81. Диагностическое значение определения биохимической активности микроорганизмов и способы ее изучения.

82. Питательные среды, из состав и назначение.

Питательные среды можно разделить:

А) По происхождению на:

1) естественные - натуральные продукты питания (мясо, молоко, картофель) и

Искусственные - приготовленные специально для выращивания микробов.

Искусственные питательные среды, в свою очередь, делятся на:

А) среды из естественных продуктов (мясная вода, мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), не имеющие постоянного состава;

Б) синтетические питательные среды - растворы строго определенных количеств солей, аминокислот, азотистых оснований, витаминов в дистиллированной воде - имеют постоянный состав, используются для выращивания микроорганизмов и культур клеток при получении вакцин, иммунных сывороток и антибиотиков.

Б) По назначению:

1) общего назначения (МПБ, МПА) - на них растет большинство микробов;

2) элективные - избирательно способствующие росту одного вида микробов из смеси (например, желточно-солевой агар для стафилококков);

3) дифференциально-диагностические - позволяющие отдифференцировать по внешнему виду колоний один вид микроба от других (Эндо, Левина для кишечной группы микробов).

Кроме того, по назначению выделяют среды в зависимости от целей использования в схеме выделения чистых культур на:

1) среды обогащения - подавляют рост в смеси микробов, сопутствующих возбудителю,

2) среды для получения изолированных колоний,

Среды накопления чистой культуры.

В) По консистенции среды подразделяются:

1) жидкие;

2) полужидкие (при добавлении агар-агара в концентрации 0,5%);

3) плотные - выше 1%.

83. Серологические реакции (ифа,рп,рдп) и их использование в диагностике инфекционных болезней.

Иммуноферментный анализ или метод (ИФА) — выявление ан­тигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интен­сивность окраски прямо пропорциональна количеству свя­завшихся молекул антигена и антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных бо­лезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепати­та В и др., а также определения гормонов, ферментов, лекар­ственных препаратов и других биологически активных ве­ществ, содержащихся в исследуемом материале в минорных концентрациях.

Реакция преципитации (РП) - это формирова­ние и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Он образуется при смешивании антигенов и антител в эквивалентных количес­твах; избыток одного из них снижает уровень образования иммунного комплекса.

РП ставят в пробирках (реакция кольцепреципитации), в гелях, питательных средах и др. Широкое рас­пространение получили разновидности РП в полужидком геле агара или агарозы: двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.