Работа 20. Нингидриновая реакция на α-аминокислоты

Выполнение работы: в пробирку наливают 2 мл 1%-ного раствора яичного белка и прибавляют 2-3 капли 0,1% -ного раствора нингидрина. Смесь кипятят в течение 1-2 минут. Появляется розовато-фиолетовое или сине-фиолетовое окрашивание. При стоянии раствор синеет. Окрашивание указывает на наличие a - аминогруппы.

.

a‑аминокислота

нингидрин

альдегид

восстановленная форма нингидрина (гидриндантин)

продукт конденсации сине-фиолетового цвета

Аминокислоты, входящие в состав белковых молекул, являются L-α- аминокислотами. Для них характерна реакция с нингидрином. Для пролина и гидроксипролина нингидриновая реакция не характерна, так как это иминокислоты.

Работа 21. Реакция Адамкевича на наличие триптофана в белке

Выполнение работы: в первую пробирку наливают 5 капель 1% раствора яичного белка, во вторую – 5 капель 1% раствора желатина. В обе пробирки добавляют по 5 капель концентрированной уксусной кислоты, слегка нагревают, затем охлаждают и по стенке пробирки (осторожно), чтобы жидкости не смешивались, приливают 10 капель концентрированной серной кислоты. В первой пробирке на границе двух слоев наблюдается красно-фиолетовое окрашивание в виде кольца, постепенно распространяющееся на всю жидкость. В пробирке с раствором желатина реакция отрицательна, так как в желатине нет триптофана.

Тема 6. Липиды

В этом разделе представлены работы по изучению химических свойств жиров (масел). Липиды – большая группа органических соединений. Их роль в организме многогранна. Чаще они являются сложными эфирами спиртов (глицерин, холестерин и др.) и высших жирных карбоновых кислот. Триацилглицерины (нейтральные жиры) являются сложными эфирами глицерина и высших жирных кислот. Наиболее распространенными кислотами, входящими в состав липидов, являются пальмитиновая, стеариновая, олеиновая, линолевая, линоленовая и арахидоновая. Весьма важными группами липидов, входящих в организм человека, являются фосфолипиды (лецитины, кефалины и др.), сфинголипиды, гликолипиды. Наиболее распространенными из глицеролфосфатидов являются лецитины, состоящие из глицерина, высших жирных кислот, фосфорной кислоты и холина. Отличаются лецитины друг от друга жирными кислотами, как и другие фосфатидилглицерины.

Задача работы: научиться экспериментально доказывать наличие в липидах основных структурных компонентов; определять степень насыщенности высших жирных кислот; осуществлять омыление жиров.

Оборудование, материалы: растительное масло, 35 %-ный и 10% -ный раствор NaOH, кристаллический гидросульфат калия, 1%-ный раствор перманганата калия, 10%- ный раствор карбоната натрия, лецитин, 10%-ный раствор соляной кислоты, насыщенный раствор молибдата аммония, аскорбиновая кислота, фарфоровая чашка, стеклянные палочки, плитка, дистиллированная вода, пипетки, пробирки, спиртовка.

Работа 22 . Омыление жиров.

Выполнение работы: В небольшую фарфоровую чашку поместите 0,5 мл растительного масла и 4 капли 35 %-ного раствора NaOH. Стеклянной палочкой размешайте щелочь с маслом до получения однородной эмульсии. Затем поставьте чашку на электрическую плитку и при незначительном нагревании продолжайте помешивать, пока не получится однородная прозрачная слегка желтоватая жидкость. Затем добавьте 2 мл дистиллированной воды и вновь нагрейте, тщательно перемешивая до полного упаривания воды. Снимите чашку с электрической плитки. Получится кусочек твердого белого мыла.

Работа 23 . Открытие глицерина в жире

Выполнение работы: В пробирку наливают 2 - 3 капли жира, добавляют несколько кристалликов гидросульфата калия. Содержимое нагревают, образуется акролеин, который легко узнается по резкому удушливому запаху.

акролеин

Работа 24. Гидролиз лецитинов и открытие составных частей

Выполнение работы: В пробирку наливают 10 капель раствора лецитина и добавляют 20 капель 10% -ного раствора гидроксида натрия, содержимое осторожно кипятят 2-3 минуты. Холин, образующийся при гидролизе, превращается в триметиламин, который имеет запах селедочного рассола. К нескольким каплям гидролизата добавляется двойной объем 10% - ного раствора соляной кислоты, выпадает осадок свободных жирных кислот. Для открытия солей фосфорной кислоты к 5 каплям гидролизата добавляют такие же количества молибденового реактива и аскорбиновой кислоты. Жидкость окрашивается в синий цвет. Глицерин открывают по реакции образования хелатного соединения с Cu(OH)₂.

СН₂ –О – СО -C₁₇H₃₅СН₂ –ОH+C₁₇H₃₅COONa

а) CH – O – CO – C₁₇H₃₃ + 5NaOH CH – OH + C₁₇H₃₃COONa

O +

CH₂ –O –P-O-CH₂-CH₂-N≡(CH₃)₃ CH₂ –OH + Na₃PO₄

OH

лецитин (фосфатидилхолин)

HO-CH₂-CH₂-N⁺≡(CH₃)₃

холин

↓

(СН₃)₃N

триметиламин

б) Na₃PO₄+ молибденовый реактив + аскорбиновая кислота → осадок синего цвета

Работа 25 . Определение непредельности жира

Выполнение работы: В пробирку наливают по 0,5 мл подсолнечного масла и прибавляют 1 мл 1% -ного раствора перманганата калия и 10%- ного раствора карбоната натрия. Содержимое пробирки встряхивают. Через некоторое время окраска раствора перманганата калия исчезает.