Диагностика туберкулеза животных

Наиболее чувствительным из вышеперечисленных ме­тодов является биологический, позволяющий обнаружить туберкулез у исследуемого животного, даже если во взятом материале (1 мл) имеются лишь единичные экземпляры ми­кобактерий. Однако бывают случаи, когда из-за снижения вирулентности микобактерий туберкулеза для лаборатор­ных животных под влиянием химиопрепаратов посев из патологического материала может дать положительный ре­зультат при отрицательном исходе биопробы.

Из сказанного можно заключить, что ни один из пере­численных методов не обеспечивает в настоящее время по­лучения достоверного ответа, и только комплексное их при­менение позволяет поставить правильный диагноз.

способность микобактерий к размножению in vitro на пита­тельных средах. В результате размножения отдельных ми­кобактерий на питательной среде образуются видимые про­стым глазом колонии.

в 1882 г. оказалось возможным в результате разработки пи­тательных сред для выращивания культуры микобактерий туберкулеза и их окраски. Однако продолжительное время выделение чистых культур микобактерий из патологическо­го материала удавалось с большим трудом из-за загрязнения питательных сред быстрорастущей посторонней микро­флорой. Лишь после открытия Левенштейном и Сумиоши (1924 г.) возможности использования небольших концентра­ций кислот и щелочей для уничтожения побочной микро­флоры без ущерба для находящихся в патологическом ма­териале микобактерий появилась возможность выделения чистых культур. При культуральном исследовании большое значение имеет предпосевная обработка исследуемого ма­териала. Известно, что при обработке патологического ма­териала для уничтожения побочной микрофлоры часть ми­кобактерий погибает. Поэтому следует использовать такие вещества и в таких концентрациях, которые оказывали бы минимальное губительное действие на микобактерии и мак­симальное – на побочную микрофлору. В настоящее время для обработки патологического материала перед посевом на питательные среды используют следующие методы: Гона, Левенштейна, Сумиоши и др.

Особенности роста культур микобактерий тубер­кулеза на различных средах. Появление первичного роста

микобактерий туберкулеза на различных питательных сре­дах во многом зависит от количества и жизнеспособности микобактерий, находящихся в исследуемом материале. Для нормального роста культур микобактерий большое значе­ние имеют наличие достаточной влажности среды, а также соответствие и постоянство температуры и рН среды. М. bo- vis в первой генерации растет на плотных яичных средах скудно. Рост появляется обычно на 30-60-е сутки в виде мелких круглых, влажных, почти прозрачных колоний цвета слоновой кости (R-форма). Оптимальная температура роста 37 - 38°С. Глицерин задерживает рост культуры, поэтому на плотных яичных средах, содержащих глицерин, она растет

очень плохо или вообще не растет. На мясопептонном ага­ре и бульоне, а также на яичных средах при комнатной (18­22°С) и повышенной (45°С) температуре культура не растет. Поскольку М. bovis является микроаэрофилом, то на среде Сотона с сывороткой и агаром колонии микобактерий ра­стут на глубине 9 - 20 мм от поверхности среды. На жидких питательных средах они образуют нежную пленку. При пас­саже культура растет быстрее (на 15-30-е сутки инкубации).

Биологический метод является наиболее чувствитель­ным при выявлении микобактерий туберкулеза. Диагности­ку туберкулеза проводят на морских свинках и кроликах, а при дифференциации возбудителя туберкулеза птиц – на курах. Морские свинки высокочувствительны к возбудите­лю туберкулеза крупного рогатого скота и человека даже тогда, когда в инъецируемом материале находятся лишь единичные микобактерии. Наиболее часто в лабораторной практике применяют подкожное заражение морских сви­нок, внутривенное – кроликов и кур. Характер процесса, развивающегося в организме лабораторных животных, за­висит не только от вирулентности возбудителя, дозы за­ражения и путей введения возбудителя, но и от резистент­ности макроорганизма. Поэтому для исключения ошибки каждым материалом необходимо заражать не менее двух животных. Для обнаружения в патологическом материале микобактерий туберкулеза используют морских свинок. С этой целью к оставшемуся от посева обработанному пато­логическому материалу (осадку) добавляют 1-2 мл физио­логического раствора, хорошо перемешивают и 1 мл взве­си вводят морским свинкам подкожно в паховую область. После введения морским свинкам материала, содержащего микобактерии бычьего вида, примерно через месяц после заражения на месте введения прощупываются увеличенные лимфатические узлы и иногда образуется язва, не заживаю­щая до конца жизни животного. Морские свинки теряют в

Для подтверждения диагноза из пораженных лимфати­ческих узлов делают мазки-отпечатки, которые окрашивают по Цилю-Нильсену. Если на вскрытии в органах морских свинок не обнаруживают характерных для туберкулеза из­менений, материал подвергают культуральному исследова­нию.

Для дифференциации М. bovis и М. tuberculosis от М. аvium кроме морских свинок используют кроликов и кур. Возбудители туберкулеза бычьего и человеческо­го видов при заражении кур в подкрыльцевую вену в дозе 1 мг/мл физиологического раствора не вызывают заболева­ния. Эти виды возбудителей туберкулеза для них не пато­генны. М. avium при подкожном заражении морских свинок в дозе 1 мг/мл вызывает у них лишь увеличение на месте заражения регионарных лимфатических узлов и быстро за­живающий абсцесс в месте введения культуры. У кроликов и кур, зараженных внутривенно взвесью М. avium в д о з е 1 и 0,01 мг/мл, развивается генерализованный септический процесс, который в большинстве случаев, начиная с третьей недели после заражения, ведет к их гибели. На вскрытии макроскопически видимые специфические для туберкулеза поражения в органах отсутствуют, однако наблюдают уве­личение размеров печени и селезенки. При бактериоскопии мазков, приготовленных из органов, обнаруживают большое количество микобактерий. У кур часть штаммов М. avium обусловливает диссеминированный туберкулезный процесс и гибель птицы в более поздние сроки.

биологическими свойствами, характерными для этих воз­будителей болезни, или получен положительный результат биопробы на туберкулез.