Диагностика туберкулеза животных

С. Asselineau, J. Asselineau (1978) установили, что об­разцы корд-фактора, выделенного из разных видов и даже штаммов микобактерий, различаются строением миколо­вых кислот. О.А. Нестеренко и др. (1985) объясняют нали­чие данного феномена тем, что атипичные микобактерии синтезируют аналоги миколовых кислот.

Проведенные исследования дают основание заклю­чить, что метод микрокультивирования не позволяет диф­ференцировать разные виды микобактерий. К такому же вы­воду пришли Т.И. Байтерякова, Р.Х. Зайнуллина (1981). Они считают, что дифференцировать возбудитель туберкулеза бычьего вида от птичьего и других атипичных микобакте­рий с помощью феномена кордообразования не представля­ется возможным. Но в то же время следует отметить, что метод микрокультивирования является удобным для экспе­риментальных наблюдений за развитием микобактерий.

Если результаты, полученные при использовании та­ких тестов, как скорость роста в субкультуре, рост при раз­ных температурных режимах, рост на среде Левенштейна­Йенсена с 5%-м хлористым натрием, рост на МПБ и МПА, не вызывали сомнений, то результаты, полученные при ис­пользовании тестов с салицилатом и парааминосалицила­том натрия, не у всех штаммов М. bovis были идентичными, что затрудняло их оценку. Литературные данные свидетель­ствуют о том, что микобактерии туберкулеза человеческого и бычьего видов, в отличие от других видов, не растут на

среде Левенштейна-Йенсена с добавлением указанных пре­паратов (Зыков, Ильина, 1978).

М. Tsukamura (1962) отмечает, что достаточно двух по­ложительных тестов с салицилатом натрия и ПАСК, чтобы отнести исследуемую культуру к виду М. fortuitum. Резуль­таты наших исследований также подтверждают этот вывод и согласуются с данными М.П. Зыкова, Т.Б. Ильиной (1978).

амидазной активности, термостабильности каталазы, разру­шения салицилата и парааминосалицилата натрия до кате­хола. Следует отметить, что определение арилсульфатазной и амидазной активности сопряжено с определенными труд­ностями, так как ингредиенты, необходимые для проведе­ния реакций, являются дефицитными и дорогостоящими.

Различная лекарственная чувствительность микобак­терий наряду с ферментативной активностью клетки явля­ется одним из признаков, позволяющих дифференцировать микобактерии, поэтому многие исследователи рекомен­дуют использовать этот признак как один из дополнитель­ных при дифференциации культур (Дыхно, 1964; Рубцова и др., 1981; Керимжанова, Макаревич, 1981). При изучении лекарственной чувствительности у выделенных культур микобактерий нами установлено, что все культуры мико­бактерий туберкулеза бычьего вида обладали тройной чув­ствительностью к туберкулостатическим препаратам I ряда (стрептомицин, изониазид, ПАСК). Культуры микобакте­рий, дифференцированные как атипичные, проявляли высо­кую устойчивость к изониазиду и ПАСК, что согласуется с результатами других исследователей. Отмечено, что ПАСК и изониазид, добавленные в среду Левенштейна-Йенсена в количестве 100,0 и 200,0 мкг на 1 мл среды, способствовали более интенсивному росту быстрорастущих микобактерий. Если к ПАСК и изониазиду высокую резистентность про­являли все культуры атипичных микобактерий, то к стреп­томицину только 69,4% культур. Данные, приводимые в литературе по этому вопросу, весьма противоречивы. Так, P.O. Драбкина (1963), А.И. Тогунова (1966) считают, что скотохромогенные микобактерии II группы по классифика­ции Е.Н. Runyon и быстрорастущие микобактерий IV груп­пы обладают высокой устойчивостью к ПАСК, изониазиду и стрептомицину. По данным S. Virtanen (1963), некоторые штаммы быстрорастущих микобактерий чувствительны к стрептомицину. Это противоречие объясняется многообра­зием штаммов внутри одного вида, а также применением

различных методик по определению лекарственной устой­чивости и разными критериями оценки результатов теста.

С этой целью нами были изучены сравнительные дан­ные интратестикулярного, подкожного и внутрикожного методов заражения лабораторных животных различными культурами микобактерий. Проведенные исследования по­казали, что при интратестикулярном методе заражения мор­ских свинок микобактериями туберкулеза бычьего вида их гибель наступала на 7-12 дней раньше, чем при подкожном. Возможно, данный метод заражения способствует более быстрой генерализации процесса, что подтверждают и бо-

пени вовлечения отдельных органов и тканей в туберкулез­ный процесс, ибо некоторые ткани обладают естественной устойчивостью к данным микроорганизмам. Почки, щи­товидная железа, матка, скелетная система сравнительно устойчивы, в то время как легкие, селезенка и печень — бо­лее чувствительны. Результаты опытов удостоверяют, что семенники являются более чувствительными к возбудите­лю туберкулеза и атипичным микобактериям в сравнении с другими органами. Очевидно, поэтому изменения, возни­кающие в семенниках при интратестикулярном заражении свинок микобактериями, появляются раньше, чем в других органах, и сохраняются в них более длительное время.

ного отделяемого, которые подвергались обратному разви­тию у морских свинок к 20-му дню, у кроликов — к 30-му дню. Нефотохромогенные М. gastri, M. terrae, в отличие от М. avium, вызывали у лабораторных животных быстропро- ходящие кожные реакции, незначительные по интенсивно­сти проявления. Известно, что микобактерии туберкулеза птичьего вида, как правило, являются для кроликов патоген­ными и вызывают их гибель; возможно, этим объясняется различие в интенсивности проявления внутрикожных реак­ций и их продолжительности у кроликов и морских свинок. Скотохромогенные культуры микобактерий приводили к развитию небольших кожных поражений в виде язв, реак­ции сохранялись у кроликов в течение 30-35 дней, у морских свинок — 15-18 дней. Из быстрорастущих микобактерий только М. fortuitum и М. phlei вызывали образование неглу­боких, незначительных по размерам язвочек, которые под­вергались обратному развитию при введении М. fortuitum в течение двух недель, при введении М. phlei у свинок в тече­ние 18 дней, у кроликов — 20-25 дней. Полученные данные согласуются с результатами Г.А. Красникова, А.Н. Харченко (1981), которые отмечали либо отсутствие реакции в месте введения быстрорастущих микобактерий, либо возникнове­ние инфильтратов или небольших кожных дефектов, имею­щих тенденцию к раннему обратному развитию.