяева
состоит из 225 больших квадратов (15х15). Большие квадраты,
расчерченные вертикально и горизонтально на 16 малых квадратов,
чередуются с квадратами, разделенными только вертикальными или
горизонтальными линиями, и квадратами чистыми без линий.
Большие квадраты, состоящие каждый из 16 малых, служат при
счете ориентирами.
2. Слегка увлажнив дыханием покровное стекло, кладут его на
боковые площадки счетной камеры и движением больших пальцев
притирают его до появления цветных колец Ньютона. Пальцами
можно нажимать только над боковыми площадками, так как при
надавливании на середину покровного стекла, то есть
непосредственно над сеткой, оно ломается.
3. Налить в пробирку 4 мл 0,9% раствора хлорида натрия.
4. Ватным тампоном протереть мякоть 4-го пальца левой руки
и скарификатором проколоть палец, отступив от середины на 1-2 мм
влево.
5. Первую каплю крови стереть сухим тампоном. Во вторую
каплю погрузить кончик смесителя, держа его вертикально. Набрать
0,02 мл крови до метки. Выдуть кровь из смесителя в пробирку с
раствором хлорида натрия и промыть его три раза дистиллированной
водой.
6. Кровь тщательно перемешать с раствором, вращая пробирку
между ладонями в течение 2-х минут.
7. Каплю разведенной крови внесите пипеткой или стеклянной
палочкой под притертое покровное стекло камеры, держа конец
пипетки или палочки около края покровного стекла. После
заполнения камеру оставьте на 1-2 минуты в покое для оседания
форменных элементов, затем приступайте к подсчету при малом
увеличении микроскопа в затемненном поле зрения.
8. Эритроциты считайте в 5 больших квадратах сетки,
разграфленных на 16 малых и расположенных по диагонали.
Поскольку распределение клеток в камере может быть
неравномерным, необходимо под микроскопом отыскать левый
29
верхний разграфленный большой квадрат, подсчитайте количество
находящихся в нем эритроцитов, затем по диагонали вниз и направо
найдите следующий разграфленный квадрат и т.д.
9. Найденное в каждом квадрате число эритроцитов заносите в
протокол опыта.
1 квадрат 2 квадрат 3 квадрат 4 квадрат 5 квадрат
10. Во избежание повторного подсчета одних им тех же
эритроцитов руководствуйтесь следующим правилом:
подсчитывайте все эритроциты, находящиеся внутри малого
квадрата; на разграничительных линиях подсчитывают их только
тогда, когда они большей своей половиной заходят внутрь квадрата.
Клетки, пересеченные разграничительной линией пополам,
подсчитывайте лишь на двух сторонах квадрата – левой и верхней;
клетки, выходящие большей своей половиной за пределы
разграничительных линий, совсем не считайте. Результаты подсчета
эритроцитов в каждом из 5 больших квадратов записывайте
отдельно и суммируйте
11. Определите количество эритроцитов в 1 мкл цельной крови.
Для этого полученное число эритроцитов (Э) делим на 80 (в 1
большом квадрате находится 16 маленьких: 5х16=80). Объем
пространства над одним маленьким квадратом равен 1/4000 мм3.
Умножая полученное число на 4000, получаем количество
эритроцитов в 1 мм3 разведенной крови; умножая на 200 (кратность
разведения), получаем количество эритроцитов в 1 мм3 цельной
крови. Итоговая формула для исчисления следующая:
Э х 4000 х 200
Число эритроцитов в 1 мкл = ―――――――
80
где Э – найденная сумма эритроцитов в 5 больших квадратах (80
маленьких) квадратах.
Для получения боле точного результата произведите подсчет в
30
двух сетках и используйте для подсчета средний арифметический
результат.
Оформление протокола
1. Произведите подсчет эритроцитов, согласно инструкции, в 1
мкл крови.
2. Зарисуйте камеру Горяева.
3. Занесите результаты собственных исследований в таблицу
11.
4. Сделайте заключение о соответствии полученных
результатов нормативным.
Таблица 11 - Результаты собственных исследований
Клетки крови
Пол
Количество ед/мкл
Полученные
значения
Норма
Эритроциты
М 4,0-5,0 млн. в 1 мкл крови
Ж 3,7-4,7 млн. в 1 мкл крови
Клиническая интерпретация анализа:
Уменьшение количества эритроцитов имеет место при
кровотечениях, гемолитических, железо- и В
12
(фолиево)-
дефицитной анемиях, лейкозах, метастазах злокачественных
новообразований. Минимальное число эритроцитов, когда еще
продолжается жизнь человека - 1х1012/л.
Увеличение количества эритроцитов выявляют при эритремии
и эритроцитозах. Физиологический (абсолютный) эритроцитоз
наблюдается: у жителей высокогорья, летчиков; после физической
нагрузки; в предменструальном периоде и под влиянием
физиотерапевтических процедур. Патологический эритроцитоз
вызывают: сердечная недостаточность; врожденные пороки
сердца, констриктивный перикардит; эмфизема легких,
пневмосклероз, гипофункция селезенки, эндокринные нарушения
(болезнь Аддисона, ожирение, тетания); трихинеллез, отравление
(СО, бензином, фосфором), полицитемия; острая дистрофия
печени. Патологический (относительный) эритроцитоз вызывают:
выраженная рвота, понос, гломерулонефрит в период кульминации.
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]