45. Что такое генная инженерия ат. Виды генно-инженерных ат.
Генетическая инжене́рия (генная инженерия) — совокупность приёмов, методов и технологий получения рекомбинантных РНК и ДНК, выделения генов из организма (клеток), осуществления манипуляций с генами, введения их в другие организмы и выращивания искусственных организмов после удаления выбранных генов из ДНК
46.47. Дизайнерские антитела.
Различают химерные, гуманизированные, конъюгированные; двуцепочечные и одноцепочечные или мини-антитела. Химерные антитела (или гибридные) – это антитела, в которых константный домен мышиных антител замещен соответствующим константным доменом иммуноглобулина человека. Получают гибридные антитела с мышиным Fab- и человеческим Fc-доменом. Гуманизированные антитела. В структуре гуманизированных антител мышиное происхождение имеют только небольшие антигенсвязывающие гипервариабельные участки (CDR)вариабельного домена – Fv – фрагмента. Одноцепочечные антитела. Наряду с полноразмерными химерными и гуманизированными антителами генная инженерия позволяет получать и одноцепочечные, мини-антитела, состоящие только из участков Fv–фрагмента (scFv). Это вариабельные домены легких и тяжелых цепей - Vl и Vh иммуноглобулина, ковалентно соединенные гибким пептидным линкером. Конъюгированные антитела. К моноклональным антителам присоединяют лекарственные соединения (цитостатики, токсины и др.) или диагностические метки (радиоактивные частицы, флуоресцирующие вещества) с целью адресной доставки к клеткам-мишеням либо с целью детекции. Моноклональные антитела, конъюгированные с токсинами, называют иммунотоксинами.
48. Функции антител: нейтрализация, агглютинация, активация комплемента, азкц, дегрануляция тучных клеток, активация фагоцитоза.
Функции иммуноглобулинов (I)
*Нейтрализация антигена- блокируют прикрепление АГ к клетке (IgM, IgG, IgA,в т.ч. секреторный IgA)
*Реакция агглютинации - образование агрегатов АГ+АТ, что нарушает подвижность микробов (IgM, IgG, IgA).
*Опсонизация АГ и усиление фагоцитоза (IgM, IgG) — связывание AT с клеточной стенкой микроорганизма с последующим эффективным поглощением образовавшегося комплекса фагоцитом при взаимодействии Fc-фрагмента AT с соответствующим Fc-рецептором (FcR) на мембране фагоцита. Наиболее активные опсонины: Fc-фрагмент IgG, IgM
*Участие в АЗКЦ (IgG) – лизис НК-клетками клеток-мишеней, опсонизированных АТ. НК присоединяются к Фц-фрагменту иммуноглобулинов. Уничтожение клетки-мишени происходит с помощью перфоринов и гранзимов НК-клеток.
* Активация комплемента по классическому пути (IgM, IgG)
49. Что такое азкц? Какие классы иммуноглобулинов и какие клетки принимают в ней участие?
Антитела, участвующие в АЗКЦ, в основном относятся к классу IgG, в некоторых случаях это могут быть IgM- или IgE-антитела.
50. Строение и функции Ig m
Иммуноrлобулин М (IgM). Наиболее крупная молекула из всех Ig. Это пентамер, который имеет 10 антигенсвязывающих центров, т. е. его валентность равна 10. Различают подтипы Ml и М2. .Тяжелые цепи молекулы IgM в отличие от других изотипов построены из 5 доменов. На его долю приходится около 10 % всех сывороточных Ig. Среднее содержание IgM в сыворотке крови здорового взрослого человека составляет около 1 г/л. IgM филогенетически — наиболее древний иммуноглобулин. Синтезируется предшественниками и зрелыми В-лимфоцитами (Вц). Образуется в начале первичного иммунного ответа
Обладает высокой авидностью, наиболее эффективный активатор комплемента по классическому пути. Участвует в формировании сывороточного и секреторного гуморального иммунитета. Являясь пептомерной молекулой, содержащей J-цепь и дисульфидные связи (-S-S-), может образовывать секреторную форму и выделяться в секрет слизистых, в том числе в молоко. Пять мономерных субъединиц расположены радиально. При этом Fc-фрагменты направлены в центр круга, а Fab-фрагменты — наружу. В состав μ цепи входят четыре C-домена (Cμl, Cμ2, Cμ3 и Cμ4), но при этом в структуре тяжелой цепи отсутствует шарнирный участок. В какой-то степени ero функцию выполняет Сμ2 домен, имеющий ocтатки пролина.
Не проходит через плаценту. Обнаружение специфических антител изотипа М в сыворотке крови новорожденного указывает на бывшую внутриутробную инфекцию или дефект плаценты.
