Адаптационные возможности организма при применении иммунномодуляторов. Монография

лимфоидные узелки разнообразной формы со средней площадью 96803,4 мкм2.Красная пульпа занимает около 86 % площади паренхимы.

При этом на гистологических срезах, полученных от поросят опытной группы, наблюдали сосудистые явления (гиперемию), несколько расширенные артериолы с хорошо развитой мышечной оболочкой.По периферии сосудовкомпактнорасполагаласьлимфоиднаяткань.Периартериальныемуфтыхорошосформированыинаходились в морфофункциональном единстве с лимфоидным узелком.Отмечалиувеличениеколичествафолликуловна единицуплощадисрезасчетковыраженнымиграницами

исветлымицентрамиотносительноконтрольныхживотных.Диаметр и плотность наполнения их лимфоцитами несколько выше,чем у аналогов из контроля.

Выявленные возрастные изменения селезёнки у всех групп потомства были закономерными. Но при применении испытуемого препарата самкам на ранних этапах гестации у лабораторных животных преобладающим былоразвитиеструктур,обеспечивающихвдальнейшем становление клеточного иммунитета. Введение вестина вначалесрокабеременностиипоеезавершенииобеспечивает более раннее развитие структур, ответственных в основном за гуморальный ответ.

Анализируя полученные результаты проведенного исследования, можно судить о развитии положительной закономерности влияния препаратов нуклеиновой природы на структурно-клеточные преобразования в селезенке крыс.

Таким образом, отмечается позитивное влияние из- учаемогопрепаратавсистеме«мать—плод»наразвитие

иформирование периферических лимфоидных органов (лимфатическиеузлы,селезенка)какулабораторных,так

иупродуктивныхживотных,и,какследствие,повышение

101

и сохранности потомства, обладающего более высоким иммунным статусом.

4.3.Структурные преобразования в печени лабораторных

ипродуктивных животных при введении вестина

Печень как объект исследования играет важную роль в организме с точки зрения межсистемной кооперации, является центром обмена веществ в организме, что обусловливает ее функцио­нальное значение в качестве основного органа,обеспечивающего поддержание гомеостазаумлекопитающих,особенновпериодноворожденности. В печени развивающегося организма происходят процессы,соответствующие усложнению ее структурноклеточной организации: изменение строения и размера ядраклеток,укрупнениеспециализированныхэлементов цитоплазмы,увеличениеколичествадифференцированных гепатоцитов. В ней синтезируются многие органические вещества «на экспорт», такие как белки крови, холестерин, фосфолипиды, обезвреживаются продукты обмена,осуществляютсяметаболизмксенобиотиков,катаболизмгормоновидругиепроцессы(ВеринВ. К.,1973; ГорецкаяМ. В.,2010;ГудошниковВ. И.,1989;ЗайцевТ. И., 1975).

В обеспечении организма источниками энергии, по данным Ф. З. Меерсона (1986), печени принадлежит главная роль— межорганного центра, куда направляются энергетические и структурные ресурсы организма, и поэтому именно печеньобеспечиваеторганизм источниками энергии, синтезирует энергетические и пластические молекулы в период усиленной адаптации к перемене условий жизнедеятельности. Доминирующая роль печени в адаптивных реакциях организма при различных воздействиях обусловлена и тем, что она является органом-мишенью для адаптивных гормонов и связана

102

с детоксикационной функцией гепатоцитов, а также сосредоточением в ней 30 % элементов ретикулоэндотелиальной системы (Селье Г., 1977; Штейн Г. И., 1999; Шкурупий В. А.,1986; ДовганьскийА. П.,1989; Марченко В. Т., 1984; Ильхамов М. Б., 1981). Катаболическая направленность обменных процессов в организме обусловливает изменения протеолитической активности лизосом клетокпечени(SalasM.,1987)исопряженасизменениемактивности ферментов лизосом,лабильности их мембран, что приводит к повышению чувствительности мембран этих органоидов к различного рода воздействиям (Панин Л. Е. и др., 1977, 1983). При воздействии лекарственныхсредствактивностьреакцииперикисногоокисления липидов приводит к изменению структуры и функции биомембран,втомчислевклеткахпечени,чтовозможно установить путем изучения ее паренхимы и синусоидов при применении различных биологически активных веществ.

Таким образом, печень является наиболее подходящимобъектомдляизученияобщихичастныхзадач,связанных с влиянием различных факторов,втом числелекарственныхсредств,наорганизм,чтодаетвозможность исследоватьструктурныеосновыморфофизиологических изменений в системе «паренхима — строма».

4.3.1.Влияниепрепаратавестиннаморфологическуюреакцию и формирование печени крысят

Привизуальномосмотрепечениэкспериментальных животных опытных и контрольной групп существенных отличий не обнаружено. Цвет органа буро-красный, выражена мелкая зернистостьпаренхимы.Снаружи печень покрыта соединительнотканной капсулой и серозной оболочкой. Относительная масса печени у новорожденных крысятконтрольной группы составила 2,8 %,что несколько ниже исследуемого показателя в опытных груп-

103

пах, при применении препарата на ранних и поздних стадиях беременности (на 3,6 и 3,9 %), в более поздние сроки наблюдения разница этих показателей была несколько существеннее (12–16 %).

При гистологическом исследовании печени новорожденных крысят (5 суток) во всех группах отмечали слабо выраженное дольчатое строение и слабо развитую междольковую соединительную ткань в виде тонких волокон,малотриадицентральныхвен.Печеночныебалки нечетко разграничены. На срезах, окрашенных гематоксилином Эрлиха и эозином, распределение красителя равномерное.Гепатоциты в большинстве случаев имеют неправильную многоугольную форму, содержат крупные,слабо контурированые ядра круглой формы,расположенные центрально и имеющие ядрышки,количество которых варьирует от 2 до 5. В периваскулярных пространствах печени контрольных животных иногда обнаруживаютсяскоплениялимфоидныхклетокиотмечается незначительное расширение синусоидных капилляров.

Вдальнейшиесрокинаблюдения(15-е,20-есутки)от- мечали,чтовведениепрепаратавестинсамкамнаразных этапах плодоношения вызывает определенные изменения морфологических, цитометрических и гистохимических параметров печени опытных групп.У потомства, полученного от матерей, которым вводили вестин на ранних и поздних сроках плодоношения, архитектоника печени не изменена, дольчатое строение выражено, междольковаярыхлаяволокнистаясоединительнаяткань хорошо развита,дифференцирована. В органе возрастает число центральных вен и триад. Часто встречаются многоядерные гепатоциты. Отмечали диффузное расширение синусоидных капилляров печеночной дольки, более выраженное в участках,прилегающих к центральной вене.Гепатоциты интенсивно окрашены,ядра базо-

104

фильны, правильной формы, в цитоплазме некоторых находили мелкие вакуоли в умеренном количестве. Цитоплазма местами ацидофильно окрашена.

В печени контрольных животных умеренное расширение синусоидов отмечали во всех зонах печеночной дольки, сосуды заполнены плазмой крови и заметна незначительная дискомплексация печеночных клеток, дольчатое строение сглажено. Во всех областях печеночной дольки выявляли большое количество гранулярных структур.Приэтомгепатоцитыкрупные,смногочисленными мелкими вакуолями по периферии долек, межбалочныепространстварасширены.Вомногихгепатоцитах всех зон печеночной дольки при окраске суданом III выявляли жировые включения,часто занимающие всю цитоплазму.Появление слабых дистрофических процессов было характерно для крыс контрольной группы во все сроки наблюдения, и, полагаем, связано с нарушениями печени и изменением ее функциональной активности у матерей.Известно,что при патологии печени у матери печень плода берет на себя компенсацию нарушенных функцийираньшеобычногоначинаетинтенсивнофункционировать как орган метаболизма (Савченков Ю. И., Лобынцев К. С.,1980; Дроздова Л. И.,2004).

При оценке гистохимических реакций выявлено наибольшее количество гликогена и нуклеиновых кислот в срезах печени крысят при применении препарата на ранних и поздних сроках плодоношения, несколько меньше в печени крысят при применении вестина в средние сроки беременности.Учитывая функциональную значимость гликогена, можно предполагать о более высокой степени развития печени крыс, рожденных от матерей, которым вводили вестин на ранних и поздних срокахплодоношения,чтосвязаноспередачейуглеводов от матери к плоду.

105

Дляуточненияструктурныхизмененийвпеченипроводили количественное измерение площади ядер и площади цитоплазмы гепатоцитов, определяли ЯПО. Во все сроки наблюдения у потомства всех опытных групп отмечалась общая тенденция к увеличению показателей площадиядраипротоплазмыгепатоцитовотносительно начальной величины, что морфологически подтверждает процесс структурного становления печени потомства крыс и выражается в формировании печеночных долек, системыпеченочныхтриад.Так,приприменениивестина на поздних сроках плодоношения в клетках печени крысят преобладал рост площади ядер гепатоцитов на 12,7 % при очень незначительном изменении площади протоплазмы, при этом значение ЯПО увеличивается за счетзначительногоростаядраотносительноаналоговиз контроля.Вдругихопытныхиконтрольнойгруппахвтечениевсегопериоданаблюденияпроисходилокакувеличение,так и снижение площади протоплазмы гепатоцитов печени и их ядер. У потомства контрольной группы приболеекрупныхразмерахструктургепатоцитовк20-м суткамжизниотмечаетсяравномерноеуменьшениеплощадиядраипротоплазмы,азначенияЯПОклетокпечени неимелизначительныхизмененийнапротяжениивсего периоданаблюдений.Данныесогласуютсясисследованиями Л. Н.Стацевич (2007).

Укрысят,рожденных отматерей,получавших вестин напозднихсрокахплодоношения,обнаруженынаиболее высокие средние значения величины гепатоцитов.В целом во всех опытных группах отмечали, что гепатоциты достаточно разнородны по объему,около 30 % клеток имеют максимальные величины. Наши морфометрическиеданныепоисследованиюклетокпеченикрыссогласуются с результатами исследований А. В. Жарова (1975) о том, что в печени располагаются крупные интенсивно

106

функционирующиегепатоциты,вменьшемколичестве— мелкиеипереходные.Такиеданныеовысокойфункциональнойспособностикрупныхгепатоцитовкоррелируют

споказателями ЯПО клеток экспериментальных групп.

4.3.1.Влияниепрепаратавестиннаморфологическуюреакцию и формирование печени поросят

Уноворожденныхпоросятэкспериментальныхгрупп сохраняетсятрубчатаяструктурапечени,хорошоразвиты триады, септальные сосуды и центральные вены, дольки сформированы неокончательно и выявляются лишь функционально.Нетчеткойрадиальнойнаправленности печеночных трубок и синусоидных капилляров. Соединительнотканные прослойки долек только намечаются. Печень поросят свиней при рождении окончательно не сформирована (Орлов В. Н.и др., 2008).

При гистологическом исследовании печени у новорожденных поросятвсех групп выявлено балочное строение в начальной стадии формирования. Печеночные дольки имеют неправильную форму и разделены прослойками слаборазвитой соединительной ткани. Общая гистологическая картина печени поросят всех исследуемых групп существенных различий не имела и не отклоненаотфизиологическойнормы.Втожевремяотмечали некоторые различия и морфологические особенности. Гепатоциты в дольках печени поросят опытной группы имеют многоугольную форму, расположены радиально понаправлениюкцентральнойвенедольки.Печеночные балки характеризуются в основном однорядным расположением клеток.Между балками просматривается сеть синусоидных капилляров, в которых местами находятся эритроциты.Упоросятконтрольнойгруппывпечениотмечалинезначительноепереполнениекровьюцентральных вен, что может свидетельствовать об интенсивности кровообращения в печени и уровне метаболических

107

процессов. Обнаруживали немало светлых, обладающих слабовыраженнойсуданофилиейгепатоцитов,что,вероятно,характеризуетразвитиепроцессовадаптациивэтот период развития.

Наличиедвуядерныхгепатоцитов(около3 %)отмечали в печени как поросят,так и лабораторных животных, которыеполучалипрепаратвестин,что,очевидно,связаносвозросшейфункциональнойактивностьюоргана.Образованиедвуядерныхклеток,поданнымИ. В.Урываевой

(1987,1988),А. В.Жарова(1975),В. И.Гудошникова(1989),

Г. И.Штейна(1991),представляетсобойодинизвариантов клеточнойпролиферации,благодарякоторойклеткимогутактивно проходитьдифференцировочный ряд отменее зрелых форм к более зрелым. Можно предположить, что их наличие связано с возрастающей функциональнойактивностьюорганалибоявляетсянеобходимымдля развития регенераторных процессов в постнатальном онтогенезе в ходе адаптации (Медведев В. С. и др., 1989; УрываеваИ. В.,1987,1988).Можнопредположить,чтоэто являетсяследствиемадаптивныхреакцийплоданаусловия внутриутробного воздействия, от которого зависят темпы развития потомства в постнатальном онтогенезе (Верин В. К., 1983). Процессы дифференцировки гепатоцитоввпериодынаблюденияпроисходилиактивноисопровождались изменением показателей их ЯПО за счет активного роста протоплазмы в сравнении с ядром,особенно у контрольных животных. Введение испытуемого препарата,вероятно,непосредственно обеспечиваеторганизмплодадополнительнымиэнергетическимиресурсами. Это сказывается на последующей постнатальной дифференцировке клеточных структур печени.

Так, к 30-суточному возрасту в печени отмечалось четкое дольчатое строение, обусловленное умеренным разрастанием междольковой соединительной ткани,ра-

108

диально расположенные балки. Ядра гепатоцитов базофильны, округлой формы, хорошо дифференцированы. Диаметр ядер гепатоцитов поросят опытной группы отличался относительно крупными размерами при активном увеличении площади протоплазмы в сравнении

сконтрольными животными.

Уноворожденных поросят опытной группы, по аналогии с лабораторными животными, отмечалось существенное увеличение размеров гепатоцитов при изменении показателей ЯПО по сравнению с контролем (423,3–300,9 мкм). Гепатоциты достаточно разнородны пообъему,около50 %клетокимеютмаксимальныевеличины. Подобные изменения в печени могут быть также ипроявлениемфизиологическихгипертрофическихпроцессов,обусловливающихповышенноефункциональное состояниеморфологическихструктур.Следуетотметить, что к 40-суточному возрасту происходило незначительное уменьшение цитокариометрических значений гепатоцитов в печени животных опытной группы. Данная тенденция была отмечена и у лабораторных животных (крысят).

Пригистохимическомисследованиигепатоцитовпечениноворожденныхпоросятвцитоплазмеклетокобнаруживали жировые включения: в опытной группе в виде незначительных диффузных липидных капель,в печени поросят контрольной группы — в виде очагов жировой инфильтрации в гепатоцитах околоцентральной зоны печеночной дольки.

Морфологические изменения, характеризующиеся накоплением ли­пидов, видимо, следует рассматривать вкачествевозможногоморфологическогосубстратаувеличения функциональных способностей клеток и органа

(Меерсон Ф. З., 1973, 1981, 1986, 1993) и как, следствие,

усиления их секреторной активности. Эти предположе-

109

ниясогласуютсясданнымиЕ. С.ВоронинаиЛ. Я.Старцева (1990) отом,что под влиянием препаратов нуклеиновой природы повышается продуцирование иммуноглобулинов основных классов, интерферона,кортикостероидов.

При изучении гистохимических изменений в печени поросятопытнойгруппыприприменениипрепаратавестин отмечали более интенсивное содержание в клетках печени зёрен гликогена и рибонуклеопротеидов (РНП) относительно контрольных животных, свидетельствующее об активно протекающих обменных процессах в гепатоцитах. Выявляли наличие равномерно и плотно расположенных в центральных участках клеток гранул гликогена как в центре, так и по переферии долек и наличие интенсивной окраски на РНК. Крупные гранулы РНК в цитоплазме гепатоцитов сосредоточены в основном под оболочкой,между ними и ядром располагаются мелкиегранулы,ак30-мсуткамнаблюденияравномерно заполняют цитоплазму печеночных клеток.

Интенсивность таковой окраски в цитоплазме гепатоцитов поросят контрольной группы визуально была несколько снижена и представлена мелкими гранулами.Употомства контрольной группы гранулы гликогена встречались редко,в основном в периферических участках клеток,а РНП в виде мелких структур в незначительном количестве располагались перинуклеарно.

Учитываяспособностьпрепаратовнуклеиновойприродыстимулироватьсинтезбелка,выявленныенамиизменения содержания гликогена и РНК могут косвенно свидетельствовать об усилении энергетических затрат и повышении белково-синтетической функции печени у поросят опытной группы в периоды наблюдения. Степень затрат энергетических ресурсов клетки по результатам В. К.Верина (1973),Ф. З.Меерсона (1986,1993), гистологически проявляется изменением конфигура-

110