Гигиена сельскохозяйственных животных. Ч.2. Гигиенический контроль воды и кормов. Учебно-методическое пособие

раза в неделю. Культивируют инфузорий при температуре

24–26 ºС.

Проведение испытания начинают с отбора пипеткой тесторганизмов, сконцентрированных вокруг, корма в чашке Петри и внесении их по одной капле в каждый микроаквариум, в микроаквариум попадает около 20 шт. инфузорий. Биотестирование проводят в микроаквариумах с рабочим объёмом 0,4 мл, высверленных и отполированных в пластине из оргстекла (10 рядов по 5 шт. в каждом). Для тестирования одной пробы используют (5 микроаквариумов).

При пересадке инфузорий пользуются одной пипеткой (культуральной), а при внесении в микроаквариум пользуются другой пипеткой (опытной) подготовленной для тестирования пробы. Регистрация тесторганизмов осуществляется визуально с помощью бинокулярного стереоскопического микроскопа в микроаквариумах, которые полностью попадают в поле зрения микроскопа при увеличении x8.

Через 1 ч после внесения пробы в случае токсичности комбикорма происходит гибель инфузорий, величина которой зависит от степени токсичности корма. Погибшие организмы полностью лизируются, т. е. распадаются, в результате чего легко осуществить строго количественный подсчёт выживших инфузорий.

Порядок проведения испытания следующий:

инфузории под бинокуляром в массе отбирают культуральной пипеткой из чашки Петри, где они сконцентрированы вокруг корма, и по одной капле помещают в каждый из пяти микроаквариумов, при этом в каждую каплю попадает примерно от 10 до 20 шт. инфузорий (эту численность используют в опыте);

просматривают под бинокуляром численность инфузорий в каждом микроаквариуме и, если их слишком много в одном и не достает в других, то инфузории более-менее равномерно распределяют в микроаквариумы той же пипеткой;

101

после распределения инфузорий в каждый микроаквариум вносят опытной пипеткой по 2 капли приготовленной для биотестирования пробы;

через 5 мин подсчитывают инфузории в каждом микроаквариуме и заносят их численность в журнал;

после подсчёта инфузорий в микроаквариумы (до 3/4 их объёма) вносят опытной пипеткой приготовленную для биотестирования пробу и регистрируют время в журнале;

через 1 ч экспозиции вторично подсчитывают численность инфузорий;

рассчитывают численность инфузорий через 1 ч экспозиции в % от численности посадки:

где N – % отсадки инфузорий через 1 ч экспозиции;

– среднеарифметическое (из пяти исследований) количество инфузорий в начале опыта;

– среднеарифметическое (из пяти исследований) количество инфузорий через 1 час экспозиции;

100 – перевод в %.

12.9.Результаты определения

Взависимости от степени токсичности исследуемого корма через 1 ч наблюдается различный процент выживания инфузорий от численности их посадки. Степень токсичности корма определяют по таблице 21. В случае положительной биопробы для исключения влияния на её результаты используемого в ходе биопробы качества ацетона и отстоянной воды готовят 1%-ный раствор использованного ацетона на отстоянной воде

вкотором инфузории, в случае доброкачественности этого раствора в течении 1 ч должны оставаться живыми. Технический ацетон при проведении биопробы не используется.

102

Таблица 21

Оценка степени токсичности исследуемого корма

Для проведения определения токсичности кормов биопробой с использованием инфузорий потребуется:

Оборудование и материалы: Весы лабораторные 4 класса;

мельница электрическая лабораторная; микроскоп бинокулярный стереоскопический (МБС); шкаф сушильный; блок луночных микроаквариумов; колбы конические ёмкостью 50–100 мл; химические стаканы ёмкостью 100 мл; шприцы многоразового пользования ёмкостью 1 мл; пипетки мерные Мора на 10 мл и 15 мл; пробирки с притёртой пробкой ёмкостью 25 мл; пробирки ёмкостью 5 мл; штатив для пробирок; часы песочные на 2 минуты; пипетки для пересадки инфузорий; чашки Петри; дрожжи пекарские прессованные – 50 г; бумага фильтровальная; карандаш по стеклу; ацетон – 1,5 л на 100 анализов; сито с ячейкой 1,0 мм.

Корм для инфузорий – сухие пекарские дрожжи, которые готовят следующим образом: свежие прессованные пекарские дрожжи – 50 г измельчают и высушивают до постоянного веса в бытовом холодильнике, после чего хранят в чистой баночке с притёртой крышкой. Срок хранения высушенных дрожжей в холодильнике – 12 мес.

12.10. Характеристика, отбор, транспортировка, содержание (культивирование) стилонихий

Стилонихия широко распространена в пресных водоёмах. Она обитатель вод с большим содержанием органического

103

вещества, отмирающих растений, ила и т. п. сапробионт. Её пищей служат бактерии, жгутиконосцы, одноклеточные водоросли, детрит. Выделяют инфузорий из природных вод методом концентрации отобранной пробы объёмом 1–3 л до 40 мл путём фильтрации через мембранный фильтр № 6. Концентрат с фильтром помещают в чашку Петри, осадок с фильтра осторожно смывают и добавляют корм – одну гранулу сухих пекарских дрожжей размером около 1 мм3. Через 1–2 сут происходит массовое развитие инфузорий как в количественном отношении, так и в смысле видового разнообразия. Для выделения стилонихии в культуру производят её последовательное пересаживание (для избавления от сопутствующих видов) в микроаквариумы из оргстекла объемом 0,4 мл.

Стилонихию можно также выделять из комнатных аквариумов, в которых она часто присутствует. Для этого на дно аквариума помещают кусочек сухих пекарских дрожжей объемом около 1 мм3. Через 1 ч среду вблизи корма отбирают пастеровской пипеткой в чашку Петри. Процесс выделения в культуру такой же, как и в первом случае.

Культивирование проводят при комнатной температуре 18–28 °С и естественном освещении, избегая прямых солнечных лучей. Можно использовать лампу дневного света, устанавливая её сверху на расстоянии 1 м.

Наиболее простой средой для культивирования инфузорий (культурная среда) является водопроводная вода, которую отстаивают в закрытых ватным тампоном колбах в темноте в течение 1 недели, фильтруют через двойной слой фильтровальной бумаги и однократно стерилизуют на кипящей водяной бане в течение 40 мин.

Инфузории могут исчезнуть в результате: большого скопления; саморазложения за счёт перекорма; резкой смены температуры; нечисто вымытой посуды после порошка (лучше мыть хозяйственным мылом).

Транспортируют культуру инфузорий в стеклянной посуде, не допускается перегрева и переохлаждения. Период акклиматизации к лабораторным условиям 24 ч.

104

Вид сбоку

Вид с брюшной стороны

Рис. 1. Брюхоресничная инфузория Stilonihia mytilus: 1 – фроитальные цирры, 2 – мембранеллы адоральной зоны, 3 – перистом с околоротовыми ресничками и мембраной, 4 – хвостовые (каудальные) цирры, 5 – пищевые вакуоли, 6 – макронуклеус, 7 – микронуклеус, 8 – спинные щетинки, 9 – сократительная вакуоль

Занятие 13. Профилактика отравлений сельскохозяйственных животных ядовитыми и вредными растениями

В практике работы ветеринарного специалиста и зооинженера встречаются случаи массовых отравлений сельскохозяйственных животных при поедании ими ядовитых растений непосредственно в травостое или в сене.

Для профилактики отравлений сельскохозяйственных животных и быстрой диагностики специалист должен знать ядовитые и вредные растения, встречающиеся в зоне его работы.

Сцелью обеспечения изучения большой группы ядовитых

ивредных растений рекомендуется разделить их на определённые группы с учётом внешних клинических признаков, проявляющихся у животных при поедании ядовитых растений (приложение А).

Студент должен найти в гербарии указанные в схеме растения и данные о них по каждой группе кратко записать в тетради по следующей форме:

105

название растения (русское, латинское);

семейство;

отличительные признаки: а) стебель; б) лист;

в) соцветие (цветки); г) плод;

зона распространения;

для каких видов животных ядовито растение;

какие части растения ядовиты;

действующие начала.

Например, растение, при поедании которого важным клиническим признаком является только возбуждение:

белена черная, Hyoscuamus nigeru;

семейство пасленовых;

отличительные признаки:

а) прямостоячий толстый стебель высотой до 1 м; б) листья крупные, серо-зелёные, матовые, нижние круп-

новыемчатые на черенках, верхние сидячие, яйцевидные; в) цветки крупные, почти сидячие, воронкообразным вен-

чиком, грязно-жёлтого цвета с фиолетовыми жилками; г) плод-кувшинообразная коробочка. Встречается на пус-

тырях, засорённых огородах, на дворах возле амбаров и сараев. На лугах и полях попадается редко. Распространена широко в Европейской части РФ, на Кавказе, в Крыму, Сибири, Средней Азии, на Дальнем Востоке.

В литературе и практике имеются данные отравления беленой крупного, рогатого скота. Специальными опытами была доказана возможность отравления птиц семенами белены.

Ядовиты все части растения как в свежем, так и в высушенном, виде. Силосование тоже, не влияет на ядовитость белены. Наиболее ядовиты семена. В растении содержатся алкалоиды – гисциамин и скополамин.

Схема определения наличия ядовитых растений на пастбище или в сене по признакам вызванного отравления приведены в таблице 5 приложения.

106

Приложение

Таблица 1

Нормативы качества питьевой воды

(по СанПиН 2.1.4.1074-01)

107

* При отсутствии общих колиморфных бактерий проводится определение глюкозоположительных колиморфных бактерий (БГКП) с постановкой оксидазного теста.

** Дополнительные показатели.

108

Таблица 2

Нормативы оценки доброкачественности комбикормов

109

Таблица 3

Органолептические показатели силоса (по ГОСТ Р

55986–2014)

110