Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Общая эпизоотология. Учебное пособие
.pdf
8. При каких условиях возможны процессы самосогревания
в навозе в зимнее время?
9. При каких условиях происходит размножение термогенных
микроорганизмов в штабелях навоза?
10. Что означает понятие барботирование фекальных масс?
11. На какой глубине почвы обнаруживаются наибольшее количество микроорганизмов?
12. Назовите основную микрофлору почвы.
13. От чего зависит разное количество микрофлоры в разных
почвах?
14. Каковы особенности проведения дезинфекции почвы инфицированной споровой микрофлорой?
15. Назовите особенности проведения дезинфекции почвы, инфицированной неспоровой микрофлорой.
16. Назовите особенности проведения дезинфекции поверхностного слоя почвы, инфицированного возбудителем туберкулеза.
17. Назовите особенности проведения дезинфекции поверхностного слоя почвы, инфицированного возбудителем брадзота.
18. Назовите особенности проведения дезинфекции поверхностного слоя почвы, инфицированного возбудителем инфекционной энтеротоксимии.
19. Как провести дезинфекцию почвы, на которой лежал труп
животного, павшего от эмкара?
20. Как провести дезинфекцию почвы при минусовых температурах?
21. Назовите особенности проведения аэрозольной дезинфекции спецодежды в пароформалиновой камере.
22. Как проводится дезинфекция предметов ухода за животными в благополучных хозяйствах?
23. Какие дезинфицирующие растворы используют для дезинфекции спецодежды при вирусных инфекциях?
24. Как часто стирают и дезинфицируют одежду при споровых
инфекциях и зооантропонозах?
25. Каким образом дезинфицируют предметы и оборудование
из металла?
26. Какие препараты используют для дезинфекции доильных
аппаратов?
101
27. Какие препараты используют для дезинфекции молокопровода?
28. Какие препараты используют для дезинфекции сосков вымени?
29. Какие препараты одновременно используют для мойки и дезинфекции молочного инвентаря?
30. Раствором едкого натра какой концентрации обрабатывают помещения для хранения и переработки молока и молочных
продуктов?
102
11. Бактериологический контроль
качества дезинфекции
Бактериологический контроль качества дезинфекции осуществляют сотрудники ветеринарных лабораторий периодически или
в сроки, установленные с учетом эпизоотической обстановки, технологии производства, целей дезинфекции и других конкретных особенностей.
По устойчивости к дезосредствам возбудителей основных инфекционных болезней животных делят на 4 группы:
1. Малоустойчивые – к ним относят возбудителей лейкоза,
бруцеллеза, эшерихиоза, лептоспироза, болезни Ауески, пастереллеза, сальмонеллеза, рожи свиней, микоплазмоза и др.;
2. Устойчивые – к этой группе относят возбудителей аденовирусных инфекций, ящура, оспы, туляремии, орнитоза, диплококкоза,
стафилококкоза, бешенства, чумы, некробактериоза, трихофитии,
микроспории, хламидиозов, риккетсиозов и др.;
3. Высокоустойчивые – возбудители туберкулеза животных
и птицы и паратуберкулеза;
4. Особо устойчивые – возбудители сибирской язвы, анаэробной дизентерии ягнят, анаэробной энтеротоксемии поросят, брадзота, злокачественного отека, инфекционной энтеротоксемии. Качество дезинфекции необходимо контролировать. Для этого через
2–3 ч после дезинфекции берут пробы с пола в местах расположения
задних конечностей животного, с двух стен, из углов и кормушек,
которые затем исследуют в лаборатории, где учитывают наличие показательных микроорганизмов – тест-микробов.
Если дезинфекцию проводили против бруцеллеза, сальмонеллеза, колибактериоза, рожи, пастереллеза, листериоза, пуллороза
птиц, ящура, гепатита утят, показательным микроорганизмом в этом
случае является кишечная палочка.
Отсутствие этого микроба в пробах свидетельствует об уничтожении и вышеуказанных возбудителей болезней. Если же кишечная
палочка будет обнаружена в пробах, взятых после дезинфекции, значит, дезинфекция осуществлена плохо, остались жизнеспособными
и те микроорганизмы, в отношении которых проводили дезинфекцию.
103
При возбудителях туберкулеза, мыта и некоторых других микроорганизмов, более устойчивых, нежели кишечная палочка, показательным микроорганизмом признан стафилококк. Наличие его после дезинфекции свидетельствует о неудовлетворительно проведенном обеззараживании объекта, и, наоборот отсутствие – показатель
эффективного и приведения дезинфекции.
Для выделения культуры кишечной палочки используют среду
Эйкмана с последующим прогреванием и высевом на среду Эндо
или же высевают сразу непосредственно на среду Эндо.
Кроме этого, как для выделения кишечной палочки, так и для
выделения стафилококка можно пользоваться модифицированной
средой Хейфеца, предложенной ВНИИВС.
Выросшую на питательных средах культуру показательного
микроорганизма обязательно исследуют под микроскопом. Первое
ориентировочное определение кишечной палочки производят по изменению цвета питательной среды.
Так, изменение цвета среды из малинового в зеленый или салатный при ее помутнении и газообразовании свидетельствует
о наличии в посевах кишечной палочки. Другие цветовые изменения
среды – желтоватый, розовый, сероватый, обусловленные ростом
посторонней микрофлоры, не учитываются.
Профилактическая и заключительная дезинфекции признаются
удовлетворительными, если нет роста показательного микроба во
всех исследованных пробах, текущая – не менее чем в 90 пробах.
Кроме контроля качества проведенной дезинфекции по бактериологическому тесту, работу дезинфекционного отряда оценивают
и по другим показателям: качество механической очистки помещений; правильность выбора дезинфицирующего средства для уничтожения возбудителя, против которого проводят дезинфекцию; режим
применения средства в соответствии с указаниями по дезинфекции,
дератизации, дезинсекции. К тому же учитывают концентрацию
примененного дезинфицирующего средства, температуру его раствора и количество расходования на 1 м2 площади.
Концентрацию дезинфицирующего средства определяют по
процентному содержанию активно действующего вещества в пробе
оставшегося неизрасходованного раствора. Исследование проводят
в лаборатории в тот же день. Раствор берут в стеклянную посуду,
которую закрывают притертой пробкой.
104
При бактериологическом контроле качества дезинфекции определяют наличие на поверхностях обеззараживаемых объектов жизнеспособных клеток санитарно-показательных микроорганизмов –
бактерий группы кишечных палочек (Escherichia, Citrobacter, Enterobacter), стафилококков (S. aureus, S. epidermatis, S. saprophiticus), микробактерий или спорообразующих аэробов рода Bacillus. Качество
обеззараживания спецодежды контролируют по выделению тестмикроорганизмов на искусственно контаминированных кусочках
тканей, закладываемых в подлежащий обеззараживанию материал.
По наличию или отсутствию бактерий группы кишечных палочек определяют качество профилактической и вынужденной (текущей и заключительной) дезинфекции при бруцеллезе, эшерихиозе,
лептоспирозе, листериозе, болезни Ауески, лейкозе, пастереллезе,
сальмонеллезах, трихомонозе, кампилобактериозе, трипаносомозе,
токсоплазмозе, инфекционном ринотрахеите, парагриппе и вирусной диарее крупного рогатого скота, контагиозной эктиме, инфекционной агалактии и контагиозной плевропневмонии овец и коз,
отечной болезни, инфекционном атрофическом рините, дизентерии,
трансмиссивном гастроэнтерите, балантидиозе, гемофилезной плевропневмонии и роже свиней, ринопневмонии лошадей, пуллорозетифе птиц, миксомотозе кроликов, микоплазмозе птицы.
По наличию или отсутствию стафилококков контролируют
качество текущей дезинфекции при туберкулезе, болезнях, вызываемых спорообразующими микроорганизмами, и экзотических
инфекциях, а также качество заключительной дезинфекции при туберкулезе, аденовирусных инфекциях, ящуре, оспе, туляремии, орнитозе (пситтакоз), диплококкозе, стафилококкозе, стрептококкозе,
некробактериозе, катаральной лихорадке, бешенстве, чуме животных всех видов, злокачественной катаральной горячке, ринопневмонии и паратуберкулезном энтерите крупного рогатого скота, инфекционной катаральной лихорадке, копытной гнили и инфекционном
мастите овец, везикулярной болезни свиней, инфекционной анемии,
инфекционном энцефаломиелите, эпизоотическом лимфангите, сапе
и мыте лошадей, гепатите утят, вирусном энтерите гусят, инфекционном бронхите, ларинготрахеите, болезни Марека, болезни Гамборо, Ньюкаслской болезни, вирусном энтерите, алеутской болезни,
псевдомонозе и инфекционном гепатите плотоядных, хламидиозах,
105
риккетсиозах, энтеровирусных инфекциях, гриппе сельскохозяйственных животных и птицы, трихофитии, микроспории, других
микозах животных и птицы, актиномикозе крупного рогатого скота,
а также болезнях, вызываемых неклассифицированными вирусами,
при дезинфекции вагонов II категории.
Качество заключительной дезинфекции при микозах контролируют также по выделению соответствующих возбудителей.
Качество заключительной дезинфекции при туберкулезе контролируют по выделению стафилококков и микобактерий. При сибирской язве, эмфизематозном карбункуле, брадзоте, злокачественном отеке, других споровых инфекциях и экзотических инфекциях,
а также качество дезинфекции вагонов III категории – по наличию
или отсутствию спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus.
Контроль качества дезинфекции поверхностей объектов. Для
того чтобы получить достоверный результат, необходимо правильно
отобрать и исследовать пробы.
Отбор проб (смывов, соскобов). Пробы отбирают по истечении
экспозиции и до начала проветривания помещений; при дезинфекции спецодежды – по окончании цикла обработки (обеззараживание,
стирка, ополаскивание и отжим).
Пробы для исследования берут с 10–20 различных участков
поверхности и оборудования. При наличии на объекте участков поверхности с механическими загрязнениями пробы материала для исследования берут методом соскобов.
После проведения дезинфекции и последующей экспозиции
с участков, подвергаемых контролю, отбирают пробы стерильными
ватно-марлевыми тампонами, смоченными в стерильном нейтрализующем растворе или воде. Участки площадью 10 см2 тщательно
протирают до полного снятия с поверхности всех имеющихся на ней
загрязнений, после чего тампоны помещают в пробирку с нейтрализующей жидкостью. Плотные загрязнения (корочки) снимают стерильным скальпелем и переносят в эту же пробирку.
Для нейтрализации хлорсодержащих дезинфицирующих
средств применяют раствор тиосульфата натрия (гипосульфита);
щелочных растворов – раствор уксусной кислоты; формалина –
раствор аммиака (нашатырный спирт); кислот, пероксида водорода
и его производных – раствор бикарбоната натрия. При использова-
106
нии для дезинфекции щелочного раствора формальдегида участки
сначала увлажняют раствором аммиака, затем дополнительно –
раствором уксусной кислоты. При дезинфекции средствами, для
которых нет нейтрализаторов, применяют стерильную водопроводную воду.
Пробы-отпечатки на тонкий слой плотной питательной среды
снимают сотрудники, прошедшие специальную подготовку. Предметные стекла с нанесенной питательной средой накладывают на исследуемый объект таким образом, чтобы питательная среда соприкасалась с его поверхностью. Через 2 мин. пробы-отпечатки отделяют
от контролируемого объекта и помещают в ванночки или пробирки,
в которых их доставили к объекту исследований. При взятии проб
с труднодоступных или вертикальных поверхностей время контакта
слоя питательной среды с объектом сокращают до 30 с.
Смывы должны быть доставлены в лабораторию в течение
3–6 ч с момента взятия, а отпечатки – не позднее 2 ч.
Исследование смывов
Каждую пробу отмывают в той же пробирке, несколько раз погружая и отжимая тампон. Затем тампон удаляют, а жидкость центрифугируют в течение 20–30 мин. при 3000–3500 мин–1. Надосадочную жидкость сливают, в пробирку наливают такое же количество
стерильной воды, содержимое перемешивают и снова центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, а из центрифугата делают
посевы. При наличии в смыве грубых механических примесей их
растирают в пробирке стеклянной палочкой, после чего смыв переносят в центрифужную пробирку.
Для индикации кишечной палочки 0,5 мл центрифугата высевают в пробирки с модифицированной средой Хейфеца или КОДА.
Посевы выдерживают в течение 12–18 ч в термостате при температуре 37–38 °С. Изменение сиренево-красного цвета сред (на зеленый
или салатовый), их помутнение и образование газа свидетельствуют
о наличии роста кишечной палочки. Иные изменения цвета (желтоватый, розовый, сероватый), наблюдаемые при росте микроорганизмов других видов, не учитывают.
В сомнительных случаях делают подтверждающий посев
с жидких сред на агар Эндо. Посевы инкубируют в течение 12–16 ч
при температуре 37–38 °С.
107
Для индикации стафилококков 0,5 мл центрифугата высевают
в 5 мл мясо-пептонного бульона (МПБ) с 6,5 % хлорида натрия. Через 22–24 ч инкубирования посевов при температуре 37–38 °С делают пересевы бактериологической петлей на 8,5 % солевой мясопептонный агар (МПА). Посевы выдерживают в термостате в течение 22–24 ч при температуре 37–38 °С. Из выросших культур для
подтверждения роста стафилококков готовят мазки, окрашивают по
Граму и микроскопируют.
Для индикации спорообразующих аэробов смывы перед центрифугированием прогревают в течение 30 мин. на водяной бане при
температуре 65 °С, затем центрифугируют. Из центрифугата каждой
пробы делают посевы в одну пробирку с МПБ и на две чашки с МПА.
Для контроля качества дезинфекции при сибирской язве МПА
может быть заменен дифференциально-диагностической средой.
Посевы инкубируют в течение 24–28 ч в термостате при температуре 37 °С.
При наличии роста на МПА подсчитывают колонии и изучают
их морфологию при малом увеличении микроскопа. В случае возникновения подозрения на выделение возбудителя сибирской язвы
идентификацию такой культуры проводят в порядке, предусмотренном действующими методическими указаниями.
Качество дезинфекции спецодежды, мешкотары и прочих изделий из тканевых материалов, подвергаемых обеззараживанию
в камерах, методом замачивания в дезинфицирующем растворе, кипячением или по режимам одновременной стирки и дезинфекции,
контролируют по выделению тест-культур микроорганизмов из
тест-объектов, закладываемых в подлежащий обеззараживанию материал.
При контроле качества дезинфекции в очагах бактериальных
(кроме туберкулеза) и вирусных инфекций в качестве тест-культуры
используют музейные штаммы кишечной палочки; в очагах туберкулеза и малоизученных вирусных инфекций – золотистого стафилококка; в очагах споровых инфекций – бацилл сибирской язвы (бацилл антракса).
В качестве тест-объектов используют кусочки батистовой
ткани, импрегнированные (пропитанные) соответствующей тесткультурой.
108
Тест-объекты (по 2 шт.) закладывают в стерильные мешочки
размером 5×8 см, изготовленные в виде конверта из той же ткани,
что и подлежащие обеззараживанию изделия. Мешочки с вложенными в них тест-объектами помещают в карман спецодежды или
пришивают нитками к подлежащим обеззараживанию изделиям.
При дезинфекции (методом замачивания в дезинфицирующих
растворах или кипячением) изделия с заложенными в них тестобъектами размещают послойно внизу, в середине и в верхней части
емкости, а при обеззараживании в камере – в разных местах ее. По
истечении экспозиции дезинфекции или цикла стирка-отполаскивание – отжим при использовании метода одновременного обеззараживания и стирки мешочки с тест-объектами помещают в стерильные чашки Петри и доставляют в лабораторию для исследования.
В лаборатории после извлечения из мешочка каждый тестобъект промывают в течение 5 мин. в растворе соответствующего
нейтрализатора и стерильной водопроводной воде (или дважды
в воде, если нейтрализатор неизвестен) и помещают в пробирку с соответствующей питательной средой. Если дезинфекцию проводили
методом кипячения без добавления кальцинированной соды, дополнительно промывать тест-объекты не требуется.
Контроль качества дезинфекции транспортных средств II и III
категорий после перевозки животных, продуктов и сырья животного
происхождения проводят в следующем порядке.
Перед дезинфекцией в транспортные средства закладывают деревянные тесты (по три на каждый объект: пол, стены и потолок)
или с помощью трафаретов на поверхностях очерчивают квадраты
размером 10×10 см, которые контаминируют суточной культурой золотистого стафилококка (при дезинфекции по II категории) и 7-суточной культурой бацилл сибирской язвы при спорообразовании не
менее 90 % (для дезинфекции по III категории). Культуры наносят
из расчета 20 млн микробных клеток на 1 см2 поверхности. В качестве белковой защиты (при закладке тест-объектов) используют
0,3 г стерильного навоза на 100 см2 поверхности или 1 мл сыворотки
крупного рогатого скота.
По истечении экспозиции дезинфекции и времени нейтрализации с поверхности тест-объекта или поверхности транспортного средства отбирают пробы, тщательно протирая стерильными
109
ватными тампонами, предварительно смоченными в стерильной
воде. Тампоны (каждый в отдельности) отмывают во флаконе с 10–20
мл стерильной воды: несколько раз погружают и отжимают. Отжатые тампоны удаляют, а жидкость центрифугируют при 3000–3500
мин. в течение 20–30 мин. После этого надосадочную жидкость сливают, а из центрифугата делают посевы на соответствующие среды.
Для индикации золотистого стафилококка высевают по 0,5 мл
центрифугата в 5 мл 50 % сахарозного мясо-пептонного бульона
(МПБ). Через 24 ч инкубирования в термостате при температуре
37 °С делают пересев петлей на 8,5 % солевой мясо-пептонный агар
(МПА). Посевы выдерживают в термостате в течение 24 ч при температуре 37 °С.
Для индикации возбудителя сибирской язвы центрифугат высевают одновременно на МПА и МПБ. Посевы выдерживают в термостате в течение 7 сут. (при температуре 37 °С). Проведенную дезинфекцию признают удовлетворительной, если рост тест-микробов
во всех исследованных пробах отсутствует при наличии роста в посевах с контрольных тест-объектов.
Метод отпечатков на тонкий слой
плотной питательной среды
Метод наиболее приемлем в условиях промышленного ведения
животноводства на комплексах, птицефабриках и других объектах,
где имеются лаборатории.
Пробирки с пробами-отпечатками, доставленные в лабораторию, помещают на 16–18 ч в термостат при температуре 37 °С.
После инкубирования пробы просматривают на наличие роста микроорганизмов. Если макроколоний нет и среда не изменена,
пробы дальнейшим исследованиям не подвергают. В сомнительных
случаях, когда отсутствует рост макроколоний, но изменены цвет
или прозрачность среды, пробы-отпечатки высушивают на воздухе
до полного подсыхания среды, фиксируют над пламенем, окрашивают по Муромцеву и микроскопируют с целью обнаружить микроколонии.
Учитывают общее число отпечатков, в которых обнаружен рост
микроорганизмов.
110
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]