Переходим к рассмотрению получения ферментных препаратов

(Слайд 41)

Первый этап при выборе продуцентов ферментов, как и других биологически активных веществ - скрининг из природных источников (образцов почв, воды, различных биоматериалов) и (или) коллекционных штаммов.

Существует Три вида посевного материала микроорганизмов - продуцентов ферментов

1.В виде культуры гриба

2. В виде мицелия

3. В виде спор

Скрининг продуцентов проводится в два этапа. На первом этапе выделяют микроорганизмы, которые потенциально обладают полезными свойст­вами. Для этого необходимы быстрые, достаточно чувствительные и недоро­гие методы. За первичным скринингом следует вторичный, в результате ко­торого отбирают микроорганизмы, характеризующиеся достаточным уров­нем биосинтеза нужного фермента. Отбор осуществляется различными мето­дами.

Исследования по отбору и целенаправленной селекции продуцентов играют важную роль в создании технологического процесса получения высокоочищенных ферментов. Получение штамма, синтезирующего в основном целевой продукт, в значительной мере упрощает схему дальнейшего выделения и очистки фермента.

(Слайд 42)

Субстраты, используемые при культивировании продуцентов ферментов (на твердых питатетельных средах)

1. Пшеничные отруби ( 20-25% крахмала, 12% белков, 10-15% клетчатка, 13% влаги)

2. Свекловичный жом (20-30% клетчатки)

3. Солодовые ростки – корешки проросшего ячменя ( витамины и аминокислоты)

4. Древесные опилки – разрыхлитель

5. Шелуха сельскохозяйственных культур (рис, гречиха, подсолнух)

(Слайд 43)

Схема получения посевного материала в виде культуры гриба

(Слайд 44)

Схема получения посевного материала в виде мицелия

(Слайд 45)

Получение посевного материала в виде спор

(Слайд 46)

Технология переработки культуральной жидкости

при производстве ферментов

Основы культивирования продуцентов ферментов.

Важную роль в биосинтезе ферментов играют условия культивирования продуцентов, в первую очередь кислотность среды условия аэрации, темпе­ратура. Имеется ряд работ, в которых указывается на возможность регуляции биосинтеза целевого фермента в зависимости от рН среды культивирования. Описывается преимущественный биосинтез кислотоустойчивой глюкоамилазы Aspergillus awamori при одновременном ингибировании синтеза других амилолитических ферментов. С понижением рН среды усиливается биосин­тез кислотоустойчивого компонента амилолитического комплекса у грибов рода Aspergillus и Rhyzopus. путем строгого регулирования рН можно изме­нять состав пектолитического комплекса Clostridium pectinofermentas. Про­дуценты бетта-галактозидазы наиболее интенсивно синтезируют фермент в кислой среде. Практически все современные ферментеры предусматривают возможность достаточно строгого контролирования и регулирования рН в заданном интервале, что свидетельствует о важности данного параметра для биосинтеза (целевого) фермента.

Продуценты ферментов, относящиеся к строгим анаэробам, требуют полностью бескислородных условий культивирования и очень богатых, полноценных сред.