ГЛАВА 3. Методы оценки мутагенов

3.4.2. Ана-телофазный анализ

Ана-телофазный анализ подробно изложен при описании лабораторной работы «Определение генотоксического действия факторов окружающей среды с использованием Allium cepa в качестве тест-объекта».

3.4.3. Микроядерный тест

Метафазный анализ хромосом требует высокой квалификации исследователя, что значительно удорожает исследование. Поэтому в генетической токсикологии интенсивно велась разработка новых методов с целью упрощения учета хромосомных мутаций. В результате в 1973 году был разработан микроядерный тест, основанный на учете микроядер в полихромных эритроцитах костного мозга. Позже тест стал применяться и для учета микроядер в различных тканях и органах: в лимфоцитах человека, в клетках печени, толстой кишки, ранних сперматидах и т. д. Микроядерный тест в силу простоты и возможности быстрого анализа стал одним из распространенных скриниговых тестов в генетической токсикологии.

Микроядра возникают из ацентрических фрагментов и хромосом, отставших в анафазе. Они одеваются мембраной, и в клетке наряду с основным ядром образуется микроядро.

Наиболее распространенным методом является учет микроядер в полихромных эритроцитах. С помощью этого метода исследовано большое количество соединений. Окрашивание препаратов производят по Романовскому – Гимза. Также широко используются окрашенные мазки костного мозга мышей и крыс. Метод можно применять для оценки не только индивидуальных факторов, но и для оценки генотоксической ситуации территорий, изучая микроядра в костном мозге или крови животных, обитающих на данных участках. Микроядерный тест на рыбах используется для оценки загрязнения водной среды.

49