Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Микробиология. Ч.3. Мир прокариот. Учебное пособие

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
07.09.2026
Размер:
1 Мб
Скачать
☆
5.1. исполЬзование бактерий в селЬском хозЯйстве
также антибактериальной активностью и стимулируют росто­вые процессы растений. Штаммы Bacillus subtilis используют в фунгицидных препаратах «фитоспорин», «бактофит».
От погодных стрессовых ситуаций растения защищают препараты, включающие ауксины, гиббереллины, кинины и другие фитогормоны, которые вырабатывают микроорганиз­мы. В настоящее время разработано много комплексных пре­паратов пониженного класса опасности, которые не оказыва­ют вредного влияния на человека и насекомых опылителей.
Приготовление кормов
Сено является незаменимым кормом для крупного и мел­кого рогатого скота и лошадей. В хорошо и быстро высушен­ном сене микроорганизмы находятся в состоянии анабиоза. В процессе сушки максимальная активность микроорганизмов приходится на период, когда влажность травы уменьшается на 40–60 %. В это время сено теряет много питательных ве­ществ, которые поглощаются бактериями. Количество саха­ров уменьшается на 20–30 %, декстринов на 10–45 %, крах­мала на 2–28 %, жира на 10–15 %, белка на 10–40 %. При дальнейшем снижении влажности активность микрофлоры затухает и при полном высушивании практически прекра­щается. В сухом и уплотнённом состоянии сено может долго храниться, однако при намокании сразу происходит активи­зация микрофлоры, что приводит к порче продукта. Процесс сопровождается выделением тепла, температура повышается до 90° и более. Сено может даже самовоспламениться, так как к сильному разогреву добавляется выделение бактериями горючих газов — водорода и метана. Гниющее сено нельзя использовать в качестве корма, т. к. многие бактерии и грибы выделяют токсичные вещества.
Заготовка растительной биомассы впрок с наименьшими потерями питательных веществ осуществляется путём сило­сования. Подвергшийся спонтанному брожению корм хорошо хранится, не боится сырости и перепадов температуры. Заго­товку травы для силосования можно проводить и в дождли­вую погоду. Существуют два способа силосования — холодный и горячий. При холодном силосовании траву закладывают в бурты, ямы, траншеи или башни и плотно утрамбовывают.
101
102
5. применение микроорганизмов
На начальном этапе функционируют Bacterium herbicola (40 %) и Pseudomonas fluorescens (40 %). Молочнокислые бак- терии начинают активизироваться, когда содержание кисло­рода в среде уменьшается, и создаются микроаэрофильные условия. В процессе силосования участвует большая группа бактерий — Lactobacillus plantarum, L. brevis, Streptococcus lactis, St. thermophilus, Betabacterium breve и др. Присутст­вуют также клостридии и бактерии кишечной группы, однако при повышении кислотности гнилостные бактерии погибают. Улучшению силосования способствуют сахара, а белки, напро­тив, препятствуют, так как они нейтрализуют ионы водорода, что уменьшает кислотность. При недостатке сахара активи­зируются клостридии, которые выделяют масляную кисло­ту, и вкус корма портится, силос прогоркает. Силос нужно хранить в уплотнённом и изолированном от доступа воздуха виде, иначе активизируются плесневые грибы, которые не бо­ятся повышенной кислотности. Для ускорения и улучшения силосования в предварительно измельчённую траву добавляют специальную закваску, соль и фермент амилазу.
Технологию горячего силосования применяют для грубых и малоценных кормовых трав. В аэробных условиях мацера­ция грубых волокон идёт более эффективно, но при этом теря­ется много ценных питательных веществ. Для горячего сило­сования травяная масса раскладывается рыхло, слоем не выше полутора метров. Следующая порция добавляется не раньше, чем через два дня, когда температура поднимается до 50°. Осаждение нижних слоёв происходит под тяжестью верхних без специального уплотнения. В нижних слоях постепенно за­тухают аэробные процессы и включаются анаэробные. Молоч­ную кислоту в процессе горячего силосования выделяет термо­фильная сенная палочка Bacillus subtilis. Последний верхний слой утрамбовывается и хранилище запечатывается. Хранить силос горячего приготовления нужно без доступа воздуха. При силосовании широко применяются ферментативные препараты и закваски чистых культур молочнокислых бактерий, что по­зволяет заготавливать корма высокого качества даже из трудно силосуемых растений.
Для обогащения кормов белковыми компонентами также используются продукты микробиологических производств. На отходах сахарной, спиртовой, целлюлозной промышлен-
5.2. применение микроорганизмов в пищевой промышленности
ностей освоено получение дрожжей и биологически актив­ных добавок, которые вырабатываются микроорганизмами: Pseudomonas fluorescens (P. liquifaciens) производит аспара­гиновую кислоту; Brevibacterium rium — лизин; Micrococcus glutamatus — глутамат; Enterobacter aerogenes — валин; аце­то-бутиловые бактерии синтезируют рибофлавин; актиномице­ты — цианокобаламин (витамин В12). Для снижения активно­сти патогенных бактерий, уменьшения негативного действия гнилостной микрофлоры, усиления секреции пищеварительных ферментов и улучшения аппетита в корма добавляют вещества антибактериальной природы, например, бацитрацин (продукт жизнедеятельности Bacillus licheniformis) и кормогризин, выде- ляемый актиномицетами. Недопустимо применение медицин­ских препаратов, используемых для лечения людей, что, к со­жалению, не редко нарушается и приводит к накоплению анти­биотиков в мясе и через него в организме человека.
5.2. Применение микроорганизмов в пищевой промышленности
Хорошо известна основополагающая роль микроорганиз­мов и их метаболических процессов в производстве кисломо­лочных продуктов, в хлебопечении и производстве алкоголь­ных продуктов (вина, пива и т. д.).
Производство кисломолочных продуктов основано на го­моферментативном молочнокислом брожении. В естественных условиях молочнокислые бактерии обитают на слизистой вы­мени коров и оттуда попадают в молоко, вызывая его про­кисание. За счет естественной микрофлоры молока получа­ют деревенские продукты — простоквашу, сметану, творог. В промышленном производстве молоко сначала стерилизуют, а потом добавляют стартовые культуры бактерий. Для при­готовления таких продуктов, как йогурт, ряженка, варенец, мацони, ацидофилин, используются термофильные лактобак­терии — Streptococcus thermophilus, Lactobacillus bulgaricus, L. acidophilus и др., которые развиваются при температуре 35–40 °С. Кефир, кумыс, айран, тан содержат некоторое ко­личество этилового спирта — продукта жизнедеятельности дрожжевых грибков, входящих в состав закваски, наряду
103
104
5. применение микроорганизмов
с молочнокислыми бактериями. Широко применяется агре­гация микроорганизмов под названием «кефирный гриб», представляющая собой хрящеватые, морщинистые комоч­ки, состоящие из кефирных дрожжей и видов Lactobacillus иStreptococcus. Вприготовлении кумыса помимо Lactobacillus bulgaricus принимает участие микроорганизмы рода Torula. Наиболее ценным молочным продуктом является сыр. Про­цесс сыроварения состоит из двух этапов. Первый этап — створаживание, которое проводится либо нагреванием кислого молока с последующим отделением белковой твёрдой фракции от жидкой сыворотки, либо с использованием сычужного фер­мента, выделяемого пропионовокислыми бактериями. На сы­чужном ферменте делаются твёрдые и наиболее дорогостоя­щие сорта сыра. Второй этап — созревание — очень сложный и длительный процесс, в котором участвуют бактерии или грибы. В молодом сыре весь азот находится в нерастворимом состоянии в белке. По мере созревания белки гидролизиру­ются сначала до полипептидов, а потом и до аминокислот. В твёрдых сырах белок расщепляется на 25–35 %, а в мяг­ких — почти полностью. В созревании сыра принимает учас­тие целый ряд бактерий — Streptococcus lactis, S. cremoris, Lactobacillus, Propionobacterium, а в сырах с плесенью пени­цилл (Penicillium roqueforti), придающий специфический вкус и аромат. Квашение овощей и грибов проводят гетерофермен­тативные молочнокислые бактерии Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum и др., которые выделяют не только молочную, но и уксусную кислоты.
В производство алкогольных напитков в большинст­ве случаев используются дрожжи (сумчатые грибы). В ес­тественном брожении виноградного сока участвуют винные дрожжи Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoides, постоянно обитающие на поверхности плодов и листьев. На предпри­ятиях применяют чистые культуры определённых штаммов дрожжей, которые добавляют в предварительно простерили­зованный сок. На этапе созревания вина в процесс могут во­влекаться молочнокислые бактерии Pediococcus, Leuconostoc, Lactobacillus, которые частично переводят очень кислую ди­карбоновую яблочную кислоту в менее кислую молочную. При этом не только снижается общая кислотность вина, но и обо­гащается его ароматический букет. Игристые вина подвергают-
5.2. применение микроорганизмов в пищевой промышленности
ся вторичному спиртовому брожению под давлением в специ­ально закупоренных бутылках. Газирует вино выделяющийся углекислый газ. Херес получают добавлением в молодое вино спирта, доводя содержание алкоголя до 15 %. Креплёное, та­ким образом, вино оставляется на воздухе и на его поверх­ности образуется плёнка из хересных дрожжей Saccharomyces beticus subsp. fermenti и S. cheresiensis, которые переводят часть спирта в ацетальдегид и образуют компоненты специфи­ческого хересного букета. Десертные вина, которыми славится юг Франции, отличаются сладким вкусом и несравненным бу­кетом благодаря грибку Botrytis cinerea, которым специаль­но заражают виноград перед сбором. B. cinerea сбраживает только глюкозу, фруктоза остаётся и придаёт вину сладость. Кроме того, он уменьшает кислотность вина, разлагая часть яблочной кислоты до СО2 и Н2О.
Производство пива также основано на спиртовом броже­нии. Подготовленное пивное сусло заквашивают чистой куль­турой пивных дрожжей. Штаммы пивных дрожжей — это продукт длительной селекции. Они не встречаются в природе и существуют только как пивная закваска, которая поддер­живается в лабораторных или домашних условиях. Пивные дрожжи делятся на верховые и низовые. Верховые дрожжи всплывают, так как брожение идёт очень бурно, и выделят­ся много газов. Таким брожением получают крепкое пиво, например, английский эль. Низовые дрожжи работают мед­ленно и при более низких температурах (12–15°) по сравне­нию с верховыми (20°). Они выделяют мало газов и остают­ся на дне в осадке. В производстве рисового напитка сакэ помимо дрожжей участвуют различные микроорганизмы — осахаривание проходит под действием амилазы, выделяемой грибком Aspergillus oryzae, кисловатый вкус напитку придаёт молочная кислота, образующаяся в результате действия мо­лочнокислых бактерий. В производстве пульке и текилы при­нимает участие Zymomonas mobilis, сбраживающий сок голу­бой агавы.
Пекарские дрожжи, которые производят в промышлен­ных масштабах — это видоизменённые верховые пивные дрожжи.
Натуральный уксус — продукт жизнедеятельности уксус­нокислых бактерий. Этанол в аэробных условиях окисляется
105
106
5. применение микроорганизмов
до уксусной кислоты бактериями родов Gluconobacter и Acetobacter. Технологии получения натурального винного уксуса не изменились за много столетий. Один из способов, называемый Орлеанским, заключается в выдерживании на от­крытом воздухе заполненных вином деревянных чанов. Через некоторое время на поверхности вина образуется студенистая плёнка, и вино превращается в уксус, при этом микроэлемен­ты и вещества винного букета сохраняются. Для получения уксуса таким способом требуется несколько недель. Более быстрый способ позволяет свести процесс до 4–5 дней. Чан заполняется стружками, на поверхности которых образуется плёнка из уксуснокислых бактерий. Вино порциями впры­скивается в чан и параллельно вдувается воздух. Большая поверхность соприкосновения субстрата с бактериями значи­тельно ускоряет процесс.
5.3. Использование микроорганизмов в металлургии
На протяжении всего периода добычи меди, начиная с античных времен, используется гидрометаллургический метод, но возможность участия бактерий в окислении меди и других металлов была показана только в 1922 году, когда В. Рудольф и Л. Хельброннер обнаружили рудничные бакте­рии, окисляющие пирит. В 1947 году А. Колмер и М. Хин­кель выделили чистую культуру Thiobacillus (Acidithiobacillus) ferrooxidans, экспериментально доказав микробиологическую природу процесса. Thiobacillus ferrooxidans — литоавтотроф­ная ацидофильная тионовая бактерия (рН 1,0–4,8, opt. 2–3; opt. t ~ 28° С), способная окислять соединения двухвалентно­го железа и других металлов с переменной валентностью (Ni, Se, Mo, As, U и др.), участвует в окислении более 20 нераст­воримых сульфидных минералов тяжёлых металлов (Cu, Zn, Pb, Sb, Hg). Позже было показано, что в сульфидных рудах распространены и другие бактерии, окисляющие Fe2+ и суль­фидные минералы: Leptospirillum ferrooxidans, Thiobacillus (Acidithiobacillus) thiooxidans, T. caldus, Sulfobacillus thermosulfidooxidans, Sulfobacillus acidophilus и др. а так­же археи Acidianus brierleyi, Sulfolobus metallicus и др.
5.3. исполЬзование микроорганизмов в металлУргии
Рудные бактерии относятся к ацидофилам с оптимумом рН около 1,5–3,0. Наряду с мезофильными, среди них есть и тер­мофильные бактерии (opt. t ~ 50–60° С).
В условиях естественного залегания руд активность рудо­окисляющих бактерий сдерживается отсутствием кислорода. При разработке сульфидных месторождений руды вступают в контакт с воздухом, и в них активируются микробиологи­ческие процессы, приводящие к выщелачиванию металлов. Эти процессы нашли применение и в металлургии. Тионовые бактерии ускоряют растворение халькопирита в 12 раз, арсе­нонирита и сфалерита в 7 раз, ковелина и борнита в 18 раз по сравнению с обычными химическими методами. Выще­лачивание меди с помощью Th. ferrooxidans запатентовано в США в 1958 году. Теперь этим способом в мире ежегодно добывают сотни тысяч тонн меди, или примерно 5 % от ее об­щей добычи, при этом себестоимость меди в 1,5-2 раза ниже, чем при обычных гидрометаллургических или пирометаллур­гических способах.
Современного развития биогидрометаллургия достигла к началу 80-х годов ХХ века. В промышленных масштабах бактериальное выщелачивание применяется для извлечения металлов из руд в США, Канаде, Перу, Испании, Португалии, Мексике, ЮАР, Австралии, Финляндии и других странах. Основа технологии бактериального выщелачивания состоит в орошение отвалов мелкодробленой руды растворами, содер­жащими серную кислоту, ионы железа, солей калия, азота, фосфора и культуру тионовых бактерий. Образующаяся пуль­па перемешивается и аэрируется в специальных ёмкостях, при этом выщелачивающий раствор обогащается извлекаемы­ми из руды ионами металлов. Затем раствор собирают в от­стойниках и извлекают из него металлы одним из физико­химических методов (электролизом, осаждением, экстракцией растворителями в виде комплексных соединений и т. д.).
Общую схему реакции выщелачивания можно предста­вить уравнением: MS + 2O2 → MSO4, где М — двухвалентный металл. Например, выщелачивание меди из халькопирита или из ковеллина можно описать следующим образом:
107
4CuFeS 2 + 17O2 + 2H2SO4 → 4CuSO4 + 2Fe2(SO4)3 + 2H2O
CuS + 2O2 → CuSO
4
108
5. применение микроорганизмов
Из медно-цинковых концентратов за 72–96 ч в раствор извлекаются до 25 % Cu, 90 % Zn и Cd, из свинцовых концен­тратов можно полностью извлечь Cu, Zn и Cd.
В настоящее время разработаны методы и технологии выщелачивания многих металлов и даже урана, разделения сложных руд, извлечения золота из сульфидных минералов с использованием бактерий.
В арсенопирит, антимонит и другие минералы бывают включены мельчайшие частицы золота, которые можно осво­бодить при окислении сульфидов. В золотосодержащих мы­шьяковистых концентратах арсенопирит (FeAsS) практически полностью разрушается за 120 ч, что позволяет очистить кон­центраты от токсичных примесей мышьяка и при последую­щем цианировании извлечь до 90 % золота.
2FeAsS + 7O2 + 2H2O → 2FeAsO4 + 2H2SO4
Сходным путем получают серебро из содержащих марга­нец серебряных руд.
В окислении уранинита Thiobacillus ferrooxidans при­нимает, вероятнее всего, косвенное участие. Оксид урана IV окисляется ионами Fe3+, образующимися при окислении пи­рита, содержащегося в урановых рудах.
UO2 + 2Fe3+ → UO
2 +
2Fe2+ + 1/2O2+ 2H+ → 2Fe
+ 2Fe
2 +
3 +
+ H2O
Бактериальное выщелачивание обеспечивает комплексное и более полное использование минерального сырья, не требу­ет создания сложных горнодобывающих комплексов, эколо­гически безопасно, высокоэффективно, позволяет значитель­но уменьшить потери, возникающие при переработке бедных и сложных руд, когда тысячи тонн металлов теряются в виде шлаков и «хвостов».
В настоящее время развиваются и другие методы био­геотехнологии — удаление серы из углей, борьба с метаном в угольных шахтах, повышение нефтеотдачи пластов и др.
5.4. исполЬзование микроорганизмов в очистке окрУжающей среды
5.4. Использование микроорганизмов в очистке окружающей среды от загрязнений
Участие микроорганизмов вразложении
органических загрязнений
Микроорганизмы могут рассматриваться как фактор био­логического восстановления («самоочищения») почв и водое­мов от загрязнений, в первую очередь органикой. Основными загрязнениями почв выступают нефтепродукты (до 50 % всех загрязнений). Особым видом загрязнений с XX века стали чужеродные для природы вещества — ксенобиотики (синтети­ческие полимеры, красители, пестициды, лекарства, моющие и чистящие средства и др.), плохо поддающиеся разложению и активно накапливающиеся в окружающей среде.
Микроорганизмы принимают участие как в аэробных, так и в анаэробных процессах «самоочищения». Они быстро приспосабливаются к использованию новых веществ за счёт перестройки их ферментативного аппарата. В аэробных усло­виях в утилизации трудно разлагающихся веществ ведущую роль играют окислительные процессы, такие как гидрокси­лирование, декарбоксилирование, гидролиз эфирных связей, окислительное расщепление ароматических колец. В анаэ­робных условиях осуществляются различные восстановитель­ные процессы: восстановительная трансформация (перевод нитрогруппы в аминогруппу), восстановительное дегалогени­рование, насыщение связей, восстановление альдегидов и ке­тонов в спирты, а также гидролиз и конденсация. Наибо­лее успешными разрушителями ксенобиотиков выступают:
Pseudomonas, Alcaligenes, Acinetobacter, Flavobacterium, Arthrobacter, Nocardia, Rhodococcus, Bacillus. При этом луч-
ше справляются с утилизацией ксенобиотков микробные со­общества, где осуществляется синтрофия с межвидовым пе­реносом водорода, ацетата, формиата и других веществ, чем отдельные бактерии.
Разложение алифатических углеводородов начинают с окис­ления концевой метильной группы под воздействием моно­оксидаз через спиртовую группу до кислотной. Углеводороды с короткой цепью легче поддаются разложению. Длинно-
109
110
5. применение микроорганизмов
цепочечные углеводороды доступны только некоторым ми­кроорганизмам, например, Pseudomonas, Agrobacterium, Corynebacterium и другим актинобактериям. Ароматические соединения начинают видоизменяться в катехолы путём вве­дения гидроксильных групп. Некоторые виды Pseudomonas имеют фермент диоксидазу, который способствует разры­ву связей в кольце ароматических соединений. Пероксида­зы стрептомицетов трансформируют молекулы азокрасите­лей в катион-радикалы. В анаэробных условиях бактерии Proteus, Enterococcus, Pseudomonas, Streptococcus faecalis, имеющие азоредуктазы, преобразуют азокрасители в арома­тические амины. Метаногены, сульфат и нитратредукторы успешно разлагают гетероциклические соединения (индо­лы, производные пиридина, фураны, никотиновую кислоту). Пластик исинтетические ткани подвергаются воздействию про­теиназ, вырабатываемых некоторыми бактериями и грибами. Хуже всего поддаются разложению полимерные смолы (по­лиэтилен, полипропилен, полистиролы и др.). Однако и они, хотя и очень медленно, но всё же разрушаются в аэроб­ных условиях грибами и бактериями из родов Streptomyces,
Arthrobacter, при высокой температуре к ним подключаются Bacillus subtilis, B. mycoides, Aerobacter aerogenes. Полиме-
ры разлагаются на растворимые олигомеры под действием бактериальных ферментов, принимающих участие в перера­ботке лигнина. Микроорганизмы природных сообществ лучше приспосабливаются к использованию ксенобиотиков для своих нужд по сравнению с лабораторными культурами.
Естественные природные процессы «самоочищения» протекают медленно, и лимитируются многими факторами, в первую очередь уровнем кислорода, малой растворимостью веществ, очаговой концентрацией загрязнений, недостатком доступных соединений азота и фосфора и др. С целью ин­тенсификации процессов биологической очистки необходимо рассосредоточение и растворение загрязнений, внесения ко­субстратов (кислорода и минеральных солей). Для улучше­ния аэрации, например, разработаны способы подача в почву по трубам кислорода под давлением. Внесение веществ, дефи­цитных для бактерий, способствует разложению ксенобиотиков, так, использование азотных и фосфорных удобрений ускоряет ликвидацию разливов нефти.
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]