Модификация Шеффер и Фултона.

1. На фиксированный в пламени мазок наливают насыщенный (5%) водный раствор малахитовой зелени на 30—60 секунд с подогреванием до появления паров (3—4 раза).

2. Краску смывают текущей водой 30—40 секунд.

3. Наливают 0,5% водный раствор сафранина приблизительно на 30 секунд.

4. Промывают водой, высушивают через фильтровальную бумагу.

Микроскопическая картина: споры — зеленые, вегетатив­ные формы —красные.

Способ Пешкова

Наиболее простой и демонстративный; он не требует химических протрав и дифференцировки.

Приготовленный мазок:

1. фиксируют на пламени горелки или смесью спирта и формалина,

2. окрашивают кипящей леффлеровской метиленовой синькой (над пламенем горелки) в течение 15—20 секунд,

3. смывают водой,

4. докрашивают 0,5% водным раствором нейтральрота в течение 30 секунд,

5. промывают водой и высушивают.

Микроскопическая картина: споры — голубого или синего цвета, молодые споры — черно-синие, цитоплазма вегетативных форм — розовая, хроматиновые элементы протоплазмы окрашиваются в фиолетовый цвет.

Способ Мюллера

1. Приготовленный на предметном стекле мазок из исследуемой культуры фиксируют на пламени.

2. На мазок наливают 5% водный раствор хромовой кислоты на 1—3 минуты.

3. Промывают препарат водой и слегка просушивают.

4. Через полоску чистой фильтровальной бумаги красят карболовым раствором фуксина при нагревании (до появле­ния паров) в течение 3—4 минут.

5. Обесцвечивают 5% водным раствором серной кислоты в течение 5 секунд.

6. Промывают водой.

7. Окрашивают допол­нительно леффлеровской синькой 1—2 минуты.

8. Промывают водой и вы­сушивают через фильтровальную бумагу.

Микроскопическая картина: споры — красные, вегета­тивные формы — синие.

Способ Ауески

На приготовленный, высушенный на воздухе (нефикси­рованный) мазок наливают 1—2% водный раствор соляной кислоты и подогре­вают на пламени до появления паров (3—4 раза). Затем препарат промывают водой, высушивают через фильтровальную бумагу, фиксируют на пламени и окрашивают карболовым раствором фуксина при нагревании (до появления паров) в течение 3—5 минут. Потом препарат обесцвечивают 5% водным рас­твором серной кислоты в течение нескольких секунд (до бледно-розовой окра­ски), промывают водой и дополнительно окрашивают леффлеровской метиле­новой синькой или 1% водным раствором малахитовой зелени в течение 2 минут. Краску смывают водой, мазок высушивают.

Микроскопическая картина; споры — красные, вегета­тивные формы — синие (или зеленые).

Способ Клейна

1. готовят в пробирке густую эмульсию путем смыва исследуемой культуры физиологическим раствором,

2. к эмульсии прибав­ляют равное количество карболового раствора фуксина,

3. пробирку со смесью нагревают на пламени (до появления паров) в течение 5 минут,

4. из прогретой смеси приготовляют мазок, высушивают его и фиксируют,

5. обес­цвечивают 1% водным раствором серной кислоты в течение 5—10 секунд,

6. промывают водой,

7. слегка подсушивают,

8. окрашивают леффлеровской синькой в течение 1—3 минут,

9. смывают водой и мазок обсушивают.

Микроскопическая картина: споры — красные, вегета­тивные формы — синие. Недостаток способа — значительный расход краски (фуксина).