Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Болезни рыб, птиц, пчел, пушных зверей, экзотических, зоопарковых и диких животных. Раздел «Болезни промысловых рыб». Учебное пособие
.pdf
зитов (лигула и др.) извлекают, а имеющиеся на серозных покровах
и брыжейке бугорки рассматривают в микроскоп.
Сердце вынимают вместе с крупными сосудами, помещают
в бактериологическую чашку с физиологическим раствором, вскрывают его полости, промывают образовавшийся осадок и рассматривают в микроскоп на наличие возбудителя сангвиниколеза и некоторых метацеркариев.
Печень. При наружном осмотре печени можно обнаружить на
ее поверхности личинок круглых червей и белые бугорки с заключенными в них личинками ленточных червей. Чтобы обнаружить паразитов, обитающих внутри печени, ее делят на небольшие кусочки,
компрессируют и исследуют под лупой, а затем под малым увеличением микроскопа. Желчный пузырь вырезают, помещают на предметное стекло, разрезают ножницами, делают соскоб с внутренней
оболочки стенки пузыря. Соскоб и сам желчный пузырь помещают
между двумя предметными стеклами и исследуют под лупой или
микроскопом. В желчном пузыре можно обнаружить простейших
сосальщиков и личинок ленточных червей.
Селезенку исследуют так же, как печень.
Почки. Для обнаружения паразитов кусочки органа помещают
между стеклами и исследуют под микроскопом. В почках можно
найти крупных паразитов, споровиков, яйца сосальщиков, занесенных током крови.
Плавательный пузырь. Наружную волокнистую оболочку плавательного пузыря снимают. Паразиты, находящиеся в его стенке
и полостях, обычно хорошо видны. Их извлекают и исследуют.
Иногда берут соскоб с внутренней оболочки пузыря больной рыбы
и тщательно исследуют под микроскопом.
Мочевой пузырь. Методика исследования сходна с исследованием желчного пузыря. В мочевом пузыре обнаруживают сосальщиков, споровиков и инфузорий.
Половые железы. Для обнаружения паразитов железу частями
компрессируют между двумя стеклами и просматривают под микроскопом. В половых железах встречаются микросподии и крупные
плероцеркоиды, окруженные фиброматозными сумками.
Желудочно-кишечный тракт. Пищевод, желудок и кишечник
извлекают, освобождают от жира, расправляют и вскрывают, начиная
41
с пищевода. Обнаруженных крупных паразитов (ленточных и круглых червей, сосальщиков) помещают в физиологический раствор.
Содержимое из различных отделов желудочно-кишечного тракта
исследуют компрессорным методом под микроскопом. Затем с помощью скальпеля делают глубокий соскоб со слизистой оболочки
из нескольких мест и исследуют на наличие микроскопических паразитов.
Мышцы. Для обнаружения зараженности рыб плероцеркоидами, лентецами и другими крупными паразитами мышцы разрезают на пластинки толщиной 5 мм и просматривают. Чтобы найти
мелких паразитов, берут небольшие кусочки мышц из различных
частей тела и исследуют компрессорным методом под лупой и под
малым увеличением микроскопа.
Головной и спинной мозг исследуют компрессорным методом.
В этих органах можно обнаружить споровиков Myxosoma cerebralis,
Tetrocotyle variegateu.
Хрящи. Для обнаружения возбудителя миксозомоза (вертежа
лососевых) компрессорным методом исследуют черепные и межпозвоночные хрящи.
Мазки крови окрашивают азур-эозином по РомановскомуГимзе. Готовую краску Романовского перед окрашиванием разводят
нейтральной дистиллированной водой из расчета 2–3 капли краски
на 1 мл воды.
Раствор метиленовой сини перед употреблением разводят дистиллированной водой 1:10 и окрашивают мазки 30 сек., затем промывают водой и дифференцируют в течение нескольких секунд
5–10 %-м раствором танина. Эритроциты окрашиваются в красновато-фиолетовый цвет, плазма простейших кровепаразитов – в яркоголубой, ядра лейкоцитов – в фиолетовый.
Для изучения морфологии паразитических инфузорий их окрашивают железным гематоксилином по Гейденгайну, а также гематоксилином Делафильда или квасцовым кармином.
Паразитических жгутиконосцев окрашивают железным гематоксилином или по Романовскому-Гимзе.
Слизистых споровиков окрашивают 1 %-м водным раствором
метиленового синего 30–60 мин., затем препарат промывают в воде,
последовательно проводят через спирты возрастающей крепости
(70, 80, 96 %-й и абсолютный) и просветляют ксилолом.
42
Трематод и цестод окрашивают квасцовым кармином. Фиксированные в спирте препараты промывают в течение нескольких
часов в проточной или часто сменяемой воде и помещают в краску
от одной минуты до нескольких часов (в зависимости от толщины
гельминта). Продолжительность окраски можно контролировать под
микроскопом. Окрашенные препараты переносят в дистиллированную воду, где в течение нескольких минут их тщательно отмывают
от краски. Отмытых паразитов осторожно сушат фильтровальной
бумагой и проводят через спирты возрастающей крепости (70, 80,
96 %-й), выдерживая в них несколько часов. Обезвоженных паразитов просветляют маслом и ксилолом.
Мелких цестод можно окрашивать молочнокислым кармином
по Блажину. Молочную кислоту разводят в 2 раза дистиллированной
водой, добавляют небольшое количество кармина (в зависимости
от желаемой степени окраски). Жидкость кипятят. Красить лучше
свежие, нефиксированные объекты. Продолжительность окраски
контролируют под микроскопом, а в случае перекрашивания объект
переносят в цельную молочную кислоту для обесцвечивания. Окрашенный препарат промывают 20–60 мин. водопроводной водой и помещают в бальзам.
При окраске крупных цестод этот способ модифицировали. Цестод промывают в проточной или часто сменяемой водопроводной
воде при комнатной температуре летом один день, в холодное время
года – 3–4 дня. Затем их помещают на 4–6 час. в краску (0,3 г кармина на 100 мл 30 %-й молочной кислоты). Интенсивность прокрашивания контролируют под микроскопом. После этого на сутки их
переносят в дистиллированную воду, в которую добавляют 3 капли
раствора сернокислого железа и 2 капли 1 %ного раствора фенола.
Далее цестод переносят на чистое предметное стекло, расправляют
и высушивают при температуре 30–37 °С. Высохший, очень плотно
приставший к стеклу препарат заливают канадским бальзамом или
канифолью, растворенной в смеси, состоящей из равных частей хлороформа и абсолютного спирта.
Для приготовления временных препаратов нематод не окрашивают, а кладут для просветления в неразведенную молочную кислоту
или лактофенольный раствор (2 части глицерина, 1 часть молочной кислоты, 1 часть фенола и 1 часть воды) на 3–10 дней. Мелких
43
гельминтов на 1–2 дня помещают в молочную кислоту (1–2 капли)
и накрывают покровным стеклом.
Постоянные препараты для микроскопического исследования
нематод готовят так. Фиксированных в 70 %-м спирте живых гельминтов через сутки помещают на несколько часов (в зависимости от
величины нематод) в 96 %-й, а затем в абсолютный спирт на 3–5 мин.
После этого их переносят в гвоздичное или хеноподиевое масло
или карбоксилол на 2–5 мин., а затем кладут на чистое предметное
стекло и заливают бальзамом.
Скребней (акантоцефалов) для изучения хоботка и крючков
просветляют. Для этого их из 70 %-го спирта переносят сначала
в 50 %-й глицерин, а затем в чистый. Структуру других органов изучают после полного обезвоживания гельминтов путем постепенного
проведения их через спирты возрастающей крепости. Из абсолютного спирта гельминтов переносят на предметное стекло в каплю
кедрового масла, покрывают покровным стеклом и помещают под
микроскоп.
Паразитических рачков исследуют в той же жидкости, в которой хранят. Красить их не обязательно. Иногда прибегают к окраске
борным кармином, эозином, сафранином и др.
2.7 Токсикологические исследования
Токсикологические исследования проводят при явном подозрении на отравление рыб ядами, содержащимися в сточных водах
промышленных и коммунальных предприятий, или ядами, поступающими с дождевыми или талыми водами с полей, садов и лесных
массивов, подвергавшихся обработке различными пестицидами.
Кроме того, отравления рыб могут происходить при поступлении в рыбоводные пруды сточных вод из животноводческих ферм
и с территорий, на которых хранились минеральные и органические
удобрения, и из других источников.
Отравления рыб диагностировать довольно сложно, так как они
вызываются многочисленными ядовитыми веществами, часто возникают внезапно и проявляются недостаточно специфичными признаками.
44
В связи с разнообразием источников поступления ядов в рыбохозяйственные водоемы перед лабораторным токсикологическим
исследованием отравленных рыб необходимо собрать анамнестические сведения об их отравлении и гибели. При этом очень важно
установить место, время появления, продолжительность заболевания
и гибели рыб, обратив особое внимание на видовой и возрастной состав больных и погибших рыб, а также на наличие других гидробионтов, отравленных ядами сточных вод. Наряду с этим необходимо
проследить пути распространения заболевания рыб – вверх-вниз по
течению реки или по отдельным зонам пруда, озера, водохранилища,
отличающимся по гидрологическим, гидрохимическим и гидробиологическим показателям.
Необходимо собрать и проанализировать данные по динамике
заболеваемости и смертности различных видов рыб с момента возникновения до полного прекращения их гибели с целью дифференциации токсикозов от целого ряда заболеваний. Для исключения
инфекции или инвазии проводят соответствующие исследования на
месте (паразитарные болезни) или в специализированных ветеринарных лабораториях (инфекционные болезни).
Для токсикологических исследований в ветеринарную лабораторию доставляют живую или недавно уснувшую рыбу (не менее
5 экз.), пробы воды, взятые в зоне гибели рыб и в благополучном
участке (в каждой пробе не менее 1 л), пробы грунта из разных зон
водоема, высушенные и растертые (каждая проба не менее 1 кг),
пробы бентоса, фиксированные в 70 %-м спирте (не менее 100–150 г
живой массы), пробы фито- и зоопланктона, фиксированные аналогично бентосу. Весь собранный материал упаковывают в соответствующую тару, опечатывают, снабжая этикетками, и высылают
в соответствующее учреждение, одновременно с актом обследования водоема и сопроводительным письмом. После всесторонних диагностических исследований устанавливают причину болезни и организуют соответствующие противоэпизоотические мероприятия.
2.8 Постановка биологических проб
В ряде случаев для установления окончательного диагноза на
инфекционную болезнь, а также при решении вопроса о снятии
45
карантина или карантинных ограничений с хозяйства ставят биологические пробы. При постановке их с целью определения патогенности возбудителей используют чистые культуры бактерий, вирусов,
грибов. Кроме того, применяют нативные суспензии и взвеси, приготовленные из различных органов и тканей больных или подозреваемых в заражении рыб.
Биопробы ставят в аквариумах, ваннах или бассейнах, создавая
в них оптимальные условия для жизни рыб и размножения возбудителей. Наблюдения ведут ежедневно, учитывают число погибших
рыб, клинические признаки болезни и характер патологоанатомических изменений. Продолжительность опытов устанавливают с учетом инкубационного периода и длительности течения заболевания
в естественных условиях. В опыты отбирают восприимчивых к данному заболеванию рыб из благополучного хозяйства. В каждой серии для заражения и контроля берут по 10 рыб (рис. 1).
2
1
а
3
Рис. 1. Места введения культуры при постановке биологической пробы
методами: 1 – внутрибрюшинной инъекции; 2 – внутримышечной
инъекции и скарификации; 3 – через зонд (Л. Луцкой, 1973)
46
При вирусных болезнях в качестве инфекционного материала
берут свежеприготовленную вируссодержащую суспензию культуры клеток или безбактериальные фильтраты суспензий органов
больных рыб. Количество вируссодержащего материала и способ
заражения подбирают индивидуально для каждого заболевания. Материал вводят внутрибрюшинно, контактным методом, орошением
жабр или выдерживанием рыбы в воде, содержащей вирус. Параллельно ставят контрольные опыты.
Для подтверждения бактериальной природы болезни испытывают чистые культуры. Здоровых рыб заражают 2-суточными бульонными культурами внутрибрюшинно или внутримышечно в дозах 0,1–0,2 мл.
Молодые или старые культуры для биопробы непригодны, так
как у них меняются вирулентные свойства. Музейные штаммы перед
опытом пассируют через восприимчивых рыб.
Для ускорения исследований предварительно патогенность
определяют по ДНК-азной активности выделенных культур.
При постановке биологической пробы для диагностики микозов используют нативный материал, в котором содержится возбудитель на всех стадиях развития, или выращивают патогенные грибы
на специальных питательных средах до стадий, пригодных для заражения. Дозу вводимого патологического материала в каждом конкретном случае определяют титрованием на восприимчивых рыбах.
Биологическая проба считается положительной, если у 80 % зараженных рыб проявляется комплекс клинических признаков и патологоанатомических изменений болезни и погибает не менее 50 %
заболевших рыб при полном сохранении их в контроле, а также при
выделении исходных возбудителей.
По окончании опытов воду в аквариумах обеззараживают, создавая в ней 4 %-ю концентрацию формалина или 10 %-ю концентрацию суспензии хлорной извести. Через 1 час воду спускают в канализационную сеть, а рыб утилизируют. Весь инвентарь и посуду,
бывшие в контакте с больной рыбой, дезинфицируют в 4 %-м растворе формальдегида в течение 1 часа.
При завершении биологической пробы в бетонированных бассейнах, земляных садках, карантинных прудах проводят дезинфекцию воды хлорированием, доводя содержание свободного хлора
47
в воде до 4–5 мг/л. Через 24 часа воду пропускают через известковый
фильтр (используя только свежую негашеную известь). После этого
ложе прудов дезинфицируют негашеной (10 т/га) или хлорной известью (3 т/га) и оставляют без воды в течение 1 месяца.
В случае, если ставится вопрос о снятии карантина или других
ограничений, биопробу проводят непосредственно в прудах хозяйства согласно инструкции по борьбе с соответствующим заболеванием.
Контрольные вопросы и задания
1. С какой целью проводят эпизоотологические исследования
водоема и рыб?
2. Какое количество рыб каждого вида и возрастных категорий
подвергают клиническому осмотру?
3. С чего начинают клинический осмотр рыб?
4. Каковы правила перевозки в ветеринарную лабораторию
больных или подозрительных по заболеванию рыб?
5. Как поступают, если нет возможности доставить в лаборато-
рию живую рыбу?
6. Назовите правила доставки в лабораторию крови, экссудата
и другого жидкого патологического материала?
7. Какой патологический материал берут для вирусологиче-
ского исследования?
8. Откуда у рыб берут кровь для гематологического исследо-
вания?
9. Опишите порядок патоморфологического исследования рыб.
10. Опишите порядок бактериологического исследования рыб.
11. В каком порядке проводят вирусологические исследова-
ния рыб?
12. Каковы правила взятия проб для микологического исследо-
вания?
13. Опишите порядок паразитологического исследования рыб.
14. В каком количестве отбирают рыб для проведения паразито-
логических исследований?
15. Опишите порядок паразитологических исследований рыб.
48
16. В каких случаях проводят токсикологические исследова-
ния рыб?
17. Каковы правила взятия проб воды из водоема при подозре-
нии на отравление рыб?
18. В каких случаях проводят биологическую пробу?
19. От чего зависит достоверность результатов биологической
пробы?
20. По каким показателям определяют результаты биологиче-
ской пробы?
49
Глава 3
Болезни промысловых рыб
Рыбы – водные животные, их существование и жизнедеятельность зависят от качества среды обитания. Если в крупных водоемах, таких как моря и океаны, условия в значительной степени стабильны, то в прибрежных зонах, рыбоводных прудах и аквариумах
он подвержены значительным колебаниям. Различные заболевания
возникают тогда, когда рыбы содержатся в неблагоприятных для
данного вида условиях: переуплотненная посадка, резкие перепады
температуры, недостаток растворенного кислорода, травмирование рыбы в результате небрежного отношения с ней, сублетальные
уровни токсических веществ и т.д.
3.1 Классификация болезней рыб
По этиологическим признакам болезни рыб подразделяются на
незаразные, инфекционные, инвазионные и болезни с невыясненной
этиологией.
Незаразными называют болезни, которые возникают в результате воздействия на организм механических, физических и химических факторов внешней среды. К ним относятся болезни, причиной
которых являются: механические повреждения; болезни органов
дыхания, кровообращения, пищеварения, нервной системы, мочеполовых органов; отравления химическими веществами; нарушения
обмена веществ, авитаминозы и др.
Из незаразных болезней наибольшие потери рыбоводству
приносят заморы рыб и отравления химическими веществами. Заморы возникают в результате недостаточного содержания кислорода
в воде водоемов.
Массовые отравления происходят от действия на рыб ядовитых
химических веществ, поступающих в водоемы вместе со сточными
водами промышленных предприятий, и реже – в результате отрав-
50
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]