- •КЛИНИЧЕСКАЯ БИОХИМИЯ ДЛЯ СТОМАТОЛОГОВ
- •ПЛАН ЛЕКЦИИ
- ••Изучение проводимости слюнных желез
- ••Радиоактивный йод I131 обладает периодом полураспада 8,05 дней,
- •Методика
- ••Установлено, что у здоровых лиц поступление ПТХ в орган начинается с 6-7 сек
- ••Заболевание сиалоаденита до 2-х лет - наблюдается характерный подъем ( накопление препарата в
- ••Радиосиалография с помощью 131 I позволяет
- •Качественные изменения слюноотделения могут происходить под воздействием местных и общих факторов.
- •оказывают влияние
- ••При раздражении вкусовых рецепторов выделяется слюна, богатая органическими
- ••При раздражении вкусовых рецепторов выделяется слюна, богатая органическими
- ••При раздражении вкусовых рецепторов выделяется слюна, богатая органическими
- •М.Н. Пожарицкая (1989)
- ••ПРАВИЛА СБОРА СЛЮНЫ
- ••Стандартные правила подготовки образцов не прописаны для сбора слюны
- •Особенности преаналитического этапа
- ••В лаборатории при взятии пробы основными источниками загрязнения биоматериала могут быть
- ••Следует избегать сбора образцов в местах, где может произойти их загрязнение элементами окружающей
- •Аналитический этап и методы
- ••Аналитическая чувствительность чрезвычайно важна, поскольку концентрация веществ в большинстве биологических образцов находится в
- •ПОСУДА
- •функции слюны
- •Белки слюны
- •основные источники ферментов
- ••Белки собственно смешанной слюны обладают защитными и ферментативными свойствами.
- •Ферменты ротовой жидкости
- •Лейкоциты
- •катепсины
- ••Наиболее многочисленны катепсины, содержащие в своём активном сайте цистеин: катепсины B, C, H,
- ••Тема для реферативной работы:
- •• Собственные
- ••Слюнные железы синтезируют ферменты
- •ФЕРМЕНТЫ
- •В истории биохимии амилаза - первый обнаруженный фермент
- •амилаза
- •α-Амилаза (1,4-α-D-глюкан- 4 – глюканогидролаза)
- ••Фермент обнаружен также в печени, лёгких, почках, в слезах, поте и амниотической жидкости.
- ••Гидролизует полисахаридную цепь крахмала и других длинноцепочечных углеводов в любом месте, что приводит
- ••В состав слюны АМИЛАЗА выделяется преимущественно околоушной слюнной железой.
- ••В соответствии с химическим составом различают 2 вида
- •Студенты УГМУ
- •Изоформа - рI
- ••Влияние различных факторов на секрецию а-амилазы.
- •Пищевое поведение
- •Изменение активности амилазы слюны при различных состояниях полости рта под влиянием суточного ритма
- ••Установлена четкая зависимость концентрации амилазы от диеты независимо от расовой принадлежности.
- •Влияние эндокринной системы
- ••Циркадный ритм изменения активности амилазы слюны: активность достоверно выше в вечерние часы по
- •состояние полости рта
- •Изменение активности амилазы слюны в различных клинических случаях
- •Физиологическое состояние организма
- •Воздействие социальных факторов
- •Заболевания желудочно-кишечного тракта . Полость рта входит в единую систему пищеварительного тракта
- ••Почти половина детей (46%) от 3 до 7 лет с патологией гастродуоденальной зоны
- •Повышение активности амилазы
- •Амилаза панкреатическая (Human GmbH, Германия) –набор реактивов для определения
- ••При остром панкреатите амилаза начинает повышаться в крови в течение несколько часов после
- •Двойственная природа амилазы
- •Белок фасоли ингибирует амилазу слюны
- •Амилаза (диастаза) меда (1-50 ед. Готе)
- •КАРБОАНГИДРАЗА (КФ 4.2.1.1.)
- •Фермент открыт в 1932 г. британскими физиологами Н. Мелдрумом и Ф. Рафтоном
- •Локализация
- ••-четыре цитоплазматических
- •Биологические функции карбоангидразы
- •Ацидогенез в желудке
- •Механизм действия карбоангидразы
- •• 1 этап.
- •Карбоангидраза слюнных желез
- •Биологическая роль в полости рта.
- ••4. Из ротовой жидкости адсорбируется в состав пелликулы, где выполняет свою функцию поддержания
- •Диагностическое значение определения карбоангидразы
- •Снижение активности
- ••Последствия Ингибирования карбоангидразы
- •Сдругой стороны
- •Определение активности карбоангидразы
- •ферменты АОЗ
- •СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗА
- ••Изоформы СОД встречаются у всех кислородпотребляющих организмов. Металлопротеины.
- ••Cu*Zn-СОД – димер с молекулярной массой 32000, чувствительный к цианиду.
- ••В четвертичной структуре фермента есть “расщелина”, ведущая от поверхности белка к активному центру.
- •катализирует прямую и обратную реакцию:
- •Активность Сu*Zn-СОД в различных органах и тканях человека не одинакова:
- •Каталаза
- •Биологическая роль
- •Строение каталазы
- ••Апофермент каталазы – гликопротеин.
- •Локализация каталазы
- •Механизм действия
- ••При высоких концентрациях Н2О2протекает реакция каталазного типа
- •Нарушения активности каталазы
- ••Ген каталазы находится в 11 хромосоме, при делеции которого наблюдаются достаточно значительные нарушения,
- •Лабораторная диагностика
- ••При исследовании слюны у рабочих текстильного производства обнаружено, что активность каталазы ниже на
- •НИТРАТРЕДУКТАЗА
- •Влияние ортодонтических аппаратов на
- ••что при наличии в ротовой полости ортодонтической аппаратуры снижается
- •ЛАКТОФЕРРИН (ЛФ)
- ••В координации ионов железа принимают участие радикалы аминокислот: в N-доле His 253, Tyr
- •• апо-лактоферрин
- ••Связывание каждого иона железа приводит к одновременной фиксации иона гидрокарбоната для компенсации положительного
- •ЛФ в тканях и биологических жидкостях организма человека.
- •Содержание ЛФ
- •Происхождение в слюне
- •Биохимические функции лактоферрина
- ••1.2 .Антимикробные свойства апо-ЛФ
- ••ЛФ посредством связывания ионов железа и других металлов из среды поверхностных структур оболочек
- •2.Антимикробные свойства апо-ЛФ
- •2.2. Эффективно воздействует на нуклеиновые кислоты
- ••Образованию комплекса ЛФ-ДНК принадлежит основная роль во взаимодействиях фермента с клетками, где ДНК
- ••2.3. Фосфатазная активность
- •3.Антивирусная активность
- ••3.2.Железонесвязывающие изоформы ЛФ способны гидролизовать РНК.
- •4.Клеточная пролиферация
- •4.2.Влияет на экспрессию генов
- ••Обнаружено, что ЛФ может регулировать рост костной ткани, являясь сильным активатором роста и
- ••5. Система иммунитета.
- •6.Антиоксидантные свойства
- •Полость рта
- ••Активность лактоферрина (мкг/мл) в слюне у соматически здоровых людей равна
- ••При сахарном диабете обнаружен
- •• ЛАКТОФЕРРИН
- •ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ
- ••Лица с врожденной или приобретенной недостаточностью ЛФ восприимчивы к инфекции
- •Лекарственные средства
- •http://freepatent.ru/MPK/A/A61/A61K/
- •Реферативная работа
- •• ЛИЗОЦИМ
- •• ЛИЗОЦИМ
- ••Открыт А. Флемингом в 1922 в слизи
- ••Относится к классу гидролаз, гидролизует гликозидные связи.
- •N-ацетилмурамовая кислота
- •Строение лизоцима и механизм действия
- •Hаиболее изучен лизоцим белка куриных яиц (М 14306),
- •• Кристаллы лизоцима
- ••Глобула лизоцима состоит из двух частей, разделённых щелью.
- ••Оптимальные условия для лизиса микробов Microccocus lysodeikticus (обычного тест-субстрата лизоцима) – рН 6-7
- •Биологические функции лизоцима
- •Зависимость активности лизоцима от различных факторов
- •Содержание в организме
- ••Главным источником лизоцима в ротовой полости являются эпителиальные клетки протоков слюнных желез,
- •Изменение активности лизоцима при заболеваниях полости рта
- •Состояние полости рта и изменение активности лизоцима
- •Динамика показателей лизоцима при стандартном лечении пациентов с хроническим пародонтитом
- ••низкий уровень содержания лизоцима может стать показателем предрасположенности к кариесу зубов,
- ••Активность лизоцима резко понижается при хроническом воспалении околоушной железы
- •Активность лизоцима и физиологическое состояние организма
- •Зависит от характера питания
- •Лекарственные средства
- •При стоматологических заболеваниях
- •• МУЦИН
- ••Муцины - группы высокомолекулярных гликопротеинов позвоночных, содержащих преимущественно О-связанные олигосахариды ( т.е. соединение
- •Компонентный состав слизей (% от массы)
- ••Секретируются в качестве компонентов внеклеточного матрикса эпителиальными клетками слюнных желез, молочных желез, дыхательного
- •Химический состав и строение муцина
- ••На долю белка в муцинах приходится около 30% массы молекулы.
- •Возникает типичная структура протеогликана -
- ••5 аминокислот -Thr,Ser, Ala, Gly, Pro – 50% белковой цепи
- ••дисульфидные связи важны для олигомеризации муцинов, образования глобулярной структуры и образования секретируемого муцинового
- •Гены муцина
- •синтез муцинов
- •Биологическая роль муцинов
- ••Мукоцеллюлярный клиренс в легких проявляется в продукции мокроты при бронхо-легочных заболеваниях.
- ••Дисрегуляция экспрессии муцинов играет ключевую роль в опухолевой и метастатической прогрессии.
- •Муцины слюны
- •роль муцинов в полости рта
- •Противокариозное действие.
- ••Муцины Образуют большую часть пелликулы.. Пелликула действует как полупроницаемая мембрана, защищая зуб от
- •Бактерицидное, противогрибковое действие
- •1.нервная регуляция
- •2.Действие сигнальных молекул
- •3.Пищевое поведение
- •Патология обмена муцина
- ••При длительном отсутствии в крови
- ••Сахарный диабет сопровождается
- •Текстурообразование слюны
- ••Выделение муцина из слюны и качественное определение.
- •ТЕСТОВЫЕ
- •1вопрос
- •2вопрос
- •3вопрос
- •4вопрос
- •5вопрос
- •6вопрос
- •7вопрос
- •8вопрос
- •9вопрос
- •10 вопрос
- •11вопрос
- •12вопрос
- •13вопрос
- •14вопрос
- •15вопрос
- •16вопрос
- •17вопрос
- •18вопрос
- •19вопрос
- •20вопрос
- •21вопрос
- •22вопрос
- •23вопрос
- •24вопрос
- •25вопрос
ЛФ в тканях и биологических жидкостях организма человека.
•Обнаружен в легких, бронхах, тонкой кишке, селезенке, в секреторных гранулах лейкоцитов.
•Присутствует в молоке коров, свиней, мышей, но
полностью отсутствует в молоке собак и крыс.
•Местом синтеза ЛФ молока, слез и других экскретов считаются железистые клетки соответствующих эпителиальных тканей, а ЛФ сыворотки – нейтрофилы.
Содержание ЛФ
• молозиво (0,67 г%) - много! 6700 мкг/л
•грудное молоко (0,26 г%), 2600 мкг/л
•слюна (13 мкг/мл)
•кровь мкг/мл (м) - (0,62±0,10)
• |
(ж) — (0,44±0,10) |
•присутствует в слезе, семенной жидкости, секретах респираторного, желудочно- кишечного и генитального трактов.
Происхождение в слюне
•ЛФ обнаруживается
•в цитоплазме клеток железистого эпителия, сосредоточен в апикальной части ацинусов и протоков, эпителии слюнных трубок и отдельных ацинусов подчелюстной,
околоушной слюнных желез.
•В миоэпителиальных клетках ЛФ не содержится.
Биохимические функции лактоферрина
•1. Железозависимые функции ЛФ.
•1.1. Участвует в регуляции всасывания и транспорте ионов железа, цинка и меди.
•Сродство ЛФ в 300 раз больше по сравнению с белком крови трансферрином. Усиливается в кислой среде, которая при воспалении создается за счет выделения молочной кислоты из тканей.
• |
Воспаление – ацидоз! |
•1.2 .Антимикробные свойства апо-ЛФ
обусловлены его способностью связывать железо из окружающей среды и тем самым лишать бактериальную микрофлору этого необходимого для ее роста и жизнедеятельности элемента.
•ЛФ посредством связывания ионов железа и других металлов из среды поверхностных структур оболочек микроорганизмов лишает последних жизненноважных микроэлементов, входящих в состав цитохромов дыхательной цепи, каталаз, пероксидаз и супероксиддисмутаз. Снижает их резистентность к токсическому действию активных форм кислорода.
•Удержание железа ЛФ и ТФ во внутренней среде организма является одним из ведущих механизмов защиты от инфекций и опухолевого роста.
2.Антимикробные свойства апо-ЛФ
•2.1. Бактерицидное действие ЛФ было показано в отношении большого числа грамположительных и грамотрицательных бактерий.
•Многие микробы экспрессируют на своей поверхности рецепторы для ЛФ,
•связывание фермента с такими рецепторами приводит к гибели микроорганизма.
•Лактоферрин связывается с липополисахаридами бактериальных стенок, ион железа инициирует перекисное окисление. Это приводит к изменению мембранной проницаемости и последующему лизису бактериальных клеток.
2.2. Эффективно воздействует на нуклеиновые кислоты
•Связывание ЛФ с ДНК имеет специфический характер, ЛФ проявляет повышенное сродство
к определенным последовательностям ДНК.
•Стехиометрия связывания:
•низкие концентрации белка
• |
2 моль ДНК : 1 |
моль ЛФ |
• |
высокие концентрации белка |
|
• |
4 моль ДНК : 1 |
моль ДНК |
•Образованию комплекса ЛФ-ДНК принадлежит основная роль во взаимодействиях фермента с клетками, где ДНК рассматривается в качестве основного кандидата на роль универсального рецептора ЛФ.
•Особенно это касается бактериальных клеток.
