- •Введение
- •ГЛАВА 1. Генетическая токсикология, предмет и задачи
- •ГЛАВА 2. Изменчивость
- •2.1. Типы изменчивости
- •Рис. 2.1.1. Типы изменчивости
- •2.2. Основные положения теории мутаций
- •2.3. Новые положения теории мутаций
- •2.4. Классификация мутаций
- •2.5. Генные мутации
- •2.5.1. Типы генных мутаций
- •2.6. Хромосомные мутации
- •Рис. 2.6.1. Классификация хромосомных аберраций
- •Рис. 2.6.6. Выявление делеций во время мейоза и на политенных хромосомах
- •Рис. 2.6.7. Эффект положения гена: изменение числа фасеток в зависимости от положения генов в хромосоме
- •Рис. 2.6.8. Выявление дупликаций во время мейоза
- •Рис. 2.6.9. Образование инверсионной петли в мейозе
- •Рис. 2.6.13. Участок метафазной пластики. Транслокация: транслокоционный крест (слева – фотография, справа – реконструкция)
- •2.7. Геномные мутации
- •Рис. 2.7.1. Классификация геномных мутаций
- •2.8. Уровни защиты организмов от мутагенов
- •ГЛАВА 3. Методы оценки мутагенов
- •3.1. Проблемы оценки мутагенов
- •Рис. 3.1.1. Принципиальная схема поэтапного тестирования (B.A. Bridges, 1974): “+” – положительный ответ тестирования, “–” – отрицательный ответ тестирования
- •3.2. Бактериальные тест-системы для выявления мутагенов
- •3.4. Цитогенетические методы
- •3.4.1. Метафазный анализ
- •3.4.2. Ана-телофазный анализ
- •3.4.3. Микроядерный тест
- •Рис. 3.4.1. Образование микроядра из ацентрического фрагмента
- •3.4.4. Сестринские хроматидные обмены
- •Рис.3.4.2. Метафазная пластинка (сестринские хроматидные обмены обозначены стрелками)
- •3.4.5. Политенные хромосомы
- •ГЛАВА 5. Методы выявления и оценки генотоксикантов
- •5.1. Отбор и подготовка проб для проведения токсикогенетического анализа
- •5.2. Chlorella vulgaris как тест-объект для оценки генотоксичности факторов окружающей среды
- •Рис. 5.2.1. Жизненный цикл хлореллы
- •Рис. 5.2.2. Метод последовательного разведения культуры клеток хлореллы
- •Таблица полученных в ходе работы результатов
- •Сравнение данных по выживаемости и частоте мутаций у хлореллы
- •Рис. 5.2.5. Соотношение типов мутаций у Chlorella vulgaris
- •Таблица полученных в ходе работы результатов
- •5.3.1. Клеточный (митотический) цикл
- •Рис. 5.3.1 Клеточный (митотический цикл)
- •Рис. 5.3.2. Митотическое деление растительной клетки: 1 – ядро, 2 – хромосомы, 3 – цитоплазма, 4 – кариолемма, 5 – кариоплазма, 6 – глыбки хромтина, 7 – веретено деления, 8 – фрагмопласт, 9 – ядра дочерних клеток
- •Рис. 5.3.3. Морфология хромосом в течение клеточного цикла
- •5.3.2. Ход выполнения лабораторной работы
- •Определение митотического индекса в меристеме корешка Allium cepa*
- •5.3.3. Определение митотоксической активности тканей
- •Сводная таблица учета митотического и фазных индексов в меристеме проростков корешков Allium cepa*
- •5.3.4. Статистическая обработка результатов
- •Рис. 5.3.5. Соотношение фазных индексов
- •Рис. 5.4.1. Типы хромосомных аберраций (схема)
- •5.4.2. Определение мутагенного эффекта химического соединения
- •Рис. 5.4.2. Картины хромосомных аберраций на стадии ана-телофазы
- •Рис. 5.4.3. Частота хромосомных аберраций в меристеме проростков корешков Allium cepa
- •Рис. 5.4.4. Соотношение типов хромосомных аберраций
- •5.5.1. Жизненный цикл дрозофилы
- •5.5.2. Методы культивирования дрозофилы
- •Частота летальных культур у Drosophila melanogaster
- •Рис. 5.5.2. Половой диморфизм у Drosophila melanogaster
- •Рис. 5.5.3. Мутации у Drosophila melanogaster
- •Приложение
- •Генетический код
- •Словарь терминов
- •Список использованной литературы
- •Прохорова Инна Мечиславовна
Генетическая токсикология
Учебное издание
Прохорова Инна Мечиславовна
Ковалева Маргарита Игоревна Фомичева Анна Николаевна
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ
ТОКСИКОЛОГИЯ
Лабораторный практикум
Редактор, корректор А.А. Антонова Компьютерная верстка И.Н. Ивановой
Подписано в печать 30.12.2005. Формат 60х84/16. Бумага тип. Усл. печ. л. 7,9. Уч.-изд. л. 5,0. Тираж 100 экз. Заказ .
Оригинал-макет подготовлен в редакционно-издательском отделе ЯрГУ.
Ярославский государственный университет 150000 Ярославль, ул. Советская, 14
Отпечатано
ООО «Ремдер» ЛР ИД № 06151 от 26.10.2001 г. Ярославль, пр. Октября, 94, оф. 37
тел. (4852) 73-35-03, 58-03-48, факс 58-03-49
132
Список использованной литературы
133
Генетическая токсикология
И.М. Прохорова, М.И. Ковалева,
А.Н. Фомичева
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ
ТОКСИКОЛОГИЯ
Лабораторный практикум
134
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Мутация гена HbA |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Аномальный глобин + гем |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Аномальный гемоглобин |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Серповидные эритроциты |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Уменьшение продолжительности жизни серповидных клеток |
|
|
|
|
|
|
Агглютинация |
|
|
|
|
Агглютинация клеток в селезен- |
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
серповидных клеток |
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Анемия |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Увеличение селезенки |
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Нарушение притока крови |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Эффекты |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
пролиферации клеток |
|
|
|
|
Расширение |
|
|
|
к почкам |
|
|
к сердцу |
|
|
к мышцам |
|
|
|
к желудку |
|
|
к мозгу |
|
|
||||||||||||||||||||||
|
|
костного мозга |
|
|
|
|
сердца |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
и суставам |
|
|
и кишечнику |
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Увеличение массы |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Почечная |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Нарушение |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||
|
|
костного мозга |
|
|
|
Нарушение |
|
|
|
недостаточность |
|
|
|
|
Ревма- |
|
|
|
Боли |
|
|
Паралич |
|
|||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
сердечной |
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
сердечной |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
тизм |
|
|
|
в животе |
|
|
|
|
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
деятельности |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
деятельности |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
Нарушение физических |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
и психических функций |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Аномалии развития костей
Рис. 2.5.1. Плейотропное действие гена при серповидноклеточной анемии
Рис. 2.6.10. Последствия инверсии:
образование дицентрической хромосомы и ацентрического фрагмента в анафазу
Рис. 5.5.1. Жизненный цикл Drosophila melanogaster
Рис. 2.6.12. Транслокация: образование транслокационного креста при реципрокной транслокации
Таблица 5.4.2
Сводная таблица учета хромосомных аберраций в меристеме проростков корешков Allium cepa*
|
№ повторности (корешка) |
∑ ана-телофаз на препарате |
Хромосомные аберрации (ХА) |
∑ ХА |
ХА,% |
|
|
|
|
||||
|
мосты |
фрагменты |
||||
К |
|
|
|
|
|
|
1 |
|
|
|
|
|
|
2 |
|
|
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
|
|
4 |
|
|
|
|
|
|
5 |
и т.д. |
|
|
|
|
|
Сумма, ∑ |
|
|
|
|
|
Xi − X (Xi − X)2
|
Нарушения |
веретена деления |
|
Отсавания |
|
|
Асимметричные |
Трехполюсные митозы |
|
||
|
|
|
|
∑ |
|
нару- |
|
шений |
|
верете |
|
на |
|
делени |
Xi − X (Xi − X)2 |
я |
|
митозы Трехгрупповые метафазы Неразобранные аберрации |
|
Среднее, X m
ν
Опыт
1
2
3
4
5 и т.д.
Сумма, ∑
Среднее, X m
ν
* Вносятся данные всей группы.